2,747 matches
-
sușele de control. Se aplică procedura FISH (van Beuningen et al, 1995) cu amorsă OLI-1 PCR (Seal et al, 1993). Cultura trebuie să prezinte aceeași reacție ca și controlul pozitiv. Profil proteic Proteinele celulelor întregi denaturate se separă prin electroforeza gelului de poliacrilamidă - PAGE (Stead, 1992a). Profilarea acizilor grași (FAP) Se crește cultura și o sușă de control pozitiv timp de 48 de ore la 28° C în mediu tripticaz-soia-agar și se aplică procedura FAP (Janse, 1991; Stead, 1992a; Stead, 1992b
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
produsul PCR. Dacă nu se efectuează imediat, fiolele se păstrează la 4°C, dacă se folosesc în aceeași zi, și la -18°C pentru o durată mai mare. 4.6. Analiza produsului PCR Fragmentele PCR se detectează prin electroforeză în gel de agar și colorare cu bromură de etidiu. 4.6.1. Se prepară un mediu agarizat corespunzător aducând încet la fierbere agaroza în tampon de electroforeză tri-acetată (ETA). 4.6.2 Se răcește agaroza topită la 50 - 60 °C, se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
fierbere agaroza în tampon de electroforeză tri-acetată (ETA). 4.6.2 Se răcește agaroza topită la 50 - 60 °C, se toarnă în cuva electroforezei și se introduce pieptenul. Soluția se lasă să se solidifice. 4.6.3 Se îndepărtează pieptenul. Gelul se introduce în ETA astfel încât să fie acoperit 2 - 3 mm de tampon. 4.6.4 Se pun 3 μl de picături de tampon de încărcare pe parafilm. Se adaugă 12 μl din produsul PCR din eșantion, din controlul pozitiv
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
din controlul pozitiv sau din controlul de apă și de amestecă prin aspirarea ușoară în conul pipetei înainte de încărcare. Volumele date pot fi modificate pentru a corespunde capacității puțurilor din mediul agarizat. 4.6.5 Puțurile se încarcă atent cu gel. Pentru referință, se include un marcator de ADN corespunzător în cel puțin unul dintre puțuri. 4.6.6 Se conectează firele de alimentare și cele ale echipamentului pentru electroforeză. Gelul este pus sub tensiune la 5 - 8 V/cm până când
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
mediul agarizat. 4.6.5 Puțurile se încarcă atent cu gel. Pentru referință, se include un marcator de ADN corespunzător în cel puțin unul dintre puțuri. 4.6.6 Se conectează firele de alimentare și cele ale echipamentului pentru electroforeză. Gelul este pus sub tensiune la 5 - 8 V/cm până când partea din față a indicatorului de urmărire este la 1 cm de capătul gelului. 4.6.7 Se oprește alimentarea. Se deconectează firele unității de electroforeză. Gelul se îndepărtează cu
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
dintre puțuri. 4.6.6 Se conectează firele de alimentare și cele ale echipamentului pentru electroforeză. Gelul este pus sub tensiune la 5 - 8 V/cm până când partea din față a indicatorului de urmărire este la 1 cm de capătul gelului. 4.6.7 Se oprește alimentarea. Se deconectează firele unității de electroforeză. Gelul se îndepărtează cu atenție. Se înmoaie în soluție de bromură de etidiu timp de 30 - 40 minute. Notă: Se poartă mănuși de unică folosire pe toată perioada
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
echipamentului pentru electroforeză. Gelul este pus sub tensiune la 5 - 8 V/cm până când partea din față a indicatorului de urmărire este la 1 cm de capătul gelului. 4.6.7 Se oprește alimentarea. Se deconectează firele unității de electroforeză. Gelul se îndepărtează cu atenție. Se înmoaie în soluție de bromură de etidiu timp de 30 - 40 minute. Notă: Se poartă mănuși de unică folosire pe toată perioada manipulării bromurii de etidiu care este un mutagen puternic! 4.6.8 Se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
288 bp. Se compară cu marcatorul de ADN și cu controlul pozitiv. Notă: Controlul de apă trebuie să fie negativ în toate cazurile. Dacă este pozitiv, testul se repetă. 4.6.10. Dacă este necesară o înregistrare permanentă, se fotografiază gelul. 4.6.11. Autenticitatea fragmentului amplificat este confirmată prin analiza enzimatică restrictivă (REA). 4.7 Analiza enzimatică restrictivă (REA) 4.7.1. Se transferă 8,5 μl din produsul PCR (4.5.3) într-o altă microfiolă. Se adaugă 1
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
7.2 Se amestecă prin aspirarea ușoară în conul pipetei. Dacă rămân picături pe pereții fiolei, se rotește pulsator într-o microcentrifugă. Se incubează o oră la 37 °C. 4.7.3 Fragmentul PCR digerat se analizează prin electroforeza în gel de agar ca mai înainte (4.6). Interpretarea rezultatelor testului PCR: Testul PCR este negativ dacă nu este detectat fragmentul caracteristic de 288 bp, iar fragmentul este detectat pentru sușa de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. Testul PCR este pozitiv
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cu acid sulfuric care este neutralizat cu calciu, magneziu, potasiu sau sodiu. Se extrage din anumite sușe naturale de alge marine din familia Gelidiaceae și Sphaerococcaceae și din alge roșii înrudite din clasa Rhodophyceae IESCE 232-658-1 Analiza Concentrația limită a gelului ar trebui să fie de cel mult 0,25% Descrierea Agarul este inodor sau are un miros ușor, caracteristic. Agarul nemărunțit se prezintă de obicei sub formă de fascicule alcătuite din benzi subțiri, aglutinate, membranoase sau sub formă de fragmente
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
fragmente de schelete ale bureților și câteva frustule de diatomee. În soluție de cloral hidratat, agarul pudră este mai transparent decât în apă, mai mult sau mai puțin granulat, striat, cu muchii ascuțite și ocazional conține frustule de diatomee. Rigiditatea gelului se poate standardiza prin adăugarea de dextroză și maltodextrine sau sucroză. Identificare A. Solubilitatea Insolubil în apă rece; solubil în apă la fierbere Puritate Pierderi la uscare Cel mult 22 % (105oC, 4 ore) Cenușă Cel mult 6,5 % raportat la
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
de 3:1. (În guma din semințe de salcâm raportul este de 4:1 și în guma guar de 2:1). IESCE 254-409-6 Descrierea Pulbere de culoare albă-galbenă, inodoră. Identificare A. Solubilitate Solubilă în apă Insolubilă în etanol B. Formarea gelului La o soluție apoasă de probă se adaugă o cantitate mică de borat de sodiu. Se formează un gel. Puritate Pierderi la uscare Cel mult 15 % Cenușă Cel mult 1,5 % Substanțe insolubile în acid Cel mult 2 % Proteine Cel
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
2:1). IESCE 254-409-6 Descrierea Pulbere de culoare albă-galbenă, inodoră. Identificare A. Solubilitate Solubilă în apă Insolubilă în etanol B. Formarea gelului La o soluție apoasă de probă se adaugă o cantitate mică de borat de sodiu. Se formează un gel. Puritate Pierderi la uscare Cel mult 15 % Cenușă Cel mult 1,5 % Substanțe insolubile în acid Cel mult 2 % Proteine Cel mult 3,5 % (factor N 5,7) Amidon Nedetectabil Arsenic Cel mult 3 mg/kg Plumb Cel mult 5
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
Arsenic Cel mult 3 mg/kg Plumb Cel mult 5 mg/kg Mercur Cel mult 1 mg/kg Cadmiu Cel mult 1 mg/kg Metale grele (de ex. Pb) Cel mult 20 mg/kg E 460 (i) CELULOZĂ MICROCRISTALINĂ Sinonime Gel de celuloză Definiție Celuloza cristalină este celuloză parțial depolimerizată, purificată preparată prin tratarea alfa-celulozei, obținute sub formă de pastă pentru fabricarea hârtiei din materiale din sușe naturale de plante fibroase, cu acizi anorganici. Gradul de polimerizare este de obicei mai
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
și etilici ai acizilor grași alimentari sau prin extracție din zaharozogliceride. La prepararea acestora nu se poate utiliza nici un solvent organic în afară de dimetilsulfoxid, dimetilformamidă, acetat de etil, propan-2-ol, 2-metil-1-propanol, propilenglicol și metiletilcetonă. Analiza Un conținut de cel puțin 80% Descrierea Geluri tari, solide moi sau pulberi de culoare albă până la alb -cenușie Identificare A. Teste pozitive pentru zahăr și pentru acizii grași B. Solubilitate Solubili moderat în apă Solubili în etanol Puritate Cenușă sulfatată Cel mult 2 %, determinată la 800 ± 25oC
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
prepararea acestora nu se poate utiliza nici un solvent organic în afară de ciclohexan, dimetilformamidă, acetat de etil, 2-metil-1-propanol și propan-2-ol. Analiza Un conținut de cel puțin 40 % și de cel mult 60 % esteri ai zaharozei cu acizi grași Descrierea Mase solide moi, geluri tari sau pulberi de culoare albă sau alburie Identificare A. Teste pozitive pentru zahăr și pentru acizii grași B. Solubilitate Insolubile în apă rece Solubile în etanol Puritate Cenușă sulfatată Cel mult 2 %, determinată la 800 ± 25oC Zaharoză liberă Cel
jrc3704as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88865_a_89652]
-
squirt Ascidii n.a.p. SSX Ascidiacea Șea squirts n.e.i. HSC Limulus polyphemus Horseshoe crab Nevertebrate marine n.a.p. INV ex lnvertebrata Aquatic invertebrates n.e.i. Alge brune SWB Phaeophyceae Brown seaweeds Iarbă-de-mare IMS Chondrus crispus Carragheen Gelidium GEL Gelidium spp. Gelidium spp. Gigartină GIG Gigartina spp. Gigartina spp. Litotamnii LIT Lithothamnion spp. Lithothamnion spp. Alge roșii SWR Rhodophyceae Red seaweeds UCU Fucus spp. Wracks n.e.i. ASN Ascophyllum nodosum North Atlantic rockweed FUU Fucus serratus Toothed wrack
jrc5361as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90530_a_91317]
-
3. Focalizarea izoelectrică a cazeinelor tratate cu plasmină în prezența ureii și colorarea proteinelor 3.4. Evaluarea benzilor colorate de γ2- și γ3-cazeină (dovezi ale prezenței laptelui de vacă) prin compararea benzilor obținute din probă cu benzile obținute pe același gel din probele de referință conținând 0% și 1% lapte de vacă. 4. Reactivi În afara cazurilor se precizează altceva, produsele chimice folosite trebuie să fie de puritate analitică. Apa folosită trebuie să fie dublu-distilată sau de o puritate echivalentă. Observație: Următoarele
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
referință conținând 0% și 1% lapte de vacă. 4. Reactivi În afara cazurilor se precizează altceva, produsele chimice folosite trebuie să fie de puritate analitică. Apa folosită trebuie să fie dublu-distilată sau de o puritate echivalentă. Observație: Următoarele detalii se aplică gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree preparate în laborator, cu dimensiunile de 265 x 125 x 0,25 mm. Dacă se folosesc geluri de alte dimensiuni sau tipuri, poate fi necesară modificarea condițiilor de separare. Focalizarea izoelectrică 4.1. Reactivi
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
analitică. Apa folosită trebuie să fie dublu-distilată sau de o puritate echivalentă. Observație: Următoarele detalii se aplică gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree preparate în laborator, cu dimensiunile de 265 x 125 x 0,25 mm. Dacă se folosesc geluri de alte dimensiuni sau tipuri, poate fi necesară modificarea condițiilor de separare. Focalizarea izoelectrică 4.1. Reactivi pentru producerea gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree 4.1.1. Soluție "stock" de gel Se dizolvă în apă: 4,85 g
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
cu conținut de uree preparate în laborator, cu dimensiunile de 265 x 125 x 0,25 mm. Dacă se folosesc geluri de alte dimensiuni sau tipuri, poate fi necesară modificarea condițiilor de separare. Focalizarea izoelectrică 4.1. Reactivi pentru producerea gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree 4.1.1. Soluție "stock" de gel Se dizolvă în apă: 4,85 g acrilamidă 0,15g N, N' - metilen-bis-acrilamidă (BIS) 48,05 g uree 15,00 g glicerol (87 % m/m), și se
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
x 0,25 mm. Dacă se folosesc geluri de alte dimensiuni sau tipuri, poate fi necesară modificarea condițiilor de separare. Focalizarea izoelectrică 4.1. Reactivi pentru producerea gelurilor de poliacrilamide cu conținut de uree 4.1.1. Soluție "stock" de gel Se dizolvă în apă: 4,85 g acrilamidă 0,15g N, N' - metilen-bis-acrilamidă (BIS) 48,05 g uree 15,00 g glicerol (87 % m/m), și se completează cu apă până la 100 ml, apoi se păstrează produsul obținut în refrigerator
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
10 zile; dacă conductibilitatea acesteia este mai mare de 5 μS, se deionizează substanța prin agitare cu 2 g Amberlite MB-3 timp de 30 minute, apoi se filtrează printr-o membrană de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecând aditivii și amfoliții cu soluția "stock" de gel (vezi 4.1.1). 9,0 ml soluție "stock" 24 mg ß-alanină 500 μl amfolit pH 3,5 - 9,517 250 μl amfolit pH 5-717
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
mai mare de 5 μS, se deionizează substanța prin agitare cu 2 g Amberlite MB-3 timp de 30 minute, apoi se filtrează printr-o membrană de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecând aditivii și amfoliții cu soluția "stock" de gel (vezi 4.1.1). 9,0 ml soluție "stock" 24 mg ß-alanină 500 μl amfolit pH 3,5 - 9,517 250 μl amfolit pH 5-717 250 μl amfolit pH 6-817 Se
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
agitare cu 2 g Amberlite MB-3 timp de 30 minute, apoi se filtrează printr-o membrană de 0,45 μm. 4.1.2. Soluția de gel Se prepară o soluție de gel amestecând aditivii și amfoliții cu soluția "stock" de gel (vezi 4.1.1). 9,0 ml soluție "stock" 24 mg ß-alanină 500 μl amfolit pH 3,5 - 9,517 250 μl amfolit pH 5-717 250 μl amfolit pH 6-817 Se amestecă soluția de gel și se degazeifică timp de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]