392 matches
-
hârtie indicatoare universală (3.7). Se adaugă trei picături de soluție de sulfit de sodiu (3.2) și se amestecă. Se injectează o porțiune de 10 μl de soluție în cromatograful de lichid (4.2). Se compară această cromatogramă cu cromatograma obținută conform descrierii de la paragraful 5 pentru aceeași probă. (1) JO L 262, 27.09.1976, p. 169. (2) JO L 291, 24.10.1983, p.9. (3) JO L 224, 22.08.1985, p. 40. (4) JO L 383
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
evaporat și reziduul redizolvat într-un volum specific de cloroform sau de amestec de benzen și acetonitril. O parte alicotă din soluție este supusă cromatografiei în strat subțire (TLC). Cantitatea de aflatoxină B1 este determinată în urma iradierii cu UV a cromatogramei, fie vizual, fie prin fluorodensitometrie, prin comparație cu cantități cunoscute de aflatoxină B1 standard. Identitatea aflatoxinei B1 extrase din furaje trebuie confirmată prin procedura indicată. 3. Reactivi NB: Toți reactivii trebuie să aibă calitatea de "reactiv analitic", dacă nu este
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
din soluția standard de aflatoxină B1 (3.16); * 10 l din extractul obținut la 5.3 și, suprapus în același punct, 20 l din soluția standard (3.16); * 10 și 20 l din extractul obținut la 5.3. Se developează cromatograma la întuneric folosind unul din solvenții de developare (3.18). Alegerea acestuia trebuie făcută în prealabil, prin depunerea a 25 l din soluția standard calitativă (3.17) pe placă și verificarea separării complete la developare a aflatoxinelor B1 și B2
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
cu cea a spoturilor de aflatoxină B1 standard. 5.6. Confirmarea identității aflatoxinei B1 Se confirmă identitatea aflatoxinei B1 din extract prin procesele arătate în continuare. 5.6.1. Tratarea cu acid sulfuric Se pulverizează acid sulfuric (3.13) pe cromatograma obținută la 5.4. Fluorescența spoturilor de aflatoxină B1 trebuie să se schimbe din albastru în galben în urma iradierii cu UV. 5.6.2. Cromatografie bidimensională implicând formarea hemiacetalului de aflatoxină B1 (aflatoxină B12) NB: Operațiile descrise în continuare trebuie
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
A: un volum din extractul de eșantion purificat obținut la 5.3, care conține aproximativ 2,5 nm de aflatoxină B1; * în punctele B și C: 25 l din soluția standard (3.16). 5.6.2.2. Developare Se developează cromatograma în direcția I, la întuneric, folosindu-se solvent de developare (3.18.1) (strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se îndepărtează placa din rezervor și se lasă
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
indicate în figura 3 prin zona hașurată), protejând restul plăcii cu un strat de sticlă. Se lasă să reacționeze timp de 10 minute la întuneric și se usucă cu un curent de aer la temperatura camerei. În continuare, se developează cromatograma în direcția II, la întuneric, folosindu-se solvent de developare (3.18.1) (strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
3.18.1) (strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă la uscat la temperatura camerei. 5.6.2.3. Interpretarea cromatogramei Se examinează cromatograma în lumină UV (4.9) și se verifică următoarele. (a) Apariția unui spot fluorescent albastru de aflatoxină B1, provenită din soluția standard aplicată în punctul C (migrare în direcția I). (b) Apariția unui spot fluorescent albastru de
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă la uscat la temperatura camerei. 5.6.2.3. Interpretarea cromatogramei Se examinează cromatograma în lumină UV (4.9) și se verifică următoarele. (a) Apariția unui spot fluorescent albastru de aflatoxină B1, provenită din soluția standard aplicată în punctul C (migrare în direcția I). (b) Apariția unui spot fluorescent albastru de aflatoxină B1 care
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
frigider la 4°C, această soluție rămâne stabilă timp de două săptămâni. 7.2. Testarea purității cromatografice Se pun pe placa TLC (4.8) 5 l din soluția standard de aflatoxină B1, conținând 8-10 g/ml (7.1). Se developează cromatograma conform indicațiilor de la 5.4. În lumină UV, cromatograma ar trebui să prezinte un singur spot, fără ca vreo fluorescență să fie detectabilă la nivelul zonei originale de depunere. 8. Repetabilitate Diferența dintre rezultatele a două determinări paralele efectuate pe același
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
de două săptămâni. 7.2. Testarea purității cromatografice Se pun pe placa TLC (4.8) 5 l din soluția standard de aflatoxină B1, conținând 8-10 g/ml (7.1). Se developează cromatograma conform indicațiilor de la 5.4. În lumină UV, cromatograma ar trebui să prezinte un singur spot, fără ca vreo fluorescență să fie detectabilă la nivelul zonei originale de depunere. 8. Repetabilitate Diferența dintre rezultatele a două determinări paralele efectuate pe același eșantion, de către același analist, nu trebuie să depășească: * 25
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
redizolvat într-un volum specific de cloroform sau într-un amestec de benzen și acetonitril. O parte alicotă din această soluție este supusă cromatografiei bidimensionale în strat subțire (TLC). Cantitatea de aflatoxină B1 este determinată, în urma iradierii cu UV a cromatogramei, fie vizual, fie prin fluorodensitometrie, prin compararea cu cantități cunoscute de aflatoxină B1 standard. Identitatea aflatoxinei B1 extrasă din furaje trebuie confirmată prin procedura indicată. 3. Reactivi NB: Toți reactivii trebuie să aibă calitatea de "reactiv analitic", dacă nu este
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
standard (3.16). Se usucă într-un curent ușor de aer sau de gaz inert (3.11). Spoturile obținute trebuie să aibă un diametru de aproximativ 5 mm. 5.4.2. Developarea (se respectă diagrama din figura 1) Se developează cromatograma în direcția I, la întuneric, folosind solventul de developare (3.15.1) (strat de 1 cm într-un rezervor saturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă să
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
1 cm într-un rezervor saturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă să se usuce la întuneric la temperatura camerei timp de 15 minute. Apoi se developează cromatograma în direcția II, la întuneric, folosind solventul de developare (3.15.2) (strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă să
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
2) (strat de 1 cm într-un rezervor nesaturat) până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă să se usuce la întuneric la temperatura camerei. 5.4.3. Interpretarea cromatogramei (se respectă diagrama din figura 2) Se iradiază cromatograma cu radiații UV, poziționându-se placa la 10 cm de lampă (4.9). Se localizează poziția spoturilor fluorescente albastre B, C, D și E de aflatoxină B1 din soluția standard. Se
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
până când frontul de solvent ajunge la linia de limitare a acestuia. Se scoate placa din rezervor și se lasă să se usuce la întuneric la temperatura camerei. 5.4.3. Interpretarea cromatogramei (se respectă diagrama din figura 2) Se iradiază cromatograma cu radiații UV, poziționându-se placa la 10 cm de lampă (4.9). Se localizează poziția spoturilor fluorescente albastre B, C, D și E de aflatoxină B1 din soluția standard. Se trasează două linii imaginare care trec prin aceste spoturi
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
și se aplică în punctul A (vezi figura 1) 20 µl din extractul de eșantion purificat obținut la 5.3 și, peste acesta, 20 µl din soluția standard (3.16). Se developează conform indicațiilor de la 5.4.2. Se iradiază cromatograma cu radiații UV (4.9) și se verifică dacă: - spoturile de aflatoxină B1 din extract și din soluția standard se suprapun, - fluorescența acestui spot este mai intensă decât cea a spotului de aflatoxină B1 developat în punctul Q de pe prima
jrc329as1976 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85464_a_86251]
-
subțire trebuie preparat, se folosește silicagel amestecat cu circa 13% gips și se aplică într-un strat de 0,25 mm cu aparatură potrivită în conformitate cu instrucțiunile producătorului; 5. Micropipetă pentru măsurarea a 20 microlitri; 6. Recipient cu capac pentru developarea cromatogramelor; 7. Pulverizator; 8. Eter de petrol cu punct de fierbere între 40 și 60șC, redistilat înainte de folosire; 9. Etil eter anhidru pentru analiză; 10. Tetraclorură de carbon pentru cromatografie, redistilată înainte de folosire; 11. Acid fosfomolibdic pentru analiză; 12. Alcool etilic
jrc1285as1988 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86424_a_87211]
-
același desicator. Se aplică, picătură cu picătură, 20 microlitri de soluție clară pentru a forma o bandă cu o grosime constantă și 3 cm lățime pe un strat de preferat activat recent. Se lasă solventul să se evapore. Se developează cromatograma la temperatură normală cu tetraclorură de carbon folosind un recipient cromatografic ai cărui pereți sunt acoperiți cu hârtie de filtru muiată în solvent. După aproximativ o oră, solventul atinge o înălțime de 18 cm. Se scoate lamela și se lasă
jrc1285as1988 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86424_a_87211]
-
pereți sunt acoperiți cu hârtie de filtru muiată în solvent. După aproximativ o oră, solventul atinge o înălțime de 18 cm. Se scoate lamela și se lasă solventul să se evapore. Pentru o mai bună separare a benzilor, se developează cromatograma a doua oară. Se lasă din nou solventul să se evapore. Se pulverizează stratul subțire de silicagel cu o soluție de acid fosfomolibdic 20% în alcool etilic. Culoarea stratului trebuie să fie de un galben uniform. Se developează benzile prin
jrc1285as1988 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86424_a_87211]
-
Se pulverizează stratul subțire de silicagel cu o soluție de acid fosfomolibdic 20% în alcool etilic. Culoarea stratului trebuie să fie de un galben uniform. Se developează benzile prin încălzirea lamelei pulverizate la 110șC timp de 5 minute. IV. Interpretarea cromatogramei Dacă cromatograma arată o singură bandă principală colorată aprins cu un Rf de aproximativ 0,4 - 0,5, făina folosită pentru prepararea pastei respective este din grâu arnăut. Dacă, în schimb, apar două benzi principale de aceeași culoare, materia primă
jrc1285as1988 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86424_a_87211]
-
stratul subțire de silicagel cu o soluție de acid fosfomolibdic 20% în alcool etilic. Culoarea stratului trebuie să fie de un galben uniform. Se developează benzile prin încălzirea lamelei pulverizate la 110șC timp de 5 minute. IV. Interpretarea cromatogramei Dacă cromatograma arată o singură bandă principală colorată aprins cu un Rf de aproximativ 0,4 - 0,5, făina folosită pentru prepararea pastei respective este din grâu arnăut. Dacă, în schimb, apar două benzi principale de aceeași culoare, materia primă folosită este
jrc1285as1988 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86424_a_87211]
-
ale instrumentelor; eficiența analizei; identificarea produselor intermediare; - rezultate: curbele de biodegradare (controlul activității inocululului + curba substanței) CBO (mg) B (mg) Sa (mg) Sb (mg) CTO (mg) rata de degradare obținută prin determinarea CBO; rata de degradare obținută prin analiză chimică; cromatograme sau spectre ale produselor de testare obținute și folosite pentru analiză - probă de validitate (vezi pct. 1.3). 3.2. Interpretarea rezultatelor Se recomandă să se verifice dacă substanțele nu conțin azot care ar putea influența rezultatele. Dacă rata de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
reproductibilă (vezi pct. 4.4), în special seringa trebuie să fie anterior încălzită până la temperatura probei. Se măsoară suprafața (sau înălțimea) picurilor aferente CV și a etalonului intern, dacă este utilizat. 5.6.4 De îndată ce picurile de DMA apar pe cromatogramă, se elimină din coloană (4.3) excesul de DMA utilizându-se o metodă adecvată. 6. CALCULAREA REZULTATELOR 6.1 Se determină, prin interpolare pe curbă, concentrația necunoscută a fiecăreia dintre cele două soluții de probă luând în considerare soluția etalon
jrc609as1980 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85747_a_86534]
-
și 6.1) trebuie confirmată prin una dintre următoarele trei metode: - prin utilizarea a cel puțin unei alte coloane (4.3) care să prezinte o fază staționară cu o polaritate diferită. Această procedură trebuie să continue până când se obține o cromatogramă pe care picurile de CV și/sau de etalon intern nu se suprapun cu constituenții probei de material sau obiect, - prin utilizarea altor detectori, ex. detector de conductivitate microelectrolitic 3, - prin utilizarea spectrometriei de masă. În acest caz, dacă ionii
jrc609as1980 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85747_a_86534]
-
se analizează 1-2 l soluții de esteri metilici obținute din (i) fracția conținând erucatul de metil și (ii) fracțiile conținând alți esteri metilici ai acizilor grași. 6.3.2. Prin integratorul electronic se obțin următoarele zone de vârf: i Din cromatograma fracției care conține erucatul metilic: a. erucat de metil [E] b. etalon intern [L1] c. zonele totale de vârf ale esterilor metilici care exclud etalonul intern [EF] ii Din cromatograma fracțiilor care conțin alți esteri metilici ai acizilor grași: a
jrc613as1980 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85751_a_86538]