552 matches
-
de lucru Tehnica pentru evidențierea activității amilazei salivare la temperatura de 370C se bazează pe procedeul menționat anterior. Pentru evidențierea efectului temperaturii de 600C asupra activității enzimatice se procedează identic, dar în condiții de inactivare termică a enzimei.Soluția de amilază salivară conținută într-o eprubetă se menține câteva minute pe o baie de apă la temperatura de 600C înainte de a fi pusă în contact cu substratul de reacție, și anume, cu soluția de amidon. Se efectuează reacția cu iodul și
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pe o baie de apă la temperatura de 600C înainte de a fi pusă în contact cu substratul de reacție, și anume, cu soluția de amidon. Se efectuează reacția cu iodul și reacția Fehling. Rezultate și interpretare La temperatură ridicată (600C), amilaza suferă un proces de denaturare termică însoțit de inactivarea sa. Ca urmare, enzima pierde proprietatea catalitică de a hidroliza amidonul. Amidonul rămas nehidrolizat reacționează cu iodul, obținîndu-se culoarea albastră caracteristică. Reacția Fehling este de asemenea, negativă, deoarece amilaza fiind denaturată
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
ridicată (600C), amilaza suferă un proces de denaturare termică însoțit de inactivarea sa. Ca urmare, enzima pierde proprietatea catalitică de a hidroliza amidonul. Amidonul rămas nehidrolizat reacționează cu iodul, obținîndu-se culoarea albastră caracteristică. Reacția Fehling este de asemenea, negativă, deoarece amilaza fiind denaturată termic nu produce hidroliza amidonului cu formare de maltoză care să reducă reactivul Fehling. In consecință, nu se constată apariția precipitatului roșu-cărămiziu de Cu2O. 6.8.2.2. Influența pH-ului Enzimele își manifestă activitatea lor catalitică într-
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
enzimatici. Modificări mai mult sau mai puțin accentuate în raport cu valoarea pH-ului optim determină, de regulă, o diminuare sau chiar o inhibare a activității enzimatice. Principiul metodei Se determină la temperatura optimă (370C) și la valori diferite de pH activitatea amilazei salivare, prin măsurarea timpului în care substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
amilazei salivare, prin măsurarea timpului în care substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat). * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilază salivară (diluată 1/10). * Soluție de KH2PO4 6,6 · 10-2 m (9,080 g/l). * Soluție de 6,6 · 10-2 m (9,4790 g/l
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat). * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilază salivară (diluată 1/10). * Soluție de KH2PO4 6,6 · 10-2 m (9,080 g/l). * Soluție de 6,6 · 10-2 m (9,4790 g/l). Din ultimele două soluții se prepară: * Soluție tampon fosfați de pH=5,2 (98,0
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pH=8,2 Amidon Tampon fosfați pH=5,2 Tampon fosfați pH=6,8 Tampon fosfați pH=8,2 5,0 2,0 5,0 2,0 5,0 2,0 Se incubează 5 minute la 370C Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0,5 0,5 Eprubetele conținând probele respective se mențin pe baie de apă la 370C. La intervale de timp diferite (3, 5, 7, 15, 20 de minute) se colectează probe de câte 1 cm3. Se adaugă
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
la pH=6,8, punctul acromic atingându-se în aproximativ 10 minute. La valorile de pH 5,2 și 8,2 viteza de reacție este redusă, punctul acromic atingându-se în aproximativ 20 de minute. In concluzie, activitatea optimă a amilazei salivare este la pH = 6,8. 6.8.2.3. Influența efectorilor enzimatici Efectorii enzimatici sunt substanțe de natură chimică diferită care modifică activitatea enzimatică, respectiv viteza reacțiilor enzimatice. In funcție de acțiunea pe care o exercită asupra enzimelor, efectorii pot
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
este influențată de prezența anumitor ioni în mediul de reacție. Astfel, α-amilaza este activată de anionul Clși este inhibată de prezența unor cationi ca Ag+, Pb2+, Cu2+. 6.8.2.3.1. Influența activatorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în absența ionului de Cl-. Activitatea enzimei este invers proporțională cu timpul în care se atinge nivelul acromic. Reactivi: * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de NaCl 1 %. * Soluție
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
ionului de Cl-. Activitatea enzimei este invers proporțională cu timpul în care se atinge nivelul acromic. Reactivi: * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de NaCl 1 %. * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează următoarea schemă experimentală: Soluții Probă (cm3) Martor (cm3) Amidon Tampon fosfați pH=6,8 NaCl Apă distilată Se incubează 5 minute la 370C. Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează următoarea schemă experimentală: Soluții Probă (cm3) Martor (cm3) Amidon Tampon fosfați pH=6,8 NaCl Apă distilată Se incubează 5 minute la 370C. Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0,5 Eprubetele se mențin pe baie de apă la 370C. Se efectuează reacția cu iodul după procedeul descris anterior. Interpretarea rezultatelor In proba care conține ioni de clor (NaCl) se constată că hidroliza enzimatică a amidonului
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
0,5 Eprubetele se mențin pe baie de apă la 370C. Se efectuează reacția cu iodul după procedeul descris anterior. Interpretarea rezultatelor In proba care conține ioni de clor (NaCl) se constată că hidroliza enzimatică a amidonului decurge rapid, α amilaza manifestând o activitate maximă în prezența acestor ioni (Cl-). In concluzie, ionii de clor se comportă ca activatori ai amilazei salivare. 6.8.2.3.2. Influența inhibitorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
Interpretarea rezultatelor In proba care conține ioni de clor (NaCl) se constată că hidroliza enzimatică a amidonului decurge rapid, α amilaza manifestând o activitate maximă în prezența acestor ioni (Cl-). In concluzie, ionii de clor se comportă ca activatori ai amilazei salivare. 6.8.2.3.2. Influența inhibitorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în absența cationului Pb2+; se măsoară timpul necesar atingerii punctului acromic. Reactivi * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
a amidonului decurge rapid, α amilaza manifestând o activitate maximă în prezența acestor ioni (Cl-). In concluzie, ionii de clor se comportă ca activatori ai amilazei salivare. 6.8.2.3.2. Influența inhibitorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în absența cationului Pb2+; se măsoară timpul necesar atingerii punctului acromic. Reactivi * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de Pb(NO3)2 1 · 10-3 m * Soluție de iod în
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
și în absența cationului Pb2+; se măsoară timpul necesar atingerii punctului acromic. Reactivi * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de Pb(NO3)2 1 · 10-3 m * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează aceeși schemă experimentală ca în cazul determinării influenței activatorilor enzimatici, cu deosebire că volumul din soluția de clorură de sodiu se substituie cu același volum dintr-o soluție de azotat de
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
volum dintr-o soluție de azotat de plumb. Interpretarea rezultatelor In proba care conține ionii Pb2+ se constată că viteza de hidroliză enzimatică a amidonului este mult diminuată în comparație cu proba martor. In concluzie, ionii Pb2+ se comportă ca inhibitori ai amilazei salivare, determinând scăderea activității enzimatice (sau chiar inhibarea totală a acesteia la concentrații mai mari de Pb2+). 6.9. TESTE DE AUTOEVALUARE 1. Enzimele sunt: a). lipide; b). glucide; c). protide; d). polinucleotide. 3. Viteza de reacție este: a). proporțională
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
biochimice pot indica diferite localizări ale infecției în organism sau decompensări ale unor afecțiuni preexistente. În plus, aprecierea eficienței tratamentelor aplicate, a evoluției și prognosticului bolii, necesită monitorizarea parametrilor biochimici: glicemie, uree, creatinină, bilirubină, fosfataza alcalină, enzime (ALAT, ASAT, LDH, amilaze, rezerva alcalină), ionograma, gazele sanguine, etc. Examene specifice Examenele specifice evidențiază agentul etiologic al unei infecții. Metodele și tehnicile microbiologice utilizate sunt clasificate în două categorii, după cum permit diagnosticul direct sau indirect al agentului infecțios: Metodele de diagnostic direct evidențiază
BOLI INFECŢIOASE by Manuela Arbune () [Corola-publishinghouse/Science/491_a_931]
-
urlian se manifestă prin turgescența orificiului canalului Stenon, uscăciunea mucoasei orale prin scăderea secreției salivare și eritemul faringian. Alte localizări glandulare extrasalivare ale infecției urliene sunt: Pancreatita, manifestă clinic (dureri abdominale “în bară”, vărsături, diaree) sau subclinică, exprimată prin creșterea amilazelor și a glicemiei Orhita urliană, manifestată la sexul masculin după pubertate, prin tumefierea testiculară dureroasă, uni sau bilaterală Ovarita, mastita, tiroidita, dacrioadenita, rar întâlnite. Afectarea succesivă a mai multor sedii anatomice în cadrul infecției urliene este de regulă anunțată de creșterile
BOLI INFECŢIOASE by Manuela Arbune () [Corola-publishinghouse/Science/491_a_931]
-
asimilarea unui gram de zaharoză de către organism produce 4 calorii. Maltoza și celobioza alături de lactoză (zahărul din lapte) fac parte din clasa dizaharidelor reducătoare. Maltoza (zahărul din malț) se formează din amidon îmbibat cu apă călduță sub acțiunea enzimei β amilază, care se găsește în bobul de orz încolțit (malț). β amilaza nu se izolează, ci se introduc boabe de orz încolțite și sfărâmate în suspensia de amidon în apă. După scurtă vreme amidonul se dizolvă și apare gustul dulce al
Chimie organică : suport pentru pregătirea examenelor de definitivat, gradul II, titularizare, suplinire by Elena Iuliana Mandiuc, Maricica Aştefănoaiei, Vasile Sorohan () [Corola-publishinghouse/Science/723_a_1371]
-
și celobioza alături de lactoză (zahărul din lapte) fac parte din clasa dizaharidelor reducătoare. Maltoza (zahărul din malț) se formează din amidon îmbibat cu apă călduță sub acțiunea enzimei β amilază, care se găsește în bobul de orz încolțit (malț). β amilaza nu se izolează, ci se introduc boabe de orz încolțite și sfărâmate în suspensia de amidon în apă. După scurtă vreme amidonul se dizolvă și apare gustul dulce al maltozei. Soluția astfel obținută se folosește la fabricarea berei și a
Chimie organică : suport pentru pregătirea examenelor de definitivat, gradul II, titularizare, suplinire by Elena Iuliana Mandiuc, Maricica Aştefănoaiei, Vasile Sorohan () [Corola-publishinghouse/Science/723_a_1371]
-
încolțite și sfărâmate în suspensia de amidon în apă. După scurtă vreme amidonul se dizolvă și apare gustul dulce al maltozei. Soluția astfel obținută se folosește la fabricarea berei și a alcoolului industrial prin fermentație: 2(C6H10O5)n + nH2O nC12H22O11 amilaza maltoza Materia primă propriu-zisă a fermentației alcoolice nu este maltoza ci glucoza, de aceea maltoza trebuie hidrolizată la glucoză. Hidroliza maltozei se face cu drojdie de bere ce conține enzima maltaza care activează această transformare și enzima Sacharomyces Cerevisiae ce
Chimie organică : suport pentru pregătirea examenelor de definitivat, gradul II, titularizare, suplinire by Elena Iuliana Mandiuc, Maricica Aştefănoaiei, Vasile Sorohan () [Corola-publishinghouse/Science/723_a_1371]
-
amidonul sub formă greu solubilă. Soluțiile de amidon sunt puternic dextrogire. Hidroliza amidonului se poate face diferit. Prin hidroliză acidă (tratare cu acizi), amidonul formează D glucoza, prin hidroliză enzimatică, formează maltoză sau dextrine. Enzimele care hidrolizează amidonul se numesc amilaze(αamilaza transformă amidonul în dextrine, βamilaza transformă amidonul în maltoză). Amidonul este un amestec de două polizaharide: amiloza(10-20%), care se găsește în interiorul granulei de amidon, și amilopectina(80-90%) care se găsește în învelișul granulei. Amiloza este partea solubilă din
Chimie organică : suport pentru pregătirea examenelor de definitivat, gradul II, titularizare, suplinire by Elena Iuliana Mandiuc, Maricica Aştefănoaiei, Vasile Sorohan () [Corola-publishinghouse/Science/723_a_1371]
-
netedă, antimitocondriali, specifici țesutului hepatic: LKM1, LSP, SLA etc) - dozarea feritinei (hemocromatoză), ceruloplasmina (boala Wilson), α1 antitripsina etc - alfafetoproteina - marker de diagnostic a carcinomului hepatocelular. Explorarea funcțională pancreatică cuprinde determinarea enzimelor pancreatice. În pancreatita acută se determină în mod curent amilaza serică (valoare superioară o are creșterea persistentă a amilazei urinare). Creșterea lipazei serice este un test specific, precoce pentru diagnostic. Afecțiunile pancreatice acute și cronice se pot însoți de creșterea moderată a glicemiei și scăderea calcemiei în formele severe. Explorarea
Noţiuni elementare de medicină internă by Viviana Aursulesei () [Corola-publishinghouse/Science/91886_a_92994]
-
dozarea feritinei (hemocromatoză), ceruloplasmina (boala Wilson), α1 antitripsina etc - alfafetoproteina - marker de diagnostic a carcinomului hepatocelular. Explorarea funcțională pancreatică cuprinde determinarea enzimelor pancreatice. În pancreatita acută se determină în mod curent amilaza serică (valoare superioară o are creșterea persistentă a amilazei urinare). Creșterea lipazei serice este un test specific, precoce pentru diagnostic. Afecțiunile pancreatice acute și cronice se pot însoți de creșterea moderată a glicemiei și scăderea calcemiei în formele severe. Explorarea funcțională eso-gastrică cuprinde teste specifice, utilizate țintit: - manometria esofagiană
Noţiuni elementare de medicină internă by Viviana Aursulesei () [Corola-publishinghouse/Science/91886_a_92994]
-
utilizează rar în suspiciunea asocierii LB de cale biliară principală sau în LB cu calculi de mici dimensiuni (Fig. 19B, C). 3. Examenele de laborator sunt normale în LB necomplicată. În colica biliară poate apărea o creștere tranzitorie a transaminazelor, amilazelor (reacție pancreatică), alterarea testelor de colestază. Obstrucția coledociană se însoțește constant de colestază. Complicațiile infecțioase se însoțesc de sindrom biologic de inflamație. Diagnostic diferențial Se impune dacă sunt prezente: 1. colica biliară - se face cu criza ulceroasă, pancreatita acută, colica
Noţiuni elementare de medicină internă by Viviana Aursulesei () [Corola-publishinghouse/Science/91886_a_92994]