392 matches
-
înregistrare: 1-2 mV din limita scării, - viteza hârtiei: 30-60 cm/h, - cantitatea de substanță injectată: 0,5-1 μl de soluție de TMSE. Aceste condiții pot fi modificate în funcție de caracteristicile coloanei și ale cromatografului în fază gazoasă pentru a se obține cromatograme care îndeplinesc condițiile următoare: - timpul de retenție a β-sitosterolului trebuie să fie de 20 ± 5 minute, - valoarea de vârf pentru campesterol trebuie să fie: pentru uleiul de măsline (conținut mediu 3 %) 15 ± 5 % din limita scării, iar pentru uleiul de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
stigmasterol, Δ 7-campesterol, Δ 5,23 stigmastadienol, clerosterol, β-sitosterol, sitostanol, Δ 5-avenasterol, 5,24 stigmastadienol, Δ 7-stigmastenol, Δ 7-avenasterol. În tabelul 1 sunt prezentați timpii de retenție pentru sitosterol, pentru coloanele SE 52 și SE 54. Figurile 1și 2 ilustrează cromatogramele tipice ale unor uleiuri. 5.4.5. Evaluarea cantitativă 5.4.5.1. Se trece, cu ajutorul integratorului, la calculul ariei valorilor de vârf ale α-colestanol și ale sterolilor. Nu se iau în considerare valorile de vârf eventuale de componentelor care
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
în acid linoleic) în uleiurile vegetale la care principalul acid gras nesaturat este acidul oleic (ulei de măsline). 3. PRINCIPIU Separarea trigliceridelor după numărul lor de carbon echivalent, prin cromatografie în fază lichidă de înaltă performanță (faza inversă) și interpretarea cromatogramelor. 4. APARATURĂ 4.1. Aparat de cromatografie în fază lichidă de înaltă performanță care permite un control termostatic al temperaturii coloanei. 4.2. Seringă pentru injecții de 10 μl. 4.3. Detector: refractometru diferențial capabil să determine indicele de refracție
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
5.5. Solvent de solubilizare: acetonă sau amestec (1:1) de acetonă și cloroform. 5.6. Trigliceride de referință: trigliceride comerciale, precum tripalmitina, trioleina etc. (timpii de retenție trebuie să fie reluați în grafic după numărul de carboni echivalent), sau cromatograma de referință obținută datorită uleiului de soia (vezi notele 3 și 4 și schemele 1 și 2). 6. PREPARAREA PROBELOR Se prepară o soluție la 5 % din probele de analizat prin cântărirea a 0,5 ± 0,0001 g de probă
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
acizilor grași ai trigliceridelor de referință (vezi schema 2). Nota 4: Eficacitatea coloanei trebuie să permită separarea netă a valorii de vârf de la 1.1.1. (trilinoleici) de cea a trigliceridelor care au un timp de retenție apropiat. Schema 1 Cromatograma unei probe de ulei de soia Notă: P: acid palmitic; St: acid stearic; O: acid oleic; I: acid linoleic; Ln: acid linolenic. Schema 2 Evoluția logaritmului α în funcție de f (numărul legăturilor duble) Notă: La: acid lauric; My: acid miristic; P
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
această valoare de vârf să corespundă la aproximativ trei sferturi din scara totală. Se calculează numărul de platouri teoretice n cu ajutorul formulei și rezoluția R, cu formula în care: dr(1): distanța de retenție, în mm, măsurată pornind de la începutul cromatogramei până la valoarea de vârf maximă a stearatului de metil; W(1) și W(2): lățimile, în mm, ale valorilor de vârf ale stearatului și ale oleatului de metil, măsurate între punctele de intersecție cu linia de bază a tangentelor cu
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
și ale oleatului de metil, măsurate între punctele de intersecție cu linia de bază a tangentelor cu punctele de inflexiune ale curbei; distanța, în milimetri, între maximele relative ale valorilor de vârf ale stearatului și oleatului de metil. Figura 1 Cromatogramă pentru determinarea numărului de platouri teoretice (eficacitate) și a rezoluției. Condițiile de operare sunt cele care furnizează un număr de platouri teoretice pentru stearatul de metil, cel puțin egal cu 2 000 pe metru de coloană, și o rezoluție de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
a celor două faze fixe de polarități diferite pentru a se verifica absența valorilor de vârf mascate, de exemplu în cazul prezenței simultane a C18:3 și C20:0 sau a C18:3 și C18:2 conjugate. 4.4. Pregătirea cromatogramei de referință și a curbelor de referință Se analizează amestecul etalon (vezi pct. 2.3), în condiții de operare identice cu cele ale testului, și se determină timpii de retenție sau distanțele de retenție pentru acizii grași constitutivi. Se trasează
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
prin raportarea la curbele preparate la pct. 4.4 prin interpolare. 5.2. Analiza cantitativă 5.2.1. Determinarea compoziției Se utilizează metoda de standardizare internă (în afara excepțiilor), adică se admite că totalitatea constituenților prezenți în probă este reprezentată pe cromatogramă, prin urmare că suma ariilor valorilor de vârf reprezintă 100 % din constituenți (eluare totală). Dacă aparatura cuprinde un integrator, se utilizează cifrele furnizate de acesta. În caz contrar, se determină aria fiecărei valori de vârf prin multiplicarea înălțimii vârfului cu
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
cel mai înalt grad de precizie este solicitat în mod special, trebuie să se intervină cu factori de corecție pentru a converti procentajele ariilor valorilor de vârf în procentaje în masă ale constituenților. Se determină factorii de corecție cu ajutorul unei cromatograme obținute pornind de la un amestec etalon de esteri metilici cu o compoziție cunoscută exact în condiții identice cu cele ale testului. Pentru acest amestec etalon, procentajul în masă al compusului i este dat de formula: în care: mi: masa compusului
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
în condiții identice cu cele ale testului. Pentru acest amestec etalon, procentajul în masă al compusului i este dat de formula: în care: mi: masa compusului i în amestecul etalon. Σm: suma maselor diverșilor constituenți ai amestecului etalon. Pornind de la cromatograma amestecului etalon (4.4), se calculează procentajul (arie/arie) al compusului i astfel: în care: Ai: aria valorii de vârf corespunzătoare compusului i; ΣA: suma ariilor totalității valorilor de vârf. De unde, factorul de corecție: În mod obișnuit, factorii de corecție
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
analit prin CG sau CL cu detectare nespecifică 2.3.2.1. Analitul trebuie să fie supus eluției în timpii de retenție caracteristici analitului etalon corespunzător, în condiții experimentale identice. 2.3.2.2. Vârful maxim cel mai apropiat din cromatogramă trebuie să fie separat de vârful analitului printr-o valoare a distanței cel puțin egală cu lățimea totală la 10% din înălțimea maximă. 2.3.2.3. În vederea obținerii de informații suplimentare se poate utiliza co-cromatografia și se poate recurge
jrc2105as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87257_a_88044]
-
de 10% din lățimea originală. 7.1.2. Detectorul cu sistem de diode Evaluarea rezultatelor se face conform următoarelor criterii: (a) lungimea de undă a absorbției maxime a eșantionului și a spectrului standard, înregistrată la apexul punctului de maxim pe cromatogramă, trebuie să fie aceeași în limita unei marje determinate de puterea de rotire a sistemului de detectare. Pentru detectarea cu sistem de diode, aceasta este de obicei de 2 nm; (b) între 225 și 300 nm, eșantionul și spectrul standard
jrc2205as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87358_a_88145]
-
marje determinate de puterea de rotire a sistemului de detectare. Pentru detectarea cu sistem de diode, aceasta este de obicei de 2 nm; (b) între 225 și 300 nm, eșantionul și spectrul standard înregistrate la apexul punctului de maxim pe cromatogramă, nu trebuie să fie diferite pentru acele părți ale spectrului aflate în intervalul de 10 până la 100% de absorbție relativă. Acest criteriu este îndeplinit atunci când sunt prezente aceleași puncte maxime și când în nici un punct observat deviația dintre cele două
jrc2205as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87358_a_88145]
-
1,5 ml/min și temperatura coloanei la 35°. 6.2.3. Se fixează lungimea de undă a detectorului la 264 nm. 6.2.4. Se injectează 10 μl din fiecare dintre soluțiile de referință (4.10) și se înregistrează cromatogramele acestora. 6.2.5. Se injectează 10 μl din soluția de probă (6.1) și se înregistrează cromatograma acesteia. 6.3. Se determină dacă hexamidina, dobromohexamidina, dibromopropamidina sau clorhexidina sunt prezente, prin compararea timpului (timpilor) de retenție al vârfului (ai
jrc2208as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87361_a_88148]
-
detectorului la 264 nm. 6.2.4. Se injectează 10 μl din fiecare dintre soluțiile de referință (4.10) și se înregistrează cromatogramele acestora. 6.2.5. Se injectează 10 μl din soluția de probă (6.1) și se înregistrează cromatograma acesteia. 6.3. Se determină dacă hexamidina, dobromohexamidina, dibromopropamidina sau clorhexidina sunt prezente, prin compararea timpului (timpilor) de retenție al vârfului (ai vârfurilor) înregistrat(e) în (6.2.5) cu cele obținute pentru soluțiile de referință în 6.2.4
jrc2208as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87361_a_88148]
-
de degradare abiotica în condiții sterile; - o evaluare a cineticii de transformare a substanței de testat și, daca este cazul, a principalilor produși de transformare; - căile de transformare propuse, daca este cazul; - discutarea și interpretarea rezultatelor; - date brute (de exemplu cromatogramele probelor, calculele privind viteza de transformare a probelor și mijloacele utilizate pentru identificarea produșilor de transformare). 4. REFERINȚE BIBLIOGRAFICE: (1) UȘ- Environmental Protection Agency (1982). Pesticide Assessment Guidelines, Subdivision N. Chemistry: Environmental Fâțe. (2) Agriculture Canada (1987). Environmental Chemistry and
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
Se injectează porțiuni de 10 μl din fiecare soluție standard de conservant (2.17) în cromatograful de lichid (3.2). Pentru fiecare soluție se determină raportul dintre înălțimea vârfului corespunzător conservantului analizat și înălțimea vârfului corespunzător standardului intern, obținute din cromatograme. Se trasează un grafic pentru fiecare conservant, punând în relație raportul înălțimii vârfului cu concentrația fiecărei soluții standard. În procedura de etalonare se asigură pentru soluțiile standard obținerea un răspuns liniar. 4.2.2. Determinare Se injectează 10 μl de
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
fiecărei soluții standard. În procedura de etalonare se asigură pentru soluțiile standard obținerea un răspuns liniar. 4.2.2. Determinare Se injectează 10 μl de extract de probă (4.1.1) în cromatograful de lichid (3.2) și se înregistrează cromatograma. Se injectează 10 μl soluție de conservant standard (2.17) și se înregistrează cromatograma. Se compară cromatogramele obținute. Dacă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) nu apare prezent nici un vârf având aproximativ același timp de retenție ca cel
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
răspuns liniar. 4.2.2. Determinare Se injectează 10 μl de extract de probă (4.1.1) în cromatograful de lichid (3.2) și se înregistrează cromatograma. Se injectează 10 μl soluție de conservant standard (2.17) și se înregistrează cromatograma. Se compară cromatogramele obținute. Dacă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) nu apare prezent nici un vârf având aproximativ același timp de retenție ca cel corespunzător acidului 2-metoxibenzoic (standardul intern recomandat), se injectează 10 μl de extract de probă
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
2.2. Determinare Se injectează 10 μl de extract de probă (4.1.1) în cromatograful de lichid (3.2) și se înregistrează cromatograma. Se injectează 10 μl soluție de conservant standard (2.17) și se înregistrează cromatograma. Se compară cromatogramele obținute. Dacă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) nu apare prezent nici un vârf având aproximativ același timp de retenție ca cel corespunzător acidului 2-metoxibenzoic (standardul intern recomandat), se injectează 10 μl de extract de probă cu adaos de
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
injectează 10 μl de extract de probă (4.1.1) în cromatograful de lichid (3.2) și se înregistrează cromatograma. Se injectează 10 μl soluție de conservant standard (2.17) și se înregistrează cromatograma. Se compară cromatogramele obținute. Dacă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) nu apare prezent nici un vârf având aproximativ același timp de retenție ca cel corespunzător acidului 2-metoxibenzoic (standardul intern recomandat), se injectează 10 μl de extract de probă cu adaos de standard intern (4.1
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
prezent nici un vârf având aproximativ același timp de retenție ca cel corespunzător acidului 2-metoxibenzoic (standardul intern recomandat), se injectează 10 μl de extract de probă cu adaos de standard intern (4.1.2) în cromatograful de lichid și se înregistrează cromatograma. Dacă se observă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) un vârf ce interferează având același timp de retenție ca cel al acidul 2-metoxibenzoic, trebuie selectat un alt standard intern adecvat. (Dacă unul dintre conservanții investigați este absent din
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
același timp de retenție ca cel corespunzător acidului 2-metoxibenzoic (standardul intern recomandat), se injectează 10 μl de extract de probă cu adaos de standard intern (4.1.2) în cromatograful de lichid și se înregistrează cromatograma. Dacă se observă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) un vârf ce interferează având același timp de retenție ca cel al acidul 2-metoxibenzoic, trebuie selectat un alt standard intern adecvat. (Dacă unul dintre conservanții investigați este absent din cromatogramă, acest conservant poate fi
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]
-
Dacă se observă în cromatograma extractului de probă (4.1.1) un vârf ce interferează având același timp de retenție ca cel al acidul 2-metoxibenzoic, trebuie selectat un alt standard intern adecvat. (Dacă unul dintre conservanții investigați este absent din cromatogramă, acest conservant poate fi folosit drept standard intern). Se asigură îndeplinirea următoarelor condiții de către cromatogramele obținute pentru o soluție standard și soluția de probă: - separarea vârfurilor celei mai prost separate perechi trebuie să fie de cel puțin 0,90 (pentru
jrc2737as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87892_a_88679]