850 matches
-
pentru comparație sunt supuse cromatografiei ascendente pe hârtie. Antibioticele sunt detectate și identificate prin comparația valorilor Rf cu acelea ale substanțelor standard, fie prin fluorescență în lumină UV (conținut ridicat de antibiotice) sau prin bioautografie într-un mediu de geloză inoculat cu B cereus. 3. Reactivi și mediul de cultură 3.1 Soluție tampon, pH 3,5 Acid citric monohidrat A.R. 10,256 g Difosfat de sodiu Na2HPO4 ·2H2O A.R. 7,45 g Acetonă A.R. 300 ml Apă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de 1 μg per cm2, după ce cromatograma a fost tratată cu vapori de amoniac (3.7) sunt observate iradiații fluorescente galbene auriu sub lumină UV (4.4). 7.3 Detectarea prin bioautografie Se toarnă mediul de cultură (3.10), anterior inoculat cu B cereus (3.9), într-un taler de sticlă (4.5) și hârtia se plasează în mediul de cultură. După 5 minute de contact, se detașează hârtia și se plasează pe un alt loc din mediul de cultură, unde
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
geloză însămânțat cu B cereus. Difuzia este evidențiată prin formarea zonele de inhibiție în prezența microorganismului. Diametrul acestor zone este direct proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganismele: B cereus, ATTC nr. 11.778 3.1 Menținerea sușei părinte Se inoculează cu B cereus un tub de geloză luat dintr-un mediu de cultură (4.1) fără metilen albastru și acid boric .Se incubează peste noapte la aproximativ 30ș C. Se păstrează cultura într-un frigider și se re-inoculează tubul de
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
inoculum care, pentru diferitele concentrații de antibiotice folosite, dă cele mai întinse zone de inhibiție posibile care încă mai sunt clare. Această cantitate este de obicei între 0,2 și 0,3 per 1 000 ml. Mediul de cultură este inoculat între 50 și 60ș C. 4. Mediul de cultură și reactivii 4.1 Mediul de bază pentru determinare 1 Glucoză 1 g Peptonă triptică 10 g Extract din carne 1,5 g Extract din drojdie 3 g Geloză, conform cantității
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
tampon de fosfat (4.3). 6.2.2 Oxitetraciclină și tetraciclină Se procedează cum este indicat la pct. 6.2.1, folosind amestecul (4.10) în loc de amestecul (4.9). 7. Metoda de determinare 7.1 Inocularea mediului de cultură Se inoculează la 50 - 60ș C mediul de bază pentru determinarea (4.1) cu suspensia de spori (3.2). 7.2 Prepararea tăvilor Difuzia în geloză se realizează în tăvi folosind 4 concentrații ale soluției standard (S3, S4, S2 și S1) și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
transmisiei luminii a unui mediu de cultură care a fost însămânțat cu Staphylococus aureus și la care s-a adăugat antibioticul. Transmisia luminii depinde de concentrația de antibiotic. 3. Microorganisme: Staphylococus aureus K 1411 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu S. aureus într-un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1), la care s-a adăugat 1,5 - 3 % de geloză (în funcție de calitate). Se incubează peste noapte la 37ș C. Se păstrează cultura într-un frigider
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
cele 2 tuburi, și 0,5 ml (= 0,24 μg) în fiecare din celelalte 2 tuburi. Se completează volumul din ultimele două tuburi până la 1 ml cu soluția tampon de fosfat (4.2). 7.2 Inocularea mediului de cultură Se inoculează mediul de bază pentru determinare (4.1) cu inoculumul (3.2) pentru a obține cu fotometrul la 590 nm transmisia luminii 85 % în celule de 5 cm sau transmisia 92 % în celule de 2 cm, aparatul fiind fixat la transmisia
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
cereus. Difuzia este făcută vizibilă de formarea unor zone de inhibiție în prezența microorganismului. Diametrul acestor zone este direct proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganisme: B. cereus K 230 TR1 ( rezistent la tetraciclină) 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu B. cereus un tub de geloză luat dintr-un mediu de cultură (4.1) la care se adaugă 100 μg pe 5 ml de Oxitetraciclină. Se incubează peste noapte la aproximativ 30ș C. Se păstrează cultura în frigider și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
cantitățile de inoculum care, pentru diferite concentrații de oleandomicină folosită, vor da cele mai largi zone posibile care sunt încă clare. Această cantitate este de obicei între 0,1 și 0,2 pe 1 000 ml. Mediul de cultură este inoculat la 60ș C. 4. Mediul de cultură și reactivii 4.1 Mediul pentru menținerea sușei parentale 2 Glucoză 1 g Peptonă triptică 10 g Extract de carne 1,5 g Extract de drojdie 3 g Geloză, în funcție de calitate de la 10
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
obține o concentrație presupusă de oleandomicină de 0,1 μg pe ml (= U2). Apoi se prepară concentrațiile U4, U2 și U1, prin diluări (1 + 1) folosind soluția (4.6). 7. Metoda de determinare 7.1 Inocularea mediului de cultură Se inoculează la 60ș C mediul de bază pentru determinarea (4.2) cu suspensia de spori (3.2). 7.2 Prepararea talerelor Difuzia în geloză este realizată în tăvi folosind 4 concentrații ale soluțiile standard (S3, S4, S2 și S1) și 4
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de cultură însămânțat cu Sarcina lutea. Difuzia este evidențiată de formarea zonelor de inhibiție în prezența microorganismului. Diametrul acestor zone este direct proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganisme: Sarcina lutea ATCC nr. 9341 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu Sarcina lutea într-un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1), se ajustează la pH 7,0. Se incubează peste noapte la aproximativ 35ș C. Se păstrează cultura în frigider și se re-inoculează cu geloză în
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
teste preliminare pe talere cu mediul de bază pentru determinare (4.1), se stabilesc cantitățile de inoculum care, pentru diferitele concentrații de tilozină folosite, dau cele mai întinse zone de inhibiție posibil care sunt încă clare. Mediul de cultură este inoculat la 48 - 50ș C. 4. Mediul de cultură și reactivii 4.1 Mediul de bază pentru determinare 1 Glucoză 1 g Peptonă triptică 10 g Extract de carne 1,5 g Extract de drojdie 3 g Geloză, în funcție de calitate de la
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
Pentru un conținut mai mic de 10 ppm, se evaporă extractul până la uscare într-un evaporator rotativ la 35ș C și se dizolvă reziduul în 40 % metanol (4.6). 7. Metoda de determinare 7.1 Inocularea mediului de cultură Se inoculează la 48 - 50ș C mediul de bază pentru determinarea (4.1), se ajustează la pH 8,0 cu suspensia bacteriană (3.2). 7.2 Prepararea tăvilor Difuzia în geloză este realizată în tăvi folosind 4 concentrații ale soluțiile standard (S3
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de geloză însămânțat cu Sarcina lutea. Difuzia este evidențiată prin formarea zonelor de inhibiție în prezența microorganismului. Diametrul acestor zone este direct proporțional cu logaritmul concentrației antibioticului. 3. Microorganisme: Sarcina lutea ATCC nr. 9341 3.1 Menținerea sușei parentale Se inoculează cu Sarcina lutea un tub de geloză luat din mediul de cultură (4.1). Se incubează peste noapte la aproximativ 35ș C. Se păstrează cultura în frigider și se re-inoculează geloza cu ea o dată la 14 zile. 3.2 Prepararea
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
teste preliminare asupra talerelor cu mediul de bază pentru determinarea (4.1), se stabilește cantitatea de inoculum care, pentru diferitele concentrații de virginiamicină folosite, dă cele mai întinse zone de inhibiție posibile care sunt încă clare. Mediul de cultură este inoculat la 48 - 50ș C. 4 Mediul de cultură și reactivii 4.1 Mediul de bază pentru determinare 1 Glucoză 1 g Peptonă triptică 10 g Extract de carne 1,5 g Extract de drojdie 3 g Geloză, în funcție de calitate de la
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
pentru a obține o concentrație presupusă de virginiamicină de 1 µg per ml (= U4). Apoi se prepară concentrațiile U4, U2 și U1 cum este indicat la pct. 6.1. 7 Metoda de determinare 7.1 Inocularea mediului de cultură Se inoculează la 48 - 50ș C mediul de bază pentru determinarea (4.1), la 48 - 50ș C cu suspensia bacteriană (3.2). 7.2 Prepararea tăvilor Difuzia în geloză este realizată în tăvi folosind 4 concentrații ale soluțiile standard (S3, S4, S2
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de microtitru, înainte ca celulele MDBK să fie adăugate. Celulele sunt folosite la o concentrație care formează o monocultura completă după 24 de ore. 1.3. Controale: a) infecțiozitatea virusului; ... b) toxicitatea serului; ... c) culturi celulare care nu au fost inoculate; ... d) antiseruri de referință. ... 1.4. Interpretare: rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului folosit la testare sunt înregistrate după 3-6 zile de incubare la temperatura de 37°C. Titrurile serului sunt considerate negative dacă nu există nici o neutralizare la
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
gheață uscată la temperatura de -69°C sau în azot lichid și păstrate în stare congelata până la examinare. Între două prelevări se spală și se clătește dispozitivul probang de 3 ori cu apă curată. ... c) Testarea virusului FMD: probele sunt inoculate în culturi de celule primare bovine tiroidiene, folosindu-se cel putin 3 tuburi la o prelevare. Pot fi folosite alte celule asemănătoare, precum celule primare de rinichi de bovine sau porcine, dar trebuie reținut că aceste celule sunt mai puțin
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
-se cel putin 3 tuburi la o prelevare. Pot fi folosite alte celule asemănătoare, precum celule primare de rinichi de bovine sau porcine, dar trebuie reținut că aceste celule sunt mai puțin sensibile la anumite tulpini de FMDV. Tuburile sunt inoculate la temperatura de 37°C într-un aparat de rulare și sunt examinate zilnic timp de 48 de ore pentru detectarea prezenței efectului citopatic (CPE). Dacă sunt negative, culturile sunt plasate în alte culturi și reexaminate timp de 48 de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
pestivirusuri". Izolarea virusului și identificarea în culturi celulare 1. Izolarea virusului din probe de țesut se face pe culturi celulare sensibile PK 15 sau pe alte linii celulare la fel de sensibile (susceptibile). Suspensia din organul provenit de la animalul suspect se va inocula la diluția de 1/10. 2. Izolarea virusului din probe de sânge, recoltat și manipulat după cum este indicat la titlul "Recoltarea materialelor pentru diagnostic", se realizează prin inocularea culturilor celulare cu o suspensie de globule albe, reconstituita până la volumul original
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
și negative. Sușele de virus de utilizat pentru testele serologice trebuie să fie agreate de laboratorul de referință comunitară pentru pesta porcină clasică. Testul de neutralizare a virusului 1. Acest test se bazează pe determinarea titrului neutralizant 50% final. Se inoculează culturile cu un amestec din serul diluat și o cantitate constantă de virus după o perioadă specifică de incubare la temperatura de 37°C. Rezultatele se bazează pe absența unei replicări virale detectabile printr-un sistem de anticorpi marcați. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
hemadsorbtie (HÂD) ... Testul de hemadsorbtie se efectuează prin inocularea suspensiei tisulare 10% sau a sângelui colectat pe teren de la porcii suspecți în culturi leucocitare primare de porc sau prin prepararea unor culturi leucocitare din sânge ce provine de la porci febrili, inoculate în laborator sau prelevate pe teren. Hemadsorbtia constă în aglutinarea unui mare număr de eritrocite de porc la suprafață celulelor infectate și confirmă diagnosticul de PPA. b) Inocularea porcilor ... Se obține un amestec format din picături din suspensii tisulare 10
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
prelevate pe teren. Hemadsorbtia constă în aglutinarea unui mare număr de eritrocite de porc la suprafață celulelor infectate și confirmă diagnosticul de PPA. b) Inocularea porcilor ... Se obține un amestec format din picături din suspensii tisulare 10%, din care se inoculează pe cale intramusculara câte 2 ml/porc, la 4 porci, dintre care 2 au fost vaccinați contra pestei porcine clasice și 2 nu au fost vaccinați. În fiecare zi se ia temperatura rectala a animalelor pentru a se constată creșterea acesteia
EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
raportare la o curbă-etalon stabilită în prealabil prin numărare pe mediu solid, folosindu-se specia Pseudomonas fluorescens ATCC 15453. Se adaugă volumul de soluție necesar pentru a aduce concentrația de bacterii la (5 ± 3) × 107 pe milimetru. Se folosește substanța inoculată în ora care urmează. 1.6.4. Test Incubarea se efectuează în absența oricărui tip de lumină intensă, într-un incubator menținut la o temperatură de 20 până la 25 șC și fără vapori toxici. Se pregătesc soluțiile următoare: 1. Soluție
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
baza studiilor menționate anterior, realizează studii suplimentare care pot include: - elaborarea de modele matematice predictive pentru produsele alimentare în cauză, utilizând factori critici de dezvoltare sau supraviețuire pentru microorganismele în cauză din produs; - teste care analizează capacitatea microorganismului în cauză, inoculat în mod adecvat, de a se dezvolta sau supraviețui în produs în diferite condiții de depozitare care pot fi prevăzute în mod rezonabil; - studii de evaluare a dezvoltării și supraviețuirii microorganismelor în cauză care pot fi prezente în produs în
32005R2073-ro () [Corola-website/Law/294453_a_295782]