14,361 matches
-
de timp afișat. Se va face o discuție pe marginea rezultatului obținut pentru suspensia de drojdie, prin prisma folosirii de către celulele de drojdie a energiei rezultate în urma procesului de respirație. Determinarea concentrației unei soluții de ATP prin metoda spectroscopiei de absorbție în domeniul UV Considerații teoretice Această lucrare urmărește utilizarea corectă a metodei de spectroscopie de absorbție în domeniul ultraviolet (UV), pentru a monitoriza coeficientul molar de extincție, având drept probă moleculele de adenozintrifosfat, ATP. De aceea, în cele ce urmează
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
prin prisma folosirii de către celulele de drojdie a energiei rezultate în urma procesului de respirație. Determinarea concentrației unei soluții de ATP prin metoda spectroscopiei de absorbție în domeniul UV Considerații teoretice Această lucrare urmărește utilizarea corectă a metodei de spectroscopie de absorbție în domeniul ultraviolet (UV), pentru a monitoriza coeficientul molar de extincție, având drept probă moleculele de adenozintrifosfat, ATP. De aceea, în cele ce urmează, vor fi prezentate principalele noțiuni teoretice care stau la baza determinărilor spectrofotometrice și informațiile privind caracteristicile
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
numărul de molecule din probă care interacționează cu lumina. Astfel, o soluție foarte concentrată, care apare colorată puternic, va absorbi o cantitate foarte mare de radiație, datorită numărului mare de molecule care vor interacționa cu lumina. Bazele fizicomatematice ale măsurătorilor absorbției luminii în gaze sau soluții, în regiunile UV-VIS și IR sunt reprezentate de legea Lambert Beer (relația 3). Absorbția (A), extincția (E) sau densitatea optică (DO) este mărimea preferată în studiile de spectroscopie de absorbție, deoarece ea este proporțională cu
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
absorbi o cantitate foarte mare de radiație, datorită numărului mare de molecule care vor interacționa cu lumina. Bazele fizicomatematice ale măsurătorilor absorbției luminii în gaze sau soluții, în regiunile UV-VIS și IR sunt reprezentate de legea Lambert Beer (relația 3). Absorbția (A), extincția (E) sau densitatea optică (DO) este mărimea preferată în studiile de spectroscopie de absorbție, deoarece ea este proporțională cu concentrația speciilor absorbante (c) și cu lungimea drumului parcurs (l) de radiație prin probă, este cunoscută sub denumirea de
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
lumina. Bazele fizicomatematice ale măsurătorilor absorbției luminii în gaze sau soluții, în regiunile UV-VIS și IR sunt reprezentate de legea Lambert Beer (relația 3). Absorbția (A), extincția (E) sau densitatea optică (DO) este mărimea preferată în studiile de spectroscopie de absorbție, deoarece ea este proporțională cu concentrația speciilor absorbante (c) și cu lungimea drumului parcurs (l) de radiație prin probă, este cunoscută sub denumirea de legea Lambert-Beer. O consecință al legii Lambert-Beer este posibilitatea de a mări lungimea drumului radiației prin
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
cu concentrația speciilor absorbante (c) și cu lungimea drumului parcurs (l) de radiație prin probă, este cunoscută sub denumirea de legea Lambert-Beer. O consecință al legii Lambert-Beer este posibilitatea de a mări lungimea drumului radiației prin probă, pentru a mări absorbția sau, dacă absorbția este prea mare, pentru a putea fi măsurată de către instrument, lungimea drumului prin probă poate fi redusă. Aplicații ale legii Lambert Beer În spectroscopia de absorbție în UV VIS, legea Lambert Beer este folosită pentru determinarea concentrațiilor
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
absorbante (c) și cu lungimea drumului parcurs (l) de radiație prin probă, este cunoscută sub denumirea de legea Lambert-Beer. O consecință al legii Lambert-Beer este posibilitatea de a mări lungimea drumului radiației prin probă, pentru a mări absorbția sau, dacă absorbția este prea mare, pentru a putea fi măsurată de către instrument, lungimea drumului prin probă poate fi redusă. Aplicații ale legii Lambert Beer În spectroscopia de absorbție în UV VIS, legea Lambert Beer este folosită pentru determinarea concentrațiilor unui număr foarte
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
de a mări lungimea drumului radiației prin probă, pentru a mări absorbția sau, dacă absorbția este prea mare, pentru a putea fi măsurată de către instrument, lungimea drumului prin probă poate fi redusă. Aplicații ale legii Lambert Beer În spectroscopia de absorbție în UV VIS, legea Lambert Beer este folosită pentru determinarea concentrațiilor unui număr foarte mare de substanțe, atunci când coeficientul molar de extincție (ελ) al substanței, la o anumită lungime de undă, este cunoscut și lungimea drumului radiației prin soluție este
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
calcularea cantității de substrat metabolizat de către o enzimă, în analiza spectrală a profirinelor, hemoglobinei sau în determinarea aminoacizilor aromatici, Trp și Tyr, din compoziția proteinelor. Limitări și abateri de la legea Lambert Beer Legea Lambert Beer dă un răspuns liniar între absorbția măsurată, A, și concentrația, c, a unei soluții care absoarbe radiație, pe anumite domenii de concentrație ale solvatului. Relația de liniaritate, dată de legea Lambert Beer, este valabilă doar pentru soluțiile diluate. Legea Lambert Beer are un număr de limitări
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
concentrație ale solvatului. Relația de liniaritate, dată de legea Lambert Beer, este valabilă doar pentru soluțiile diluate. Legea Lambert Beer are un număr de limitări, datorate unor factori chimici și performanțelor instrumentelor de măsură, printre care: citirea valorilor mari ale absorbției nu este posibilă. Absorbția tinde către infinit, dacă transmitanța tinde către zero. În practică, trebuie setate condițile experimentale, astfel încât absorbția să nu depășească 1,5; interacțiunile intermoleculare care apar la concentrații mari (c > ~ 25 mM) și care pot afecta răspunsul
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
de liniaritate, dată de legea Lambert Beer, este valabilă doar pentru soluțiile diluate. Legea Lambert Beer are un număr de limitări, datorate unor factori chimici și performanțelor instrumentelor de măsură, printre care: citirea valorilor mari ale absorbției nu este posibilă. Absorbția tinde către infinit, dacă transmitanța tinde către zero. În practică, trebuie setate condițile experimentale, astfel încât absorbția să nu depășească 1,5; interacțiunile intermoleculare care apar la concentrații mari (c > ~ 25 mM) și care pot afecta răspunsul cromoforilor la energia radiației
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
are un număr de limitări, datorate unor factori chimici și performanțelor instrumentelor de măsură, printre care: citirea valorilor mari ale absorbției nu este posibilă. Absorbția tinde către infinit, dacă transmitanța tinde către zero. În practică, trebuie setate condițile experimentale, astfel încât absorbția să nu depășească 1,5; interacțiunile intermoleculare care apar la concentrații mari (c > ~ 25 mM) și care pot afecta răspunsul cromoforilor la energia radiației; prezența particulelor suspendate, care pot determina împrăștierea luminii, reducând astfel, intensitatea luminii transmise prin probă; fluorescența
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
luminii transmise prin probă; fluorescența sau fosforescența probei; deplasarea echilibrului chimic, datorită creșterii concentrației; modificarea indicelui de refracție la concentrații mari de analit; deviații datorate prezenței radiațiilor nemonocromatice. 1. Modul de lucru După prepararea probelor, se va utiliza spectrofotometrul de absorbție Perkin Elmer Lambda 2, pentru determinarea absorbției probelor pregătite, folosind cuve cu dimensiunea în calea fasciculului de 1 cm. 1. Se va prepara o soluție tampon Tris HCl, de concentrație 50 mM, pH = 7,4; 2. Se va cântări ATP
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
probei; deplasarea echilibrului chimic, datorită creșterii concentrației; modificarea indicelui de refracție la concentrații mari de analit; deviații datorate prezenței radiațiilor nemonocromatice. 1. Modul de lucru După prepararea probelor, se va utiliza spectrofotometrul de absorbție Perkin Elmer Lambda 2, pentru determinarea absorbției probelor pregătite, folosind cuve cu dimensiunea în calea fasciculului de 1 cm. 1. Se va prepara o soluție tampon Tris HCl, de concentrație 50 mM, pH = 7,4; 2. Se va cântări ATP și se va prepara o soluție stoc
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
500 μM; 3. Se vor pregăti 10 eșantioane de câte 5 mL soluție de ATP, cu concentrații cuprinse între 1 μM și 250 μM. 4. Se va ajusta zero-ul spectrofotometrului, folosind cuvele cu soluție tampon, conform protocolului spectrofotometrului de absorbție. 5. Se vor înregistra spectrele de absorbție pentru probele pregătite, în intervalul 200 nm 500 nm. 2. Obținerea și interpretarea rezultatelor După setarea parametrilor experimentali și înregistrarea spectrelor de absorbție, vor fi urmați pașii de mai jos: 1. Se va
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
eșantioane de câte 5 mL soluție de ATP, cu concentrații cuprinse între 1 μM și 250 μM. 4. Se va ajusta zero-ul spectrofotometrului, folosind cuvele cu soluție tampon, conform protocolului spectrofotometrului de absorbție. 5. Se vor înregistra spectrele de absorbție pentru probele pregătite, în intervalul 200 nm 500 nm. 2. Obținerea și interpretarea rezultatelor După setarea parametrilor experimentali și înregistrarea spectrelor de absorbție, vor fi urmați pașii de mai jos: 1. Se va determina intensitatea maximului de absorbție al spectrului
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
spectrofotometrului, folosind cuvele cu soluție tampon, conform protocolului spectrofotometrului de absorbție. 5. Se vor înregistra spectrele de absorbție pentru probele pregătite, în intervalul 200 nm 500 nm. 2. Obținerea și interpretarea rezultatelor După setarea parametrilor experimentali și înregistrarea spectrelor de absorbție, vor fi urmați pașii de mai jos: 1. Se va determina intensitatea maximului de absorbție al spectrului și lungimea de undă la care apare acesta. 2. Se va reprezenta grafic variația Amax în funcție de concentrația de ATP din fiecare probă. Se
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
spectrele de absorbție pentru probele pregătite, în intervalul 200 nm 500 nm. 2. Obținerea și interpretarea rezultatelor După setarea parametrilor experimentali și înregistrarea spectrelor de absorbție, vor fi urmați pașii de mai jos: 1. Se va determina intensitatea maximului de absorbție al spectrului și lungimea de undă la care apare acesta. 2. Se va reprezenta grafic variația Amax în funcție de concentrația de ATP din fiecare probă. Se va determina panta graficului, prin regresie liniară, utilizând programul Origin. Coeficientul de corelație va fi
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
înlocui apa minerală. Se va urmări ca viteza de desfășurare a fotosintezei, cuantificată prin cantitatea de oxigen eliberat în apă, să crească aproape liniar cu intensitatea luminoasă. La finalul lucrării se vor interpreta și comenta rezultatele obținute. Utilizarea spectrofotometriei de absorbție în studiul acizilor nucleici și al proteinelor Scopul acestei lucrări de laborator este folosirea absorbției în domeniul ultraviolet (UV) a unor probe biologice, pentru a obține informații calitative și cantitative referitoare la aceste probe. Astfel, prin înregistrarea unor spectre de
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
de oxigen eliberat în apă, să crească aproape liniar cu intensitatea luminoasă. La finalul lucrării se vor interpreta și comenta rezultatele obținute. Utilizarea spectrofotometriei de absorbție în studiul acizilor nucleici și al proteinelor Scopul acestei lucrări de laborator este folosirea absorbției în domeniul ultraviolet (UV) a unor probe biologice, pentru a obține informații calitative și cantitative referitoare la aceste probe. Astfel, prin înregistrarea unor spectre de absorbție în domeniul UV a unor probe de acizi nucleici (ADN și ARN) și proteină
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
în studiul acizilor nucleici și al proteinelor Scopul acestei lucrări de laborator este folosirea absorbției în domeniul ultraviolet (UV) a unor probe biologice, pentru a obține informații calitative și cantitative referitoare la aceste probe. Astfel, prin înregistrarea unor spectre de absorbție în domeniul UV a unor probe de acizi nucleici (ADN și ARN) și proteină (de ex., BSA), cu ajutorul spectrofotometrului, se va urmări determinarea concentrației și purității probelor de ADN, ARN și proteină, precum și caracterizarea unui amestec de acizi nucleici/proteină
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
unor probe de acizi nucleici (ADN și ARN) și proteină (de ex., BSA), cu ajutorul spectrofotometrului, se va urmări determinarea concentrației și purității probelor de ADN, ARN și proteină, precum și caracterizarea unui amestec de acizi nucleici/proteină. Considerații teoretice Spectrele de absorbție a acizilor nucleici și a proteinelor Majoritatea moleculelor de interes biologic absorb radiațiile electromagnetice din domeniul UV al spectrului electromagnetic. Moleculele de acid dezoxiribonucleic (ADN) și acid ribonucleic (ARN) sunt formate din lanțuri de nucleotide (o grupare fosfat, un zahar
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
nucleotide (o grupare fosfat, un zahar și o bază azotată). Cele cinci tipuri de nucleotide diferă numai în ceea ce privește baza azotată: adenină (A), citozină (C), guanină (G), timină (T) și uracil (U). Fiecare dintre cele cinci baze azotate prezintă spectre de absorbție ușor diferite, având maxime la diferite lungimi de undă. Sunt prezentate lungimile de undă la care cele cinci baze azotate din componența moleculelor de ADN și ARN prezintă maxime de absorbție. Într-o primă aproximație, spectrul de absorbție al ADN
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
Fiecare dintre cele cinci baze azotate prezintă spectre de absorbție ușor diferite, având maxime la diferite lungimi de undă. Sunt prezentate lungimile de undă la care cele cinci baze azotate din componența moleculelor de ADN și ARN prezintă maxime de absorbție. Într-o primă aproximație, spectrul de absorbție al ADN-ului este media spectrelor celor patru baze azotate. Spectrele de absorbție, în domeniul UV, pot fi folosite pentru determinarea rapidă a concentrației și purității acizilor nucleici și proteinelor dintr-o soluție
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
spectre de absorbție ușor diferite, având maxime la diferite lungimi de undă. Sunt prezentate lungimile de undă la care cele cinci baze azotate din componența moleculelor de ADN și ARN prezintă maxime de absorbție. Într-o primă aproximație, spectrul de absorbție al ADN-ului este media spectrelor celor patru baze azotate. Spectrele de absorbție, în domeniul UV, pot fi folosite pentru determinarea rapidă a concentrației și purității acizilor nucleici și proteinelor dintr-o soluție, cunoscând următoarele aspecte: cuantificarea acizilor nucleici se
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]