5,404 matches
-
Nacional de Investiçăo Veterinária, Lisabona; l) Grecia: Kέντςo Kτηvίατίxών lδςνμύτων Aθηνών, Nεωτόλεως 25. 15310 Aθήνα; m) Austria: Bundesanstalt für Tierseuchenbekämpfung, Mödling; n) Finlanda: Eläinlääkintä- ja elintarvikelaitos, Helsinki/anstalten för veterinärmedicin och livsmedel, Helsingfors; o) Suedia: Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala. 3. Antigenii etalon utilizați în laborator trebuie să fie prezenți cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala. 3. Antigenii etalon utilizați în laborator trebuie să fie prezenți cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser de control pozitiv cunoscut; d) geloză; 0,8% agar, 8,5% NaCl, tampon Tris
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser de control pozitiv cunoscut; d) geloză; 0,8% agar, 8,5% NaCl, tampon Tris 0
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
constă într-o cavitate centrală în jurul căreia se ordonează 6 cavități periferice dispuse în cerc. Diametrul cavității centrale: 4 milimetri Diametrul cavităților periferice: 6 milimetri Distanța între cavitatea centrală și cele periferice: 3 milimetri. 6. Cavitatea centrală se umple cu antigenul etalon. Cavitățile periferice 1 și 4 (vezi schema de mai jos) sunt umplute cu serul pozitiv cunoscut, cavitățile 2, 3, 5 și 6 cu serurile care trebuie testate. Cavitățile trebuie umplute până la dispariția meniscului. 7. Cantitățile obținute sunt următoarele: antigen
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
antigenul etalon. Cavitățile periferice 1 și 4 (vezi schema de mai jos) sunt umplute cu serul pozitiv cunoscut, cavitățile 2, 3, 5 și 6 cu serurile care trebuie testate. Cavitățile trebuie umplute până la dispariția meniscului. 7. Cantitățile obținute sunt următoarele: antigen: 32 microlitri, ser de control: 73 microlitri, ser care trebuie testat: 73 microlitri. 8. Incubarea trebuie să dureze 72 de ore la temperatura ambiantă (20-27oC) într-o incintă umedă închisă. 9. Proba se citește după douăzeci și patru de ore, apoi după
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
douăzeci și patru de ore, apoi după patruzeci și opt de ore, dar nu se poate obține nici un rezultat final înainte de șaptezeci și două de ore: a) un ser care trebuie testat este pozitiv dacă formează o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă această curbă coincide cu cea a serului de control; b) un ser care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
dacă formează o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă această curbă coincide cu cea a serului de control; b) un ser care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba serului de control; c) reacția nu este concludentă dacă: i) înclină curba serului de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba serului de control; c) reacția nu este concludentă dacă: i) înclină curba serului de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau ii) dacă nu este posibilă interpretarea pozitivă sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba serului de control; c) reacția nu este concludentă dacă: i) înclină curba serului de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau ii) dacă nu este posibilă interpretarea pozitivă sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi utilizate orice altă configurație sau orice altă dispunere a cavităților, cu condiția ca
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
ser concentrat. 10. Pot fi utilizate orice altă configurație sau orice altă dispunere a cavităților, cu condiția ca serul E4 diluat la 1/10 cu un ser negativ să poată fi identificat ca fiind pozitiv. B. Metodă de standardizare a antigenului Soluții și materiale necesare 1. 40 mililitri de geloză 1,6% într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 2. 15 mililitri ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
1/15 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 4. patru cutii Petri din material plastic, cu un diametru de 85 milimetri; 5. un poanson cu diametrul de 4-6 milimetri; 6. un antigen de referință; 7. antigenul care trebuie standardizat; 8. o baie de apă caldă (56oC). Mod de lucru Se dizolvă geloza (1,6%) în soluția tampon Tris/HCl încălzind cu grijă până la 100oC. Se utilizează baia de apă la 56oC timp
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 4. patru cutii Petri din material plastic, cu un diametru de 85 milimetri; 5. un poanson cu diametrul de 4-6 milimetri; 6. un antigen de referință; 7. antigenul care trebuie standardizat; 8. o baie de apă caldă (56oC). Mod de lucru Se dizolvă geloza (1,6%) în soluția tampon Tris/HCl încălzind cu grijă până la 100oC. Se utilizează baia de apă la 56oC timp de aproximativ o oră
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
agită rapid și se varsă în două cutii Petri, câte 15 mililitri pe cutie. Se reîncep operațiunile descrise anterior cu serul leucozei bovine diluat la 1/5. Când geloza s-a întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
15 mililitri pe cutie. Se reîncep operațiunile descrise anterior cu serul leucozei bovine diluat la 1/5. Când geloza s-a întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
operațiunile descrise anterior cu serul leucozei bovine diluat la 1/5. Când geloza s-a întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
5. Când geloza s-a întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D = antigen care trebuie testat diluat la 1/8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la 1/2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D = antigen care trebuie testat diluat la 1/8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat cu două grade de diluție a serului
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
2, cavitatea C+E = antigene de referință, cavitatea D = antigen care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D = antigen care trebuie testat diluat la 1/8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat cu două grade de diluție a serului (1:5 și 1:10) pentru a obține precipitarea optimă
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
care trebuie testat, nediluat. ii) Cutiile Petri nr. 2 și 4: cavitatea A = antigen care trebuie testat, nediluat, cavitatea B = antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D = antigen care trebuie testat diluat la 1/8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat cu două grade de diluție a serului (1:5 și 1:10) pentru a obține precipitarea optimă. 2. Dacă diametrul de precipitare este prea mic pentru fiecare
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Concentrația finală a gelozei trebuie să fie de 0,8%, iar cea a serului de 5%, respectiv 10%. 5. Se notează diametrele măsurate în sistemul de coordonate următor. Diluția de lucru este cea în care se înregistrează același diametru pentru antigenul care trebuie testat și pentru antigenul de referință. C. Teste de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Se utilizează următoarele materiale și reactivi: a) microplăci pentru faza solidă, tăvițe sau orice altă fază solidă
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
fie de 0,8%, iar cea a serului de 5%, respectiv 10%. 5. Se notează diametrele măsurate în sistemul de coordonate următor. Diluția de lucru este cea în care se înregistrează același diametru pentru antigenul care trebuie testat și pentru antigenul de referință. C. Teste de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Se utilizează următoarele materiale și reactivi: a) microplăci pentru faza solidă, tăvițe sau orice altă fază solidă; b) antigenul se fixează pe placa
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
trebuie testat și pentru antigenul de referință. C. Teste de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Se utilizează următoarele materiale și reactivi: a) microplăci pentru faza solidă, tăvițe sau orice altă fază solidă; b) antigenul se fixează pe placa solidă cu sau fără ajutorul anticorpilor de captaj policloni sau monocloni. În cazul LBE, dacă antigenul este asociat direct fazei solide, toate eșantioanele supuse examenului și prezentând o reacție pozitivă trebuie examinate în raport cu antigenul de control
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]