850 matches
-
a) Se păstrează două eprubete ce conțin cultură-mamă (3.1) și se reinoculează săptămânal. Se incubează timp de 24 ore la 37°C și se păstrează într-un frigider la aproximativ 4°C. Cu 24 de ore înainte de analiză, se inoculează cu această cultură două până la patru eprubete ce conțin mediu de cultură (4.1). Se incubează timp de 16-18 ore la 37°C. Se realizează o suspensie a culturii în soluție de clorură de sodiu (4.3). Transmisia ușoară a
jrc464as1978 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85602_a_86389]
-
0,1 cg/ml), U2 (conținut estimat: 0,05 µg/ml) și U1 (conținut estimat: 0,025 µg/ml) prin diluare succesivă (1+1) cu metanol 50 % (4.5). 8. PROCEDURA DE ANALIZĂ 8.1. Inocularea mediului de analiză Se inoculează mediul de analiză (4.2.2) cu suspensia bacteriană (3.2) la aproximativ 50°C. Prin încercări preliminare pe plăcile cu mediu de analiză (4.2.2) se determină cantitatea de suspensie bacteriană necesară pentru a forma cele mai mari
jrc464as1978 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85602_a_86389]
-
4.2) pentru a forma un strat de aproximativ 1,5 mm grosime (45 ml pentru o placă cu diametrul de 200 mm). Se lasă să se stabilizeze și se pune peste strat o cantitate de mediu (4.2.2) inoculat ca la pct. 8.1 pentru a obține un strat de 1 mm grosime (30 ml pentru a placă cu diametru de 200 mm). Se lasă să se stabilizeze din nou, se realizează orificiile și se pun în ele volume
jrc464as1978 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85602_a_86389]
-
Pe parcursul preparării mediilor TFS cu antibiotice este necesar ca pH-ul să fie controlat după adăugarea antibioticelor și ajustat pentru obținerea unui pH cuprins Între 7,0-7,4. Capitolul II Izolarea virusului Izolarea virusului pe ouă embrionate de găină Se inoculează 0,1-0,2 ml din supernatantul clarificat în cavitatea alantoidiană a cel puțin 4 ouă embrionate de găină puse la incubat timp de 8-10 zile. Ideal ar fi ca aceste ouă să provină de la un efectiv liber de germeni specifici
EUR-Lex () [Corola-website/Law/179305_a_180634]
-
utilizându-se ca inoculum lichid alantoidian/amniotic nediluat. În cazul hemaglutinării prezența bacteriilor este exclusă prin cultură. Dacă există bacterii se trec lichidele printr-o membrană filtrantă cu porii de 450 nm, se adaugă un supliment de antibiotice și se inoculează ouăle embrionate după cum este indicat mai sus. Capitolul III Diagnosticul diferențial 1. Diferențiere preliminară Intenția este ca toate virusurile hemaglutinante să fie prezentate laboratorului sanitar veterinar național prezentat la anexa nr. 4 la prezenta normă sanitară veterinară, în scopul identificării
EUR-Lex () [Corola-website/Law/179305_a_180634]
-
Jumătatea superioară a gelului IEF a fost scanată la λ = 634 nm. ANEXA XVI (Articolul 11) METODĂ DE REFERINȚĂ PENTRU DETECTAREA BACTERIILOR COLIFORME DIN UNT, LAPTE PRAF DEGRESAT, CAZEINĂ ȘI CAZEINAȚI La analiza untului pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme se inoculează probe de 1 g de unt în mediul de cultură. Pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme în lapte praf degresat sau cazeină/cazeinați, se inoculează probe de 0,1 g în mediul de cultură. Se folosește standardul FIL 73A: 1985, metoda
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
UNT, LAPTE PRAF DEGRESAT, CAZEINĂ ȘI CAZEINAȚI La analiza untului pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme se inoculează probe de 1 g de unt în mediul de cultură. Pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme în lapte praf degresat sau cazeină/cazeinați, se inoculează probe de 0,1 g în mediul de cultură. Se folosește standardul FIL 73A: 1985, metoda B cu următoarele modificări: 1) Pregătirea probelor se face conform standardului FIL 122B:1992. Pentru cazeină acidă se poate folosi ca alternativă procedura de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Pregătirea probelor se face conform standardului FIL 122B:1992. Pentru cazeină acidă se poate folosi ca alternativă procedura de preparare a probelor descrisă în standardul FIL 73A:1985. 2) Se incubează și se evaluează numai eprubete în care s-au inoculat probe de 1g (de unt) sau de 0,1 g (de lapte praf degresat sau respectiv de cazeină/cazeinați). Nu se fac diluări zecimale. Evaluarea rezultatelor Trei rezultate negative: Cerința este îndeplinită Două sau trei rezultate pozitive: Cerința nu este
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
de cultură celulare - care împiedică inocularea celulelor în primele 48 de ore de la prelevarea probelor de țesut, este admis că lichidul supernatant să fie congelat la -80°C, iar examenul virusologic să fie executat în maximum 14 zile. Înainte de a inocula celulele, se amestecă supernatantul cu părți egale cu un pool de antiser contra serotipurilor indigene de virus al necrozei pancreatice infecțioase - NPI -, diluat într-o manieră adecvată și incubat timp de minimum o oră la 15°C sau maximum 18
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
o diluție de 1:10 din această, rezultând diluții finale ale omogenatului de organe în mediul de culturi celulare de 1:100 și, respectiv, 1:1.000, în scopul prevenirii interferentei omologilor. Cel puțin două linii celulare trebuie să fie inoculate în conformitate cu prevederile art. 10 lit. a). Raportul dintre volumul inoculului - suspensia de organe tratată cu antibiotice - și volumul mediului de culturi celulare trebuie să fie de aproximativ 1:10. ... b) Pentru fiecare diluție și fiecare linie celulară trebuie să fie
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
similară cu cea din cultura primară. ... b) Cantitatea de mediu - lichid supernatant - care provine din toate culturile/godeurile ce constituie cultură primară este adunată într-un pool pentru fiecare linie celulară, la 7-10 zile după inoculare. Eșantioanele - pool-urile - sunt apoi inoculate pe culturi celulare omoloage, nediluat și diluat 1/10, rezultând în final diluții ale supernatantului de 1:10 și 1:100, astfel cum este descris în art. 11. Părți de 10% din mediul ce constituie cultură primară sunt inoculate direct
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
apoi inoculate pe culturi celulare omoloage, nediluat și diluat 1/10, rezultând în final diluții ale supernatantului de 1:10 și 1:100, astfel cum este descris în art. 11. Părți de 10% din mediul ce constituie cultură primară sunt inoculate direct într-un godeu cu culturi celulare proaspete, subcultivare godeu la godeu. Inocularea poate fi precedată de o preincubare a diluțiilor cu antiser contra virusului NPI în diluții corespunzătoare, în conformitate cu cap. ÎI art. 9. ... c) Incubarea următoare, timp de 7-10
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
50, vol:vol; 3. pool de antiser anti serotipurile indigene la virusul IPN la diluție 1:50, vol:vol; 4. doar mediu - martor pozitiv. c) 50 æl din fiecare amestec format din supernatantul cu virusul de identificat și ser se inoculează pe cel puțin două culturi celulare și se incubează la 15°C. Se urmărește apariția efectului citopatic așa cum este descris în art. 13. ... d) Unele tulpini de virus SHV nu reacționează la testele de neutralizare. Astfel de izolate trebuie să
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
Linia celulară EPC este recomandată pentru acest scop datorită aderentei sale puternice la suprafețele de sticlă, dar pot fi folosite, de asemenea, și alte linii celulare cum sunt BF2, RTG2 sau FHM. ... b) Virusul care trebuie să fie identificat se inoculează când celulele s-au prins pe suprafața de sticlă, la aproximativ o oră după tripsinizare, sau când culturile au fost incubate până la 24 ore. Patru culturi sunt inoculate la un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
BF2, RTG2 sau FHM. ... b) Virusul care trebuie să fie identificat se inoculează când celulele s-au prins pe suprafața de sticlă, la aproximativ o oră după tripsinizare, sau când culturile au fost incubate până la 24 ore. Patru culturi sunt inoculate la un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi la un raport de 1:1.000. Acestea sunt apoi incubate la 15°C pentru 20-30 de ore. ... c) După incubație, culturile sunt clătite de două ori în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
din reagentii menționați în partea I cap. IV art. 16. ... 3. a) Culturile celulare și mediile de cultură: astfel cum sunt prevăzute în partea I cap. III art. 10; b) Inocularea culturilor de celule: cel puțin două linii celulare sunt inoculate cu 50 æl din fiecare amestec virus-ser (preparat astfel cum este prevăzut la pct. 2 de mai sus). ... c) Incubarea culturilor celulare: astfel cum este prevăzută în partea I cap. III art. 12. ... d) Microscopie ... - culturile celulare inoculate sunt controlate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
antiserurile folosite nu împiedică apariția efectului citopatic, se procedează la identificarea virusului în conformitate cu cele prezentate în partea I cap. IV. e) Subcultivarea: dacă nu se produce nici un efect citopatic în 7-10 zile, se procedează la o subcultivare plecând de la culturi inoculate cu lichid supernatant și mediu în conformitate cu lit. B pct. 2 c) și partea I cap. III art. 14. ... C. Alte tehnici de diagnostic 1. Lichidul supernatant preparat astfel cum este indicat în partea I cap. ÎI art. 9 poate fi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
indică prezenta epitopilor, împărțiți între tulpinile parentale și cele sălbatice. B. Izolarea și creșterea virusului 1. Că rutină, suspensii filtrate de probe de epiteliu, lichid vezicular sau fecale suspecte de a conține virusul bolii veziculoase a porcului trebuie să fie inoculate pe culturi de celule sensibile. Dacă cantitatea și calitatea probelor prelevate din leziuni și supuse examinării sunt insuficiente pentru examinarea imediată prin ELISA, este necesară creșterea de virus în cultura de țesut pentru a amplifica antigenul viral. 2. Pentru a
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
a evita interferență cu virusul crescut pe interferon, a cărui eliberare va interfera cu virusul bolii veziculoase a porcului. Pentru izolarea virusului sunt adăugate numai antibiotice, în vederea menținerii mediului. Pentru diagnosticul diferențial față de febră aftoasa trebuie, de asemenea, să fie inoculate celule tiroidiene primare de bovine sau celule renale de pui de hamster (BHK-21). 3. Dacă se dezvoltă un efect citopatic, fluidul supernatant trebuie să fie prelevat din culturile pozitive, atunci când efectul este complet, și utilizat în testul ELISA pentru identificarea
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
celule renale de pui de hamster (BHK-21). 3. Dacă se dezvoltă un efect citopatic, fluidul supernatant trebuie să fie prelevat din culturile pozitive, atunci când efectul este complet, și utilizat în testul ELISA pentru identificarea virusului. Culturile negative trebuie să fie inoculate pe culturi de țesut proaspăt de 48 sau 72 de ore, iar acest pasaj orb trebuie examinat după 72 de ore. În absență efectului citopatic, după un pasaj orb ulterior proba poate fi declarată negativă pentru prezența virusului viu. 4
EUR-Lex () [Corola-website/Law/146332_a_147661]
-
de-a treia frunze adevărate. Cu toate acestea, s-a constatat că la plantele de vinete simptomele sunt mai puțin severe și se dezvoltă mai încet. Prin urmare, atunci când este posibil, se recomandă utilizarea plantulelor de tomate. 9.2. Se inoculează 100 f2μl de extract în fiecare plantă-test. 9.2.1. Inoculare prin injectare Plantele-test se inoculează în tulpină chiar deasupra cotiledoanelor cu ajutorul unei seringi cu ac hipodermic (minimum 23G). 9.2.2. Inoculare prin incizie Se ține planta între două
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
simptomele sunt mai puțin severe și se dezvoltă mai încet. Prin urmare, atunci când este posibil, se recomandă utilizarea plantulelor de tomate. 9.2. Se inoculează 100 f2μl de extract în fiecare plantă-test. 9.2.1. Inoculare prin injectare Plantele-test se inoculează în tulpină chiar deasupra cotiledoanelor cu ajutorul unei seringi cu ac hipodermic (minimum 23G). 9.2.2. Inoculare prin incizie Se ține planta între două degete și se pipetează pe tulpină, între cotiledoane și prima frunză, o picătură (circa 5-10 f2μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
de extract, se face o incizie diagonală pe o lungime de 1 cm și cu o adâncime egală cu aproximativ două treimi din grosimea tulpinii. Se închide incizia aplicând vaselină sterilă cu ajutorul unei seringi. 9.3. Prin aceeași tehnică se inoculează 5 plantule cu o suspensie apoasă de 10^5-10^6 celule per ml dintr-o cultură virulentă de 48 de ore de Ralstonia solanacearum biovar 2 drept control pozitiv și 5 plantule cu tampon fosfat (apendice 4) drept control negativ
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
testului biologic: Rezultatele testului biologic sunt valide atunci când plantele control pozitiv prezintă simptome tipice, bacteriile pot fi reizolate din aceste plante și nu se observă niciun simptom la plantele control negativ. Testul biologic este negativ în cazul în care plantele-test inoculate cu extract de probă nu sunt infectate cu Ralstonia solanacearum și cu condiția ca Ralstonia solanacearum să fie detectată în plantele control pozitiv. Testul biologic este pozitiv dacă plantele-test sunt infectate cu Ralstonia solanacearum. B. TESTE DE IDENTIFICARE Culturile pure
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
Se prepară un inoculum de circa 10^6 celule/ml dintr-o cultură de 24-48 de ore dintr-o tulpină corespunzătoare de control pozitiv de Ralstonia solanacearum (de exemplu, NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; vezi apendicele 3). ... (2) Se inoculează 5-10 plantule de tomate sau vinete sensibile, în stadiul celei de a treia frunze adevărate (vezi lit. A pct. 9). ... (3) Se incubează până la două săptămâni la 25-28°C și umiditate relativă crescută, asigurând o stropire corespunzătoare pentru a preveni
EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]