11,250 matches
-
Western blotting) a fost introdus inițial pentru a identifica antigenele proteice care leagă anticorpi specifici. Un amestec complex de proteine este separat prin electroforeză, după care proteinele sunt transferate și legate la o membrană care poate fi analizată cu ajutorul unui anticorp marcat radioactiv. Studiile histologice clasice nu pot furniza detalii asupra localizării tisulare și celulare a proteinelor. Întrucât localizarea celulară a proteinelor poate furniza detalii despre rolurile lor fiziologice, iar modificarea poziției unor proteine poate duce la elucidarea unor mecanisme patologice
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
bolii și cu răspunsul la tratament. Este descoperit în 30-50 % din toate cazurile, în formele avansate de boală, fiind evidențiat în 70% din cazuri. Susceptibilitatea unei paciente de a avea boală metastatică crește odată cu creșterea valorilor serice ale CEA. Utilizând anticorpi monoclonali, s-a constatat că asocierea CEA-ER poate fi un predictor important pentru o anumită categorie de paciente cu prognostic favorabil (CEA negativ, ER pozitivi) [307]. CA 15-3 Este un biomarker de natură mucinică, recunoscut de 2 tipuri de anticorpi
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
anticorpi monoclonali, s-a constatat că asocierea CEA-ER poate fi un predictor important pentru o anumită categorie de paciente cu prognostic favorabil (CEA negativ, ER pozitivi) [307]. CA 15-3 Este un biomarker de natură mucinică, recunoscut de 2 tipuri de anticorpi monoclonali. Valorile crescute ale CA 15-3 sunt frecvent asociate metastazelor osoase sau diseminărilor multiple. Există diferențe individuale remarcabile la diferite paciente. Utilitatea sa în diagnosticarea tumorii primare este redusă; poate fi utilizat pentru monitorizarea tratamentului și a evoluției clinice. Creșteri
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
moartea celulelor provenind din diferite tipuri de țesuturi. Exemplele pot include moartea celulelor cu durată de viață scurtă (neutrofilele), involuția celulelor private de factorii de creștere necesari, moartea celulelor ce servesc drept țintă pentru mecanismele citotoxice mediate celular, dependente de anticorp, tumori în regresie [131]. Adesea semnalul declanșator provine din mediul ce înconjoară celula, așa cum se întâmplă în cazul expunerii sau privării de un hormon sau factor de creștere. Căile de acțiune a apoptozei diferă de la un tip celular la altul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
funcției normale a proteinei [53,82,100,122,123,124,192]. În celulele care exprimă această proteină, ea pare a fi esențială pentru creșterea și diviziunea celulară, de vreme ce pierderea acută de p53 prin introducerea de mARN antisens sau microinjecții cu anticorpi împiedică răspunsul celular față de factorii de creștere serici, manifestat prin sinteză de ADN. Concluzia ar fi că p53 joacă un rol esențial în creștera și diviziunea celulară normală, dar că în cursul dezvoltării unei tumori, celulele se pot adapta și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
cărei produs este o proteină membranară, membru al unei superfamilii din care TNF-R și NGF-R reprezintă molecule de referință [286,441]. La nivelul unei celule care exprimă Fas, fie în mod natural, fie în urma unei transfecții, legarea încrucișată a unui anticorp anti-Fas induce apoptoza [286]. Aceasta a fost doar o prezentare sumară a unor gene ce participă la procesul de moarte celulară progrmată. Pentru ca aceste gene să fie desemnate „ucigașe” trebuie ca produșii lor să îndeplinească două condiții: să poată induce
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
până la secționarea cu un criomicrotom. Secțiunile sunt plasate pe lame de microscop care pot fi tratate cu polilizină sau alți agenți, pentru a favoriza atașarea. Secțiunile de țesut sunt apoi incubate (timp de 4 16h, la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
sunt plasate pe lame de microscop care pot fi tratate cu polilizină sau alți agenți, pentru a favoriza atașarea. Secțiunile de țesut sunt apoi incubate (timp de 4 16h, la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
cu polilizină sau alți agenți, pentru a favoriza atașarea. Secțiunile de țesut sunt apoi incubate (timp de 4 16h, la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
a favoriza atașarea. Secțiunile de țesut sunt apoi incubate (timp de 4 16h, la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine diferite pot fi vizualizate simultan dacă
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
4 16h, la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine diferite pot fi vizualizate simultan dacă se folosesc anticorpi primari produși în specii diferite și anticorpi secundari
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
la 4 o C) cu anticorpi specifici proteinelor care trebuie studiate (anticorpi primari). Etapa ulterioară constă în incubarea țesutului (după spălarea anticorpului primar nelegat) cu un alt anticorp, secundar, direcționat împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine diferite pot fi vizualizate simultan dacă se folosesc anticorpi primari produși în specii diferite și anticorpi secundari, marcați cu
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
împotriva imunoglobulinelor speciei în care a fost produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine diferite pot fi vizualizate simultan dacă se folosesc anticorpi primari produși în specii diferite și anticorpi secundari, marcați cu substanțe cu spectre de excitație și emisie diferite. Se poate stabili astfel poziția relativă a proteinei luate în studiu față de alte proteine, a căror localizare în celulă este deja cunoscută
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
produs anticorpul primar. Anticorpul secundar este conjugat cu o substanță fluorescentă, făcând posibilă vizualizarea proteinei luate în studiu, cu ajutorul unui microscop. Două sau trei proteine diferite pot fi vizualizate simultan dacă se folosesc anticorpi primari produși în specii diferite și anticorpi secundari, marcați cu substanțe cu spectre de excitație și emisie diferite. Se poate stabili astfel poziția relativă a proteinei luate în studiu față de alte proteine, a căror localizare în celulă este deja cunoscută. Colocalizarea a două proteine poate semnifica existența
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
pe marea afinitate cu care avidina și streptavidina interacționează cu biotina. În mod curent, două metode se utilizează în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
cu care avidina și streptavidina interacționează cu biotina. În mod curent, două metode se utilizează în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor, care colorează cromogeni incolori în produși
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor, care colorează cromogeni incolori în produși finali colorați
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
electrofili (Mg 2+ , Mn 2+ , Zn 2+ ). Alegerea unei enzime pentru o tehnică imunohistochimică particulară trebuie să aibă în vedere o serie de factori: enzima trebuie să fie la îndemână într-o formă înalt purificată și relativ ieftină; conjugarea cu anticorpii sau cu avidina nu trebuie să afecteze activitatea enzimatică; enzima legată să fie stabilă în soluții; activitatea enzimelor endogene să interfereze minim cu colorația specifică a antigenului; produșii reacțiilor enzimatice să fie ușor detectabili și stabili; Peroxidaza (horseradish peroxidase) Este
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
vedere catalitic și, în absența unui donor de electroni, cum ar fi substanțele cromogene, este inhibat reversibil. Cianida și azida sunt alți doi inhibitori puternici, dar reversibili ai peroxidazei. Peroxidaza poate fi atașată, covalent sau necovalent, altor pro-teine, cum sunt anticorpii, avidina sau biotina. Numeroase avantaje fac din peroxidază una dintre enzimele cel mai frecvent utilizate în imunohistochimie: greutate moleculară redusă; obținere simplă în formă pură, minimum de contaminare; este stabilă și nu-și modifică proprietățile în timpul obținerii, păstrării și utilizării
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
la alta sau de la utilizator la utilizator; dacă reactivii continuă să se afle în stare buna de lucru. Aceste controale implică: A. substituiri de reactivi; B. controale tisulare. A. Substituiri de reactivi Dintre toți componenții utilizați în tehnicile de imunhistochimie, anticorpul primar este, fără nici o îndoiala, critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
controale tisulare. A. Substituiri de reactivi Dintre toți componenții utilizați în tehnicile de imunhistochimie, anticorpul primar este, fără nici o îndoiala, critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul de la care a fost obținut anticorpul primar. Absorbția prin afinitate a anticorpului primar cu un antigen înalt purificat este o manieră ideală de a obține un
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul de la care a fost obținut anticorpul primar. Absorbția prin afinitate a anticorpului primar cu un antigen înalt purificat este o manieră ideală de a obține un control negativ, valid pentru diferențierea colorării specifice de cea nespecifică. Problema este că antigenul purificat este greu de obținut și
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]