KorAP: Find »[drukola/base=anticorp & drukola/pos=noun]« with Poliqarp

<1 ...107 108 109 ...450 >

11,250 matches

Corola-publishinghouse/Science/422_a_768

pe marea afinitate cu care avidina și streptavidina interacționează cu biotina. În mod curent, două metode se utilizează în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
cu care avidina și streptavidina interacționează cu biotina. În mod curent, două metode se utilizează în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
în laboratoare: metoda complexului avidină biotină (ABC-avidin biotin complex) și tehnica avidină marcată biotină (LAB-labelled avidin biotin). Ambele metode necesită folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
folosirea unui anticorp biotinilat, ca anticorp de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
de legare (link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor, care colorează cromogeni incolori în produși

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
link antibody). Biotinilarea reprezintă un proces de atașare covalentă a avidinei la anticorpi. Situsurile libere ale avidinei din complexul cu biotina sau ale avidinei marcate enzimatic se leagă de biotina cuplată cu anticorpul. Secvența aplicării reactivilor este următoarea: anticorp primar, anticorp secundar biotinilat, complex pre-format avidină biotină enzimă (ABC) sau avidina marcată enzimatic (LAB), solutia substrat. Enzime, substraturi si cromogeni Metodele de colorare imunoenzimatică se bazează pe reacțiile dintre enzime și substraturile lor, care colorează cromogeni incolori în produși finali colorați

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
electrofili (Mg 2+ , Mn 2+ , Zn 2+ ). Alegerea unei enzime pentru o tehnică imunohistochimică particulară trebuie să aibă în vedere o serie de factori: enzima trebuie să fie la îndemână într-o formă înalt purificată și relativ ieftină; conjugarea cu anticorpii sau cu avidina nu trebuie să afecteze activitatea enzimatică; enzima legată să fie stabilă în soluții; activitatea enzimelor endogene să interfereze minim cu colorația specifică a antigenului; produșii reacțiilor enzimatice să fie ușor detectabili și stabili; Peroxidaza (horseradish peroxidase) Este

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
vedere catalitic și, în absența unui donor de electroni, cum ar fi substanțele cromogene, este inhibat reversibil. Cianida și azida sunt alți doi inhibitori puternici, dar reversibili ai peroxidazei. Peroxidaza poate fi atașată, covalent sau necovalent, altor pro-teine, cum sunt anticorpii, avidina sau biotina. Numeroase avantaje fac din peroxidază una dintre enzimele cel mai frecvent utilizate în imunohistochimie: greutate moleculară redusă; obținere simplă în formă pură, minimum de contaminare; este stabilă și nu-și modifică proprietățile în timpul obținerii, păstrării și utilizării

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
la alta sau de la utilizator la utilizator; dacă reactivii continuă să se afle în stare buna de lucru. Aceste controale implică: A. substituiri de reactivi; B. controale tisulare. A. Substituiri de reactivi Dintre toți componenții utilizați în tehnicile de imunhistochimie, anticorpul primar este, fără nici o îndoiala, critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
controale tisulare. A. Substituiri de reactivi Dintre toți componenții utilizați în tehnicile de imunhistochimie, anticorpul primar este, fără nici o îndoiala, critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul de la care a fost obținut anticorpul primar. Absorbția prin afinitate a anticorpului primar cu un antigen înalt purificat este o manieră ideală de a obține un

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
critic. Pentru a-i verifica specificitatea, el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul de la care a fost obținut anticorpul primar. Absorbția prin afinitate a anticorpului primar cu un antigen înalt purificat este o manieră ideală de a obține un control negativ, valid pentru diferențierea colorării specifice de cea nespecifică. Problema este că antigenul purificat este greu de obținut și

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
el este înlocuit: fie cu un antiser absorbit prin afinitate; fie cu un alt anticorp, irelevant; fie cu un ser de la un animal neimunizat, din aceeași specie cu animalul de la care a fost obținut anticorpul primar. Absorbția prin afinitate a anticorpului primar cu un antigen înalt purificat este o manieră ideală de a obține un control negativ, valid pentru diferențierea colorării specifice de cea nespecifică. Problema este că antigenul purificat este greu de obținut și de aceea extrem de costisitor, ceea ce face

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
că antigenul purificat este greu de obținut și de aceea extrem de costisitor, ceea ce face ca laboratoarele de histopatologie clinică să îl folosească rar. De aceea, cele mai multe laboratoare utilizează seruri non-imune, de la animale din aceeași specie cu animalul imunizat, sursă a anticorpului primar, sau antiseruri cu specificități irelevante. Dacă anticorpul primar este monoclonal, probabil cel mai bun control negativ este alt anticorp irelevant. Obiectivul principal în alegerea unui bun control este acela de a imita anticorpul primar sub toate aspectele, mai puțin

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
de aceea extrem de costisitor, ceea ce face ca laboratoarele de histopatologie clinică să îl folosească rar. De aceea, cele mai multe laboratoare utilizează seruri non-imune, de la animale din aceeași specie cu animalul imunizat, sursă a anticorpului primar, sau antiseruri cu specificități irelevante. Dacă anticorpul primar este monoclonal, probabil cel mai bun control negativ este alt anticorp irelevant. Obiectivul principal în alegerea unui bun control este acela de a imita anticorpul primar sub toate aspectele, mai puțin specificitatea antigenică. Anticorpul și substituentul trebuie să conțină

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
îl folosească rar. De aceea, cele mai multe laboratoare utilizează seruri non-imune, de la animale din aceeași specie cu animalul imunizat, sursă a anticorpului primar, sau antiseruri cu specificități irelevante. Dacă anticorpul primar este monoclonal, probabil cel mai bun control negativ este alt anticorp irelevant. Obiectivul principal în alegerea unui bun control este acela de a imita anticorpul primar sub toate aspectele, mai puțin specificitatea antigenică. Anticorpul și substituentul trebuie să conțină concentrații proteice aproximativ identice, să aibă vechime (±1 an) și, astfel, să

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
specie cu animalul imunizat, sursă a anticorpului primar, sau antiseruri cu specificități irelevante. Dacă anticorpul primar este monoclonal, probabil cel mai bun control negativ este alt anticorp irelevant. Obiectivul principal în alegerea unui bun control este acela de a imita anticorpul primar sub toate aspectele, mai puțin specificitatea antigenică. Anticorpul și substituentul trebuie să conțină concentrații proteice aproximativ identice, să aibă vechime (±1 an) și, astfel, să conțină cantități similare de agregate proteice, care ar putea contribui la colorare nespecifică (DAKO

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
antiseruri cu specificități irelevante. Dacă anticorpul primar este monoclonal, probabil cel mai bun control negativ este alt anticorp irelevant. Obiectivul principal în alegerea unui bun control este acela de a imita anticorpul primar sub toate aspectele, mai puțin specificitatea antigenică. Anticorpul și substituentul trebuie să conțină concentrații proteice aproximativ identice, să aibă vechime (±1 an) și, astfel, să conțină cantități similare de agregate proteice, care ar putea contribui la colorare nespecifică (DAKO Corporation). B. Controale tisulare Pot fi de tipuri diferite

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
și colorare. Practic, proba și controlul există pe aceeași secțiune, fără a mai fi necesare controale pozitive separate. Pentru a identifica și pentru a localiza mai precis în celulă pro-teina luată în studiu, examinarea celulor se face la microscopul electronic. Anticorpul specific poate fi cuplat cu particule mici de aur care apar electron dense, marcând poziția proteinei la care se leagă anticorpul. Principalul dezavantaj al metodelor prezentate mai sus constă în faptul că specimenele examinate nu sunt celule vii, acest lucru

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
și pentru a localiza mai precis în celulă pro-teina luată în studiu, examinarea celulor se face la microscopul electronic. Anticorpul specific poate fi cuplat cu particule mici de aur care apar electron dense, marcând poziția proteinei la care se leagă anticorpul. Principalul dezavantaj al metodelor prezentate mai sus constă în faptul că specimenele examinate nu sunt celule vii, acest lucru împiedicând examinarea în dinamică a proteinei luate în studiu. Capitolul 6 FACTORII DE CREȘTERE Creșterea tumorală, reflectată în mărimea tumorii și

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
Secțiunile au fost inițial deparafinate, tratate pentru demascarea situsurilor antigenice cu soluție de demascare (DAKO Target Retrieval Solution), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a tehnicii de incubarea probelor, la 4 0 C, cu un anticorp primar de iepure, anti-neu uman. Etapa a doua a constat în incubarea cu anticorpul secundar, antiiepure, biotinilat, 10 minute, la temperatura camerei. În a treia etapă secțiunile au fost incubate cu complexul enzimatic streptavidină-peroxidază (LSAB - DAKO), 10 minute, la temperatura

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
DAKO Target Retrieval Solution), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a tehnicii de incubarea probelor, la 4 0 C, cu un anticorp primar de iepure, anti-neu uman. Etapa a doua a constat în incubarea cu anticorpul secundar, antiiepure, biotinilat, 10 minute, la temperatura camerei. În a treia etapă secțiunile au fost incubate cu complexul enzimatic streptavidină-peroxidază (LSAB - DAKO), 10 minute, la temperatura camerei. Evidențierea activității enzimatice s-a realizat cu DAB/H 2 O 2 , 10-15

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
apărând astfel surprinzătoare detectarea prin imunohistochimie în carcinoamele ductale in situ [266]. A fost demonstrată o puternică relație cu Ki67 și p53 dar nu au fost evidențiate asocieri cu statusul menopauzal, volumul tumoral sau prezența metastazelor [380]. Herceptinul este un anticorp monoclonal recombinat care se leagă de receptorul transmembranar al factorului de creștere HER-2/neu și este unul din exemplele de succes ale terapiei în cancer. Cu toate acestea, s-a constatat că procente semnificative ale pacientelor care au primit Herceptin

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
de demascare a situsurilor antigenice, prin tratare cu soluție de demascare (Retrieval Antigen Solution - DAKO), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a protocolului de lucru a fost incubarea secțiunilor, la 4 0 C, cu nu anticorp monoclonal murin, anti-p53 uman (clona DO-7 - DAKO), anticorp ce are specificitate pentru un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă s-a realizat incubarea secțiunilor cu anticorpul secundar

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
soluție de demascare (Retrieval Antigen Solution - DAKO), la 98 0 C, timp de 20 de minute. Prima etapă a protocolului de lucru a fost incubarea secțiunilor, la 4 0 C, cu nu anticorp monoclonal murin, anti-p53 uman (clona DO-7 - DAKO), anticorp ce are specificitate pentru un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă s-a realizat incubarea secțiunilor cu anticorpul secundar, biotinilat, la temperatura camerei, 10 minute. A treia

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
nu anticorp monoclonal murin, anti-p53 uman (clona DO-7 - DAKO), anticorp ce are specificitate pentru un epitop comun, ceea ce face posibilă interacțiunea sa cu forma normală cât și cu cele mutante. În a doua etapă s-a realizat incubarea secțiunilor cu anticorpul secundar, biotinilat, la temperatura camerei, 10 minute. A treia etapă a constat în incubarea cu conjugatul enzimatic streptavidină - peroxidază, la temperatura camerei, 10 minute (metoda LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu DAB/H 2 O 2 pentru 10-12

CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID (2009) [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]