12,011 matches
-
dat. Faza staționară sau adsorbantul este în general ales un gel de siliciu. Legăturile care se stabilesc se datorează grupărilor silanol libere. Aluminiul, celuloza, cărbunele activ sunt de asemenea, utilizați ca adsorbanți. De obicei faza mobilă sau eluantul este un solvent uzual (sau un amestec de solvenți), caracterizat prin forța eluantă εo. Mărimi fundamentale Fenomenul de adsorbție în strat subțire poate fi considerat ca o tehnică de separare a compușilor dintr-un amestec. Pentru a putea evalua calitatea separării prin diferite
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
în general ales un gel de siliciu. Legăturile care se stabilesc se datorează grupărilor silanol libere. Aluminiul, celuloza, cărbunele activ sunt de asemenea, utilizați ca adsorbanți. De obicei faza mobilă sau eluantul este un solvent uzual (sau un amestec de solvenți), caracterizat prin forța eluantă εo. Mărimi fundamentale Fenomenul de adsorbție în strat subțire poate fi considerat ca o tehnică de separare a compușilor dintr-un amestec. Pentru a putea evalua calitatea separării prin diferite sisteme cromatografice, pe de o parte
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
același eluant și în condiții experimentale identice prezintă același aspect: fiecare compus migrează în același mod. Astfel, este posibil pentru un sistem cromatografic dat, să se caracterizeze un solut (substanța dizolvată) prin distanța pe care o parcurge în raport cu frontul de solvent. Desfășurarea procesului cromatografic Se va distinge cazul de mișcare al fazei mobile prin capilaritate și mișcare prin flux forțat. Placa, faza staționară În CSS, plăcile folosite sunt constituite dintr-un suport inert rigid sau flexibil (placă de sticlă, foiță de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
500 nl, iar cele prin seringi de 10 nl până la 100 μl. Utilizarea de capilare cu vârf confecționat din siliciu permite depunerea (spotarea) unui volum de 10 nl. e1e2proba1 cm e1, e2 = etaloane Practic, trebuie efectuată spotarea în soluția unui solvent, a cărui forță eluantă să fie mai puțin puternică decât cea a solventului de developare, altfel spus, dacă faza staționară este polară, spotarea trebuie efectuată într-un solvent cât mai apolar posibil. Aparatele semi- sau automate de spotare a probei
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de capilare cu vârf confecționat din siliciu permite depunerea (spotarea) unui volum de 10 nl. e1e2proba1 cm e1, e2 = etaloane Practic, trebuie efectuată spotarea în soluția unui solvent, a cărui forță eluantă să fie mai puțin puternică decât cea a solventului de developare, altfel spus, dacă faza staționară este polară, spotarea trebuie efectuată într-un solvent cât mai apolar posibil. Aparatele semi- sau automate de spotare a probei sunt disponibile din punct de vedere comercial: Nanomat®; pipeta este coborâtă spre stratul
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
e1e2proba1 cm e1, e2 = etaloane Practic, trebuie efectuată spotarea în soluția unui solvent, a cărui forță eluantă să fie mai puțin puternică decât cea a solventului de developare, altfel spus, dacă faza staționară este polară, spotarea trebuie efectuată într-un solvent cât mai apolar posibil. Aparatele semi- sau automate de spotare a probei sunt disponibile din punct de vedere comercial: Nanomat®; pipeta este coborâtă spre stratul fazei staționare prin acțiunea unui magnet. Volumele depuse sunt de 100-200 nl și reportabilitatea depunerii
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
solutul, el va fi antrenat de eluant din zona în care a fost depus. Volumele foarte diferite (0,5-500 μl) pot fi spotate cu seringa sau cu aparatul linomat. Tabelul următor prezintă caracteristicile spotării în CP. Spotarea probelor - caracteristici Natura solventului de spotare: - utilizarea unui solvent de spotare cu forța eluantă mai slabă decât a developantului Poziționarea spotului în raport cu nivelul de solvent: - 1 cm pentru plăcile CSS - 0,5 cm pentru plăcile HPTLC. Tip de spotare: - spotare în punct: CSS: - 0
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de eluant din zona în care a fost depus. Volumele foarte diferite (0,5-500 μl) pot fi spotate cu seringa sau cu aparatul linomat. Tabelul următor prezintă caracteristicile spotării în CP. Spotarea probelor - caracteristici Natura solventului de spotare: - utilizarea unui solvent de spotare cu forța eluantă mai slabă decât a developantului Poziționarea spotului în raport cu nivelul de solvent: - 1 cm pentru plăcile CSS - 0,5 cm pentru plăcile HPTLC. Tip de spotare: - spotare în punct: CSS: - 0,5-5 μl HPTLC: - 50-500 nl
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fi spotate cu seringa sau cu aparatul linomat. Tabelul următor prezintă caracteristicile spotării în CP. Spotarea probelor - caracteristici Natura solventului de spotare: - utilizarea unui solvent de spotare cu forța eluantă mai slabă decât a developantului Poziționarea spotului în raport cu nivelul de solvent: - 1 cm pentru plăcile CSS - 0,5 cm pentru plăcile HPTLC. Tip de spotare: - spotare în punct: CSS: - 0,5-5 μl HPTLC: - 50-500 nl - spotare în linie dreaptă: pentru toate cantitățile și toate tipurile de plăci. Alegerea modului de spotare
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
toate tipurile de plăci. Alegerea modului de spotare: - analiza calitativă: un capilar sau o miniseringă - analiza cantitativă (ameliorarea reproductibilității, preciziei și automatizării) Eșantioanele: - depunerea simplă - depunerea multiplă automat Developarea plăcilor Placa este plasată într-o cuvă (bac) de developare, conținând solventul (sau amestecul de solvenți) ce constituie faza mobilă. Ascensiunea capilară Stratul poros poate fi asimilat cu o multitudine de mici capilare interconectate și lichidul urcă pe strat umplând capilarele cele mai mici. Se constată experimental că, relația între distanța Z
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Alegerea modului de spotare: - analiza calitativă: un capilar sau o miniseringă - analiza cantitativă (ameliorarea reproductibilității, preciziei și automatizării) Eșantioanele: - depunerea simplă - depunerea multiplă automat Developarea plăcilor Placa este plasată într-o cuvă (bac) de developare, conținând solventul (sau amestecul de solvenți) ce constituie faza mobilă. Ascensiunea capilară Stratul poros poate fi asimilat cu o multitudine de mici capilare interconectate și lichidul urcă pe strat umplând capilarele cele mai mici. Se constată experimental că, relația între distanța Z parcursă de către frontul de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
ce constituie faza mobilă. Ascensiunea capilară Stratul poros poate fi asimilat cu o multitudine de mici capilare interconectate și lichidul urcă pe strat umplând capilarele cele mai mici. Se constată experimental că, relația între distanța Z parcursă de către frontul de solvent și timp este de forma. Influența fazei gazoase asupra vitezei ascensiunii în capilare Obișnuit, se constată că legea de mai sus nu este adesea respectată, mai ales când cuva de developare are dimensiuni mult mai mari decât cele ale plăcii
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
ales când cuva de developare are dimensiuni mult mai mari decât cele ale plăcii. Aceasta se datorează faptului că o parte a fazei este în contact cu atmosfera cuvei. Influența fazei gazoase se manifestă prin mai multe moduri: adsorbția vaporilor solventului de către stratul uscat și evaporarea solventului. Aceste 2 fenomene au loc concomitent. Atenuarea unuia din aceste efecte nu se poate controla mai ales când e vorba de amestecuri de solvenți. O placă de silicagel uscată absoarbe 10% apă din greutatea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
dimensiuni mult mai mari decât cele ale plăcii. Aceasta se datorează faptului că o parte a fazei este în contact cu atmosfera cuvei. Influența fazei gazoase se manifestă prin mai multe moduri: adsorbția vaporilor solventului de către stratul uscat și evaporarea solventului. Aceste 2 fenomene au loc concomitent. Atenuarea unuia din aceste efecte nu se poate controla mai ales când e vorba de amestecuri de solvenți. O placă de silicagel uscată absoarbe 10% apă din greutatea sa când este situată în atmosfera
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fazei gazoase se manifestă prin mai multe moduri: adsorbția vaporilor solventului de către stratul uscat și evaporarea solventului. Aceste 2 fenomene au loc concomitent. Atenuarea unuia din aceste efecte nu se poate controla mai ales când e vorba de amestecuri de solvenți. O placă de silicagel uscată absoarbe 10% apă din greutatea sa când este situată în atmosfera ambiantă. Singura soluție constă în a reproduce exact toate operațiunile efectuate în timpul unei cromatografieri. METODE DE DEVELOPARE ÎN CROMATOGRAFIA PLANARĂ Unele metode de developare
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
la cromatografia pe hârtie. Asupra acestora redăm mici detalii. Developarea liniară Cea mai mare parte a CP este realizată într-un sistem în care placa este dispusă vertical într-o cuvă adaptată dimensiunilor plăcilor. Pentru evitarea influenței nefaste a vaporilor solvenților, se utilizează așa numitele cuve „sendwich”: O placă de suport inert (sticlă etc.) este așezată paralel la o distanță de câțiva mm față de placa cu solutul de analizat; ca urmare a căldurii de adsorbție se evită transformarea solvenților volatili în
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
a vaporilor solvenților, se utilizează așa numitele cuve „sendwich”: O placă de suport inert (sticlă etc.) este așezată paralel la o distanță de câțiva mm față de placa cu solutul de analizat; ca urmare a căldurii de adsorbție se evită transformarea solvenților volatili în picături. Un alt procedeu pentru o developare liniară constă în dispunerea plăcii orizontal. Solventul ajunge din 2 părți opuse ale plăcii printr-o fantă capilară. Procesul de developare se oprește când cele 2 fronturi se întâlnesc. Avantajul acestui
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
este așezată paralel la o distanță de câțiva mm față de placa cu solutul de analizat; ca urmare a căldurii de adsorbție se evită transformarea solvenților volatili în picături. Un alt procedeu pentru o developare liniară constă în dispunerea plăcii orizontal. Solventul ajunge din 2 părți opuse ale plăcii printr-o fantă capilară. Procesul de developare se oprește când cele 2 fronturi se întâlnesc. Avantajul acestui sistem este că, permite ocuparea totală a stratului de adsorbant și dublarea numărului de eșantioane pe
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de eșantioane pe care le putem analiza. Developarea circulară În acest sistem faza staționară este dispusă orizontal, faza mobilă ajunge până la centrul plăcii și se distribuie uniform prin capilaritate, ceea ce produce un spot circular care crește dacă se continuă alimentarea solventului. Developarea anticirculară În acest procedeu, lichidul vector migrează de la periferie spre centrul plăcii. Practic, un canal foarte strâmt înconjură placa, este umplut de faza mobilă și transferul pe strat este realizat prin capilaritate. În acest sistem, suprafața ce trebuie să
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
diminuează pe măsură ce aceasta înaintează. Sisteme cu flux forțat Sistemul caută să împrospăteze capilaritatea și în acest fel să domine faza mobilă. Scopul imediat este câștigarea de timp și de a ajunge la un sistem de cvasicoloană. Utilizarea forței centrifuge Migrarea solventului este în funcție de viteza de rotație și de alimentare a fazei staționare. Viteza maximă permisă este definită de cantitatea de lichid ce poate alimenta stratul fără a inunda suprafața. FAZE STAȚIONARE Silicea Modificări chimice ale silicei Se introduc radicali alifatici C2-C18
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
lichid ce poate alimenta stratul fără a inunda suprafața. FAZE STAȚIONARE Silicea Modificări chimice ale silicei Se introduc radicali alifatici C2-C18, grupări diolice, CN etc. • Faze grefate polare Curent, sunt utilizate 3 tipuri de faze amino, cian și diol. Migrarea solvenților este rapidă și plăcile nu sunt sensibile la umiditate (cum sunt suporturile anorganice polare). Alumina (oxid de aluminiu, Al2O3) Toate substanțele organice (excepție fac hidrocarburile alifatice) sunt adsorbite de alumină. Compușii neionici care au grupe donoare de protoni sunt adsorbiți
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Kieselgurul folosit în cromatografia pe strat subțire este de o calitate specială, de o puritate avansată și cu mărimea particulelor de 10 μm. Tipuri de kieselgur folosit în cromatografia pe str Kieselgur G-B.D.H. Hidrox te mai ușor deshidratat de către solvenții anhidri; este solubil în alcool lizate: Sea Sorb-43- Fischer; Magnesia-West Vaco; hidroxid de magneziu Fischer. sorbosil M-2-A.S.L. (A.D.M.-2), silicat de iu se utilizează într-o formă alcalină cu pH = 9,8 și o formă neutră cu pH
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
un număr foarte redus de grupe OH libere, acestea fiind antrenate în legături de hidrogen care unesc diferite agregate structurale între ele. Celuloza se caracterizează apoi printr-un număr mare de canale și goluri în care se pot adsorbi ușor solvenți polari capabili de a diminua legăturile de hidrogen sau de a forma la rândul lor legături de hidrogen cu grupele OH. Are loc o lărgire a canalelor ceea ce duce la creșterea capacității de pătrundere a solvenților și a formării fazelor
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
se pot adsorbi ușor solvenți polari capabili de a diminua legăturile de hidrogen sau de a forma la rândul lor legături de hidrogen cu grupele OH. Are loc o lărgire a canalelor ceea ce duce la creșterea capacității de pătrundere a solvenților și a formării fazelor staționare lichide în acest suport. Capacitatea mare de a reține apa și solvenții polari conferă celulozei calități excelente de suport pentru cromatografia de repartiție lichid - lichid. Preparate din celuloză: pulbere de celuloză-D.O.-Camag, pulbere de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
la rândul lor legături de hidrogen cu grupele OH. Are loc o lărgire a canalelor ceea ce duce la creșterea capacității de pătrundere a solvenților și a formării fazelor staționare lichide în acest suport. Capacitatea mare de a reține apa și solvenții polari conferă celulozei calități excelente de suport pentru cromatografia de repartiție lichid - lichid. Preparate din celuloză: pulbere de celuloză-D.O.-Camag, pulbere de celuloză-D.F.O.-Camag, pulbere de celuloză 65-Schleicher-Schull, Celex D(DEAE)-Bio Rad. Lab. (SUA), Celuloza ECTEOLA
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]