5,548 matches
-
în metastaze pulmonare, hepatice). CA 15 3 poate fi util în urmărirea eficienței terapiei neoplasmului mamar. Scopul studiului a fost de a determina concentrațiile serice ale markerului tumoral CA 15 -3 la un lot de paciente cu afecțiuni tumorale ale glandei mamare, în vederea integrării noilor metode și determinări de laborator în evaluarea postterapeutică a carcinomului mamar. Material și metodă Studiul a cuprins un număr de 45 de paciente selectate și grupate pe 3 loturi: lotul „ tu-mori maligne ” format din 15 paciente
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
ușurința cu care se recoltează, posibilitatea menținerii serurilor congelate până la 6 luni, impactul psihologic benefic asupra pacientei, accesibilitatea prețului, impun introducerea acestor noi determinări în mod curent. Capitolul 9 RECEPTORII HORMONALI DETERMINARE DE ESTROGEN RECEPTORI ȘI PROGESTERON RECEPTORI ÎN CANCERUL GLANDEI MAMARE Descoperirea receptorilor intracelulari pentru hormonii steroidici a reprezentat baza științifică care a permis elucidarea mecanismelor de acțiune ale acestor hormoni, la nivel molecular. Ca principiu de bază al acțiunii acestora, se consideră că ei se leagă de secvențe specifice
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
mai specifici, dar și de dezvoltare a datelor referitoare la markerii deja cunoscuți, urmărindu-se gradul lor de specificitate și selectivitate, semnificația lor ca factori de diagnostic sau prognostic, ca și a lămuririi mecanismului lor biologic de acțiune. Întrucât cancerul glandei mamare este caracterizat prin controlul hormonal al creșterii celulare, curent se realizează măsurători de ER, pentru selecția pacienților care să beneficieze de hormonoterapie. Deși prezența ER este considerată ca o posibilitate de a prezice răspunsul la hormonoterapie a tumorii, ea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
și de a regla expresia genică, funcție "normală" a complexului proteină-hormon. De asemenea, trebuie avută în vedere și prezența metastazelor, ce complică foarte mult răspunsul organismului la terapie. Descifrarea corectă a mecanismelor ce privesc dependența, respectiv independența hormonală a tumorii glandei mamare constituie obiectul cercetării în domeniu. În celule, transportul informației genetice se realizează prin intermediul moleculelor "semnal" care sunt captate de molecule "receptoare". Moleculele semnal sunt reprezentate de structuri specifice, cum ar fi: hormoni, neurotransmițători, retinoizi, medicamente, etc. , care interacționează cu
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
de legare de ADN și respectiv, de hormon. Celulele tipice conțin până la 10 molecule de receptori steroidici; fiecare poate lega o moleculă de hormon streroidic, cu o afinitate ridicată. De exemplu, receptorul pentru estrogen, în organe țintă ca uterul și glandele mamare are constanta de disociere pentru estrogen de circa 3 x 10 M -1 . Purificarea avansată a pro-teinei receptoare pentru hormonii estrogenici, prin cromatografie de înaltă performanță (HPLC) a permis determinarea masei moleculare: 200 kDa și a constantei de sedimentare
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
de HRE, iar selectivitatea răspunsului hormonal constă în utilizarea unui HRE specific pentru un grup de receptori. METODE DE ANALIZĂ ALE PROTEINELOR RECEPTOARE PENTRU ESTROGENI ȘI PROGESTERON Pentru caracterizarea receptorilor pentru estrogeni și progesteronă (ER și PR), din țesut de glandă mamară umană, sunt aplicate numeroase metode. Din punct de vedere clinic, aceste studii sunt utile, deoarece permit prezicerea răspunsului la terapia endocrină, dar din punct de vedere al laboratorului, multe dintre metodele de investigare ale receptorilor necesită timp, aparatură și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
considerate de referință [271]. De aceea, au fost necesare studii care să îmbunătățească metodologia; aceste studii au condus la dezvoltarea metodei imunochimice (ICA), bazată pe utilizarea anticorpilor monoclonali specifici receptorilor estrogenici umani. Spre exemplu, în cazul probelor de adenocarcinom de glandă mamară, după ce sunt dezghețate, sunt trecute în godeurile plăcuțelor speciale, apoi sunt fixate în etanol și incubate cu unul sau mai mulți anticorpi monoclonali de șoarece anti-ER sau anti-PR uman. Complecșii formați între anticorpi și receptori sunt vizualizați prin metoda
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
intact conține doar forma nucleară a receptorilor, iar "receptorii citosolici" reprezintă, de fapt, un artefact experimental, fiind rezultatul omogenizării tisulare. S-a observat existența unei bune corelații între rezultatele semicantitative obținute prin ICA și analizele SCC ale citosolului tumoral de glandă mamară. Faptul că metoda imunochimică oferă o serie de avantaje, în sensul că permite măsurarea ER și PR din cantități foarte mici de probă, a condus la obținerea unor kituri ce sunt comercializate. Metoda imuno-enzimatică (EIA Enzymatic immunoassays) Obținerea de
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
celor doi receptori, lotul studiat a prezentat următoarele fenotipuri maligne: 20 cazuri ER+PR+, 10 cazuri ER PRși 1 caz ER+PR-. Nivelul II Material biologic În determinările privind proteinele receptoare pentru hormonii steroidici s-a folosit țesut tumoral de glandă mamară umană și țesut din uter de șobolan (Rattus norveticus). Fragmentele tumorale de țesut uman destinate dozărilor biochimice ale receptorilor au fost preluate de la Laboratorul de Anatomie Patologică din Institutul Oncologic București. Probele au provenit de la 16 paciente și au
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
vârsta pacientelor a variat între 33 și 56 de ani (media a fost de 46 ani). După prelevare, probele au fost păstrate la congelator până la utilizare. Determinările histologie au demonstrat că, în toate cazurile, tumorile au fost localizate la nivelul glandei mamare. Țesutul tumoral extras din uter de șobolan a provenit de la femele imature și a fost folosit pentru experimente de electroforeză. Pentru studiul proteinelor receptoare pentru hormonii estrogenici și progesteron s-a utilizat fracțiunea celulară "solubilă" (citosol) separată din țesutul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
s-a utilizat fracțiunea celulară "solubilă" (citosol) separată din țesutul investigat. Pentru un experiment, pentru a obține o cantitate suficientă de citosol pentru toate determinările (dozare proteine, dozare concentrație receptori, etc.) sunt necesare aproximativ 500 mg de țesut tumoral de glandă mamară umană. Tehnica propriu-zisă pentru extracție va fi dezvoltată ulterior, fiind folosită și pentru dozarea proteinei pS2. Parametrii au următoarele semnificații fizice: T „mic” (ex. 3%) corespunde la un gel cu pori mari, în timp ce valori „mari” ale T (ex. 5
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
este exploatată de "metoda diferenței de absorbanță" ca metodă relativ simplă și rapidă de determinare a concentrației unei probe proteice. Tehnica determinării spectrofotometrice prin metoda Lowry va fi dezvoltată ulterior, când se va determina proteina pS2. Determinarea hormonodependenței tumorilor de glandă mamară umană Determinările experimentale efectuate au avut ca obiectiv fundamental evaluarea hormono-dependenței unor tumori de glandă mamară, prin determinarea cantitativă a ER și PR, în scopul selecției pacienților pentru terapia endocrină Practic, s-au dozat proteinele cu funcție de receptori pentru
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
concentrației unei probe proteice. Tehnica determinării spectrofotometrice prin metoda Lowry va fi dezvoltată ulterior, când se va determina proteina pS2. Determinarea hormonodependenței tumorilor de glandă mamară umană Determinările experimentale efectuate au avut ca obiectiv fundamental evaluarea hormono-dependenței unor tumori de glandă mamară, prin determinarea cantitativă a ER și PR, în scopul selecției pacienților pentru terapia endocrină Practic, s-au dozat proteinele cu funcție de receptori pentru hormonii steroidici de tip "sexual feminini" din fragmente tumorale de glandă mamară umană prin metoda cărbunelui
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
evaluarea hormono-dependenței unor tumori de glandă mamară, prin determinarea cantitativă a ER și PR, în scopul selecției pacienților pentru terapia endocrină Practic, s-au dozat proteinele cu funcție de receptori pentru hormonii steroidici de tip "sexual feminini" din fragmente tumorale de glandă mamară umană prin metoda cărbunelui acoperit cu dextran (DCC), utilizând hormoni (estrogen și progesteronă) marcați radioactiv ( 3H). O dozare completă necesită un timp de realizare de două zile consecutive, corespunzătoare celor două etape de lucru. Dozările au fost dependente de
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
timp de 20 min, la 3000 rpm, în centrifugă Janetzky. Supernatantul a fost extras și dizolvat în 3 ml lichid de scintilație, radioactivitatea probelor fiind determinată la un spectrometru de radiații . Variația concentrației proteice a probelor de țesut tumoral de glandă mamară în funcție de numărul de cazuri studiate Variația concentrațiile ER și PR la cazurile studiate Valorile obținute pentru cele 16 tumori au fost cuprinse între 2 si 70 fmoli/ mg proteină citosolică, pentru ER și respectiv, între 1 si 14,7
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
4. Pregătirea gelului de poliacrilamidă; 5. Separarea electroforetică (condiții: 20mA/100V); probe evidențiate cu albastru de bromfenol 0,02% (2 mg/ml apă bidistilată); 6. Porționarea gelului și măsurarea radioactivității; 7. Interpretarea rezultatelor. DETERMINAREA PROTEINEI pS2 IN TUMORILE MALIGNE ALE GLANDEI MAMARE Unul dintre markeri noi, de linia a II -a , îl reprezintă proteina pS2, care este de fapt, o molecula peptidică de 84 resturi de aminoacizi. Pentru prima data aceasta proteina a fost identificata in linia de celule de cancer
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
pS2, care este de fapt, o molecula peptidică de 84 resturi de aminoacizi. Pentru prima data aceasta proteina a fost identificata in linia de celule de cancer MCF 7, ulterior fiind depistata in probe prelevate de la bolnavele de cancer de glanda mamara, fiind folosita alături de catepsina D, atât ca factor de predicție si prognostic in aceasta forma de cancer, cit si ca forma de control in terapia hormonala. Se pare ca nivelul pS2 nu este crescut in țesutul; de glanda mamara
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
de glanda mamara, fiind folosita alături de catepsina D, atât ca factor de predicție si prognostic in aceasta forma de cancer, cit si ca forma de control in terapia hormonala. Se pare ca nivelul pS2 nu este crescut in țesutul; de glanda mamara normal si nici in cazul unor țesuturi „normale”: colon, pancreas, ficat, prostata, rinichi, ovar s. a. Determinarea prezentei in țesutul tumoral a proteinei pS2, prezintă astfel o importanta majora in alegerea liniei de tratament, respectiv identificarea pacienților care sa beneficieze
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
ng/mg cresc responsivitatea la tratamentul hormonal și cresc supraviețuirea liberă. [277]. Astfel, proteina pS2 este o proteină estrogen indusă care se pare a fi implicată în diferențierea celulară. Alături de ER, PR, PAI-1 reprezintă parametri prognostici în cancerul primitiv al glandei mamare [278]. pS2 - cancer al glandei mamare Fiind mai recent identificată fiind inclusă de unii autori, în categoria "markerilor tumorali de generația a doua" datele de literatură sunt mai puțin numeroase, comparativ cu cele referitoare la proteinele receptoare pentru hormonii
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
hormonal și cresc supraviețuirea liberă. [277]. Astfel, proteina pS2 este o proteină estrogen indusă care se pare a fi implicată în diferențierea celulară. Alături de ER, PR, PAI-1 reprezintă parametri prognostici în cancerul primitiv al glandei mamare [278]. pS2 - cancer al glandei mamare Fiind mai recent identificată fiind inclusă de unii autori, în categoria "markerilor tumorali de generația a doua" datele de literatură sunt mai puțin numeroase, comparativ cu cele referitoare la proteinele receptoare pentru hormonii steroidici [261]. În aceste condiții, studiul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
pS2, alături de proteinele receptoare, pot fi utilizați ca indicatori biochimici de prognostic pentru existența de tumori hormonodependente sau pentru riscul de recurență. Au fost studiate 16 de paciente internate în institut, toate cu diagnosticul de „tumoră primară malignă unilaterală a glandei mamare”. Pacientele au avut vârsta cuprinsă între 23 și 67 de ani și au fost supuse direct intervenției chirurgicale, fără tratament anterior de natură radiologică, chimică sau hormonală, care ar fi putut influența prin inducere nivelul pS2. După prelevarea probelor
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
s-a utilizat fracțiunea celulară „solubilă" (citosol) separată din țesutul investigat. Pentru un experiment, pentru a obține o cantitate suficientă de citosol pentru toate determinările (dozare proteine, dozare concentrație receptori, etc.) sunt necesare aproximativ 500 mg de țesut tumoral de glandă mamară umană. Pentru extracția citosolului, acesta este mărunțit (cu o foarfecă mecanică), apoi este omogenizat în tampon TEMTG, la un ultraturax, în 5 pulsuri a câte 15 secunde, cu 45 secunde pauză; omogenizarea s-a făcut pe gheață (pentru evitarea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
și, implicit a liniei de tratament sau al prognosticului. Foekens apreciază și rolul pS2 în stabilirea riscului de reactivare a cancerului și pentru evaluarea mai corectă a supraviețuirii. Pentru aplicarea corectă a terapiei endocrine la bolnavele cu tumori primare ale glandei mamare, dozarea numai a ER și PR s-a dovedit insuficientă, deoarece 50% dintre bolnavele cu RE+ și 25% dintre cele cu ER+/PR+ nu răspund la terapia hormonală. De aceea, dozarea numai a receptorilor pentru estrogeni (ER) cum se
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
a pS2. Dozarea pS2 este importantă și pentru faptul că gena care codează proteina este implicată în reglarea transcripției uneia dintre proteinele receptoare (ER). Folosindu-se anticorpii monoclonali, s-a demonstrat că pS2 este exprimată preponderent în tumorile primare ale glandei mamare de tip RE+. Mai mult, s-a observat, în urma determinării simultane a pS2, alături de ER și PR, că tumorile prezintă o heterogenicitate funcțională, în cazul ER+. În schimb, tumorile ERapar omogene, în sensul că nu exprimă nici RP și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
frecvență este în creștere (aproximativ 50% din cazurile noi). Datorită diferențelor în durata evoluției, a creșterii tumorale și a potențialului invaziv, acest grup este foarte heterogen. Capitolul 11 CONCEPTUL DE GANGLION SANTINELĂ Unul din factorii importanți de prognostic în cancerul glandei mamare îl reprezintă statusul ganglionilor axilari, marker clasic, care nu și-a pierdut valoarea ci din contră și-a redobândit noi valențe. Alături de creșterea importanței prognostice a ganglionilor pozitivi, oportunitatea clearingului axilar sistematic în cancerul mamar stă sub semnul întrebării
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]