942 matches
-
492 nm. 1.2. Exprimarea rezultatelor 1.2.1. Utilizându-se un computer, se determină valorile densității optice (DO) și procentul de inhibiție (PI) pentru serul de testat și cel de control pe baza valorii medii înregistrate în cele 4 godeuri de control cu ser de cobai. Datele exprimate ca valori DO și PI sunt utilizate pentru a se determina dacă testul s-a efectuat în limite acceptabile. Limitele superioare de control (LSC) și limitele inferioare de control (LIC) pentru serul
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
Orice placă ce nu se conformează criteriilor de mai sus trebuie respinsă. Totuși, dacă titrul serului pozitiv de control este mai mare de 1/480, iar probele de testat sunt tot negative, atunci probele de testat negative pot fi acceptate. Godeurile duplicat cu seruri negative de control și godeurile duplicat goale trebuie să înregistreze valori ale PI între +25% și -25% și, respectiv, între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu face placa să fie nevalidă, dar sugerează că se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
mai sus trebuie respinsă. Totuși, dacă titrul serului pozitiv de control este mai mare de 1/480, iar probele de testat sunt tot negative, atunci probele de testat negative pot fi acceptate. Godeurile duplicat cu seruri negative de control și godeurile duplicat goale trebuie să înregistreze valori ale PI între +25% și -25% și, respectiv, între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu face placa să fie nevalidă, dar sugerează că se dezvoltă culoarea de fond. --------- Pct. 1.2.1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
50 %). Probele care înregistrează valori ale PI mai mari de 50 % sunt înregistrate drept pozitive. Probele care înregistrează valori ale PI mai mici de 50 % sunt înregistrate ca negative. Probele care înregistrează valori ale PI peste și sub pragul pentru godeurile duplicat sunt considerate a fi neconcludente. Astfel de probe pot fi retestate prin testul punctual sau prin titrare. Probele pozitive pot de asemenea să fie titrate pentru a furniza o indicare a gradului de pozitivare. Gol Gol Testul descris mai
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
de spălare). Plăcile se tamponează ușor cu material absorbant pentru a îndepărta reziduurile de la spălare. 2.1.1.3. Plăcile se blochează cu soluție salină fosfată tamponată (SSFT) + 5 % (w/v) lapte smântânit (lapte praf smântânit Nestle^TM), 200 f2æl/godeu, timp de o oră, la 37°C. 2.1.1.4. Se îndepărtează soluția de blocare și se tamponează ușor plăcile cu un material absorbant. 2.1.2. Probele de testat 2.1.2.1. Probele de ser ce urmează
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
2.1.2.1. Probele de ser ce urmează a fi testate și serul de control pozitiv și negativ, sunt diluate 1/25 în SSFT + 5 % (w/v) lapte smântânit + 0,05 % (v/v) Tween 20, câte 100 f2æl pe godeu. Se incubează timp de o oră la 37°C. 2.1.2.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.3. Conjugatul 2.1.3.1. Se dispersează câte 100 f2æl pe godeu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
godeu. Se incubează timp de o oră la 37°C. 2.1.2.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.3. Conjugatul 2.1.3.1. Se dispersează câte 100 f2æl pe godeu de gamaglobuline anti-cal conjugate cu peroxidază din hrean, diluate în SFT + 5 % lapte + 0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
de 7,2. Se incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
3.1.2. Probele de testat și controale 3.1.2.1. Pentru verificare: - se diluează 1/10 serurile de testat și cele de control în SFTT, direct pe placă, pentru a se obține un volum final de 100 f2æl/godeu. Se incubează o oră la 37°C. 3.1.2.2. Pentru titrare: se prepară o serie dublă de diluție din serurile de testat și testele de control pozitive (100 f2æl/godeu) de la 1/10 la 1/1.280 în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
se obține un volum final de 100 f2æl/godeu. Se incubează o oră la 37°C. 3.1.2.2. Pentru titrare: se prepară o serie dublă de diluție din serurile de testat și testele de control pozitive (100 f2æl/godeu) de la 1/10 la 1/1.280 în 8 godeuri. Probele de control negative sunt testate la o diluție de 1/10. ---------- Pct. 3.1.2.2. al anexei 4 a fost modificat de pct. 24 al art. II din
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
incubează o oră la 37°C. 3.1.2.2. Pentru titrare: se prepară o serie dublă de diluție din serurile de testat și testele de control pozitive (100 f2æl/godeu) de la 1/10 la 1/1.280 în 8 godeuri. Probele de control negative sunt testate la o diluție de 1/10. ---------- Pct. 3.1.2.2. al anexei 4 a fost modificat de pct. 24 al art. II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007 , publicat în MONITORUL
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
II din ORDINUL nr. 43 din 22 februarie 2007 , publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007. 3.1.3. Conjugatul Se adaugă Acm (anticorp monoclonal specific pentru VP7) conjugat cu peroxidază din hrean, prediluat, câte 50 f2æl/godeu în fiecare godeu și se amestecă ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
nr. 43 din 22 februarie 2007 , publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 155 din 5 martie 2007. 3.1.3. Conjugatul Se adaugă Acm (anticorp monoclonal specific pentru VP7) conjugat cu peroxidază din hrean, prediluat, câte 50 f2æl/godeu în fiecare godeu și se amestecă ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2) 0,03 %] și se incubează timp de 10 minute la temperatura camerei. Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 100 f2æl/godeu de SDS 2 % (Sulfat dodecil de sodiu). 3.1.6. Citirea Se Citesc la 405 nm la un cititor pentru ELISA. 3.2. Interpretarea rezultatelor 3.2.1. Validarea probelor Testul este valid atunci când densitatea optica (DO) a testului de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
de 3 ori cu tampon fosfat salin înainte de utilizare. Pentru un alt test este recomandată o suspensie de 1% valoarea hematocritului în tampon fosfat salin. Metodă de lucru: a) se distribuie câte 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu al unei microplaci din material plastic; se utilizează cele cu fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml suspensie de virus, adică lichid alantoidian în primul godeu; ... c) se utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
distribuie câte 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu al unei microplaci din material plastic; se utilizează cele cu fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml suspensie de virus, adică lichid alantoidian în primul godeu; ... c) se utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare de la 1/2 la 1/4096 din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu; ... e) se adaugă 0,025 ml eritrocite 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
utilizează cele cu fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml suspensie de virus, adică lichid alantoidian în primul godeu; ... c) se utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare de la 1/2 la 1/4096 din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu; ... e) se adaugă 0,025 ml eritrocite 1% în fiecare godeu; ... f) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la temperatura de 4°C
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
cu fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml suspensie de virus, adică lichid alantoidian în primul godeu; ... c) se utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare de la 1/2 la 1/4096 din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu; ... e) se adaugă 0,025 ml eritrocite 1% în fiecare godeu; ... f) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la temperatura de 4°C; ... g) se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
suspensie de virus, adică lichid alantoidian în primul godeu; ... c) se utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare de la 1/2 la 1/4096 din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu; ... e) se adaugă 0,025 ml eritrocite 1% în fiecare godeu; ... f) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la temperatura de 4°C; ... g) se citesc plăcile după 30-40 de minute de la terminarea sedimentarii martorilor. Se citesc
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
utilizează un microdilutor sau se realizează diluții binare de la 1/2 la 1/4096 din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml tampon fosfat salin în fiecare godeu; ... e) se adaugă 0,025 ml eritrocite 1% în fiecare godeu; ... f) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la temperatura de 4°C; ... g) se citesc plăcile după 30-40 de minute de la terminarea sedimentarii martorilor. Se citesc prin înclinare plăcile pentru a observa prezența sau absența unui flux
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
salin și având 4 sau 8 unități hemaglutinante/0,025 ml; ... c) eritrocite 1% de pui; ... d) ser de pui martor negativ; e) ser martor pozitiv. ... Metodă de lucru: a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
unități hemaglutinante/0,025 ml; ... c) eritrocite 1% de pui; ... d) ser de pui martor negativ; e) ser martor pozitiv. ... Metodă de lucru: a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
e) ser martor pozitiv. ... Metodă de lucru: a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând 4 sau 8 unități hemaglutinante; ... e) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus placă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]
-
tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au fundul în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând 4 sau 8 unități hemaglutinante; ... e) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus placă la temperatura de 4°C pentru minimum 60 de minute sau la temperatura
EUR-Lex () [Corola-website/Law/137096_a_138425]