900 matches
-
de o regiune de ADN linker necodificator de 1000 perechi de nucleotide derivat dintr-un vector de clonare. Constructul autocomplementar iaaM a fost realizat prin fuzionarea unei copii antisens a lui iaaM - 20W - 5A de 1 274-2 224 perechi de nucleotide la capătul 5’ al unui fragment sens iaaM - 20W - 5A de lungime integrală. Această fuzionare a creat o repetiție inversată de 950 perechi de nucleotide corespunzătoare capătului 3’ iaaM, întreruptă de o regiune linker ce corespunde perechilor de nucleotide de la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
fuzionarea unei copii antisens a lui iaaM - 20W - 5A de 1 274-2 224 perechi de nucleotide la capătul 5’ al unui fragment sens iaaM - 20W - 5A de lungime integrală. Această fuzionare a creat o repetiție inversată de 950 perechi de nucleotide corespunzătoare capătului 3’ iaaM, întreruptă de o regiune linker ce corespunde perechilor de nucleotide de la 1 la 1 273 din iaaM. Constructele autocomplementare au fost legate individual într-un vector de expresie în celule vegetale ce conține promotorul virusului mozaicului
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de nucleotide la capătul 5’ al unui fragment sens iaaM - 20W - 5A de lungime integrală. Această fuzionare a creat o repetiție inversată de 950 perechi de nucleotide corespunzătoare capătului 3’ iaaM, întreruptă de o regiune linker ce corespunde perechilor de nucleotide de la 1 la 1 273 din iaaM. Constructele autocomplementare au fost legate individual într-un vector de expresie în celule vegetale ce conține promotorul virusului mozaicului conopidei și terminatorul genei octopin sintazei. Casetele de expresie realizate astfel au fost ulterior
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
T-ADN. Planta era derivată dintr-o linie tumorală de cancer de colet transformată cu T-ADN al unui plasmid Ti de tip octopină. Dintr-un cancer de colet în care oncogena ipt nu era exprimată, deoarece secvența sa de nucleotide era hipermetilată, autorii au izolat o linie celulară în cadrul căreia au obținut revertanți în care expresia genică a fost reactivată, fie spontan, fie în urma tratamentului cu 5-azacitidină. Această reactivare genică a fost însoțită de modificarea pattern-ului de metilare a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
clivarea este blocată, după toate probabilitățile, datorită metilării. Enzimele de restricție isoschizomere Msp I și Hpa II recunosc un singur situs comun în regiunea secvenței genice ipt. În ADN din linia CX2, fragmentul de restricție BamHI de 980 perechi de nucleotide a rămas intact după clivare cu cele două enzime isoschizomere, pe când în ADN din liniile C care au reexprimat gena ipt, acest situs apare a fi rămas demetilat de vreme ce în urma hidrolizei enzimatice au fost generate două restricte, unul de 820
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
intact după clivare cu cele două enzime isoschizomere, pe când în ADN din liniile C care au reexprimat gena ipt, acest situs apare a fi rămas demetilat de vreme ce în urma hidrolizei enzimatice au fost generate două restricte, unul de 820 perechi de nucleotide, celălalt de 160 perechi de nucleotide care a scăpat detecției. În ADN din linia CX2SR2, în urma hidrolizei cu Hpa II, au apărut două fragmente de restricție - indiciu că aproximativ 50% dintre situsurile de restricție pentru Hpa II au rămas metilate
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
enzime isoschizomere, pe când în ADN din liniile C care au reexprimat gena ipt, acest situs apare a fi rămas demetilat de vreme ce în urma hidrolizei enzimatice au fost generate două restricte, unul de 820 perechi de nucleotide, celălalt de 160 perechi de nucleotide care a scăpat detecției. În ADN din linia CX2SR2, în urma hidrolizei cu Hpa II, au apărut două fragmente de restricție - indiciu că aproximativ 50% dintre situsurile de restricție pentru Hpa II au rămas metilate. Analiza sectorului terminal 3’ al secvenței
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
secvenței genei ipt cu Msp I este prezentată în figura 33.11. În ADN din linia CX2, fragmentul 3’ BamHI a fost parțial clivat la cel de al treilea situs Msp I, care a fost de aproximativ 650 perechi de nucleotide în spatele regiunii care conține terminalul 3’ din ARNm matur. În ADN din liniile care au reexprimat gena ipt, primul situs Msp I din aval de regiunea codificatoare a rămas demetilat în toate liniile exprimate, cu excepția liniei CX2AR2 în care aceste
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
induce inițierea procesului de transfer al ADN-T. Procesul de transfer selectează regiunea T pentru a intra în celula gazdă. ADN-T al unui plasmid nopalină este delimitat de regiunile flancatoare din plasmidul Ti prin repetiții de 25 perechi de nucleotide între repetiția din stânga și aceea din dreapta a ADN-T, apărând o diferență de doar două nucleotide. Când ADN-T este integrat în genomul gazdă el reține doar una sau două perechi de nucleotide din repetiția din dreapta, pe când repetiția din stânga este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
intra în celula gazdă. ADN-T al unui plasmid nopalină este delimitat de regiunile flancatoare din plasmidul Ti prin repetiții de 25 perechi de nucleotide între repetiția din stânga și aceea din dreapta a ADN-T, apărând o diferență de doar două nucleotide. Când ADN-T este integrat în genomul gazdă el reține doar una sau două perechi de nucleotide din repetiția din dreapta, pe când repetiția din stânga este variabilă. Granița ADN-T în genomul plantei poate fi localizată la o repetiție de 25 perechi
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Ti prin repetiții de 25 perechi de nucleotide între repetiția din stânga și aceea din dreapta a ADN-T, apărând o diferență de doar două nucleotide. Când ADN-T este integrat în genomul gazdă el reține doar una sau două perechi de nucleotide din repetiția din dreapta, pe când repetiția din stânga este variabilă. Granița ADN-T în genomul plantei poate fi localizată la o repetiție de 25 perechi de nucleotide sau la o serie de situsuri ce se extind pe 100 perechi de nucleotide, în cadrul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ADN-T este integrat în genomul gazdă el reține doar una sau două perechi de nucleotide din repetiția din dreapta, pe când repetiția din stânga este variabilă. Granița ADN-T în genomul plantei poate fi localizată la o repetiție de 25 perechi de nucleotide sau la o serie de situsuri ce se extind pe 100 perechi de nucleotide, în cadrul ADN-T. Uneori, într-un singur situs se integrează multiple copii în tandem de ADN-T. În figura 33.17 se prezintă un model de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de nucleotide din repetiția din dreapta, pe când repetiția din stânga este variabilă. Granița ADN-T în genomul plantei poate fi localizată la o repetiție de 25 perechi de nucleotide sau la o serie de situsuri ce se extind pe 100 perechi de nucleotide, în cadrul ADN-T. Uneori, într-un singur situs se integrează multiple copii în tandem de ADN-T. În figura 33.17 se prezintă un model de transfer al ADN-T al plasmidului Ti din bacteria Agrobacterium tumefaciens urmat de integrarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
plasmidului Ti din bacteria Agrobacterium tumefaciens urmat de integrarea sa în genomul celulei vegetale. Repetiția din dreapta este necesară pentru transferul și integrarea în genomul plantei. ADN-T integrat în genomul gazdă are o joncțiune precisă care reține 1-2 perechi de nucleotide ale repetiției din dreapta, pe când repetiția din stânga prezintă variații și până la 100 perechi de nucleotide pot fi scurtate din repetiția din stânga (din Lewin, 2000). În procesul de transfer al ADN -T se admite că sub acțiunea unei endonucleaze se realizează o
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Repetiția din dreapta este necesară pentru transferul și integrarea în genomul plantei. ADN-T integrat în genomul gazdă are o joncțiune precisă care reține 1-2 perechi de nucleotide ale repetiției din dreapta, pe când repetiția din stânga prezintă variații și până la 100 perechi de nucleotide pot fi scurtate din repetiția din stânga (din Lewin, 2000). În procesul de transfer al ADN -T se admite că sub acțiunea unei endonucleaze se realizează o crestare monocatenară în acest plasmid la nivelul repetiției de 25 perechi de nucleotide din dreapta
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de nucleotide pot fi scurtate din repetiția din stânga (din Lewin, 2000). În procesul de transfer al ADN -T se admite că sub acțiunea unei endonucleaze se realizează o crestare monocatenară în acest plasmid la nivelul repetiției de 25 perechi de nucleotide din dreapta (fig. 33.18). Această crestare oferă capătul primer 3’-OH ce poate fi preluat de ADN polimerază spre a fi inițiată alungirea replicei monocatenare. Sinteza acestei replici împinge vechea catenă care este utilizată în procesul de transfer. Transferul este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
scurte care s-a numit overdrive și care, de fapt, funcționează ca un enhancer (amplificator). Secvența aceasta poate fi situată în aceeași moleculă, dar are potențial de acțiune la distanțe mari în asigurarea transferului unor secvențe localizate la mii de nucleotide distanță. VirC1 și, mai ales VirC2 pot funcționa ca secvență overdrive. Direcționare spre nucleul celulei gazdă ADN -T din plasmidele octopină are mai multe secvențe care reprezintă ținte pentru crestare și / sau terminare a sintezei ADN în procesul de integrare
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
ADN -T în genomul celulei gazdă. La un moment dat monocatena transferată trebuie să fie convertită în ADN dublu-catenar. Structuri circulare de ADN-T identificate în celulele infectate apar a fi generate prin recombinare între repetițiile de 25 perechi de nucleotide din stânga și din dreapta ADN-T, dar nu se știe dacă asemenea structuri circulare sunt intermediari de replicare sau de recombinare. Sunt multe probleme încă nelămurite ale acestui proces legat de integrarea ADN-T ca unitate integrală, ca număr de copii
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
calciului. Ca exemplu, poate fi dată participarea calciului la fenomenul de cuplare a excitației cu contracția, în mușchiul cardiac. Cuplajul cu proteina G este specific majorității receptorilor metabotropi. Ca și receptorii, proteina G este o structură membranară activă ce leagă nucleotidele guanilice (GDP, GTP), în vederea activării sau inhibării efectorilor enzimatici de pe fața internă a membranei, ca generatori de mesageri secunzi. Până în prezent s-au descris cinci proteine G. Acestea sunt: proteina Gs-stimulatoare a adenilciclazei, Gi-inhibitorie a adenilciclazei, Gq-activatoare a fosfolipazei C
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
cele precedente. Toate proteinele G sunt constituite din trei subunități intramembranare, alfa, beta și gamma. Subunitatea alfa este partea cea mai specifică a moleculei, cu rol determinant în cuplajul receptor-efector. Prezentând mai multe situsuri de fixare (pe receptor, efector și nucleotide guanilice), ea conferă specificitatea diferitelor proteine G. Spre deosebire de subunitatea alfa, subunitățile beta și gamma sunt identice. Transferul de informație între receptorul activat și efector depinde de ciclul de activare/inactivare a proteinei G cu ajutorul schimbului GDP/GTP. Legarea unui agonist
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
vegetativ, precum și de hormoni, agenți autocrini/paracrini și alte semnale chimice locale. Contractilitatea mușchiului neted trebuie neapărat privită ținând seama de sincițialitate, care însă este mult mai complexă decât în miocard, implicând și endoteliul. Calciul și moleculele mici (inozitol trifosfat, nucleotide ciclice) pot trece prin joncțiunile comunicante (gap); cuplarea homocelulară permite amplificarea și prelungirea semnalului de calciu, iar cea heterocelulară (cu celulele endoteliale) poate avea efecte modulatoare deosebit de complexe. I.5.2.4. Cuplarea excitație-contracție și mecanismul molecular al contracției Interacțiunea
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
lor, tri- și dipeptidazele hidrolizează ultimele legături peptidice până la stadiul de aminoacizi liberi. Datorită acestor acțiuni combinate, hidroliza proteinelor se efectuează până la stadiul terminal de aminoacizi. Nucleazele intestinale acționează asupra acizilor nucleici desprinși de pe nucleoproteine de către tripsină, transformându-i în nucleotide. Nucleotidazele degradează nucleotidul în nucleozid și acid fosforic, iar nucleozidazele desfac nucleozidul în pentoze și baze purinice sau pirimidinice. Pe de altă parte, mucoasa intestinală conține mai multe diastaze care hidrolizează diholozidele, transformându-le în hexoze. Invertaza sau zaharaza transformă
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
adaptative de tipul hiperemiei din efortul fizic, hipertermiei, inflamației etc. Tot ca hormon local, histamina stimulează musculatura netedă gastro-intestinală, bronșică și uterină, precum și unele secreții glandulare (gastrică, intestinală, pancreatică, salivară, lacrimală etc.). Activarea receptorilor histaminergici produce modificări ale conținutului în nucleotide ciclice intracelulare. Prin intermediul receptorilor H1, blocați de antihistaminicele clasice, histamina activează adenilatciclaza membranară, determinând acumularea de cAMP la nivel celular. Se pare că prin același mecanism se realizează efectele de tip H2 (gastrosecretorii), inhibate de burimamidă și metiamidă. La nivel
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
și stimularea reflexă a eliberării de catecolamine, ca urmare a hipotensiunii induse de prostaglandina respectivă. Asupra creșterii celulare, prostaglandinele acționează prin intermediul cAMP și ADN, cu participarea ionilor de calciu. PGE1, de exemplu, crește încorporarea de baze purinice și pirimidinice în nucleotide, determinând proliferarea timocitelor. La rândul său, stimularea sintezei de ADN inhibă efectele metabolice ale prostaglandinelor, asigurând echilibrul creșterii și diviziunii celulare. În neoplazii, acest echilibru devine ineficient, ducând la creșterea prostaglandinelor la nivelul țesutului tumoral. În general, hormonii locali lipidici
Sistemul nervos vegetativ Anatomie, fiziologie, fiziopatologie by I. HAULICĂ () [Corola-publishinghouse/Science/100988_a_102280]
-
papaina, tripsina, ribonucleaza, aparțin acestui tip. Enzimele heteroproteidice, care constituie majoritatea, au o parte proteică (apoenzima) și o componentă neproteică (cofactor). Apoenzima conferă specificitatea de acțiune (hidrolizează, oxidoreducere, transfer etc.) și specificitatea de substrat. Cofactorii enzimatici, pot fi grupări prostetice (nucleotide, vitamine, cationi), sau molecule organice (coenzime, ca citocromii, coenzima A, piridin nucleotidele etc.). Unele enzime au nevoie atât de unele cât și de altele. Enzimele alosterice acționează numai în prezența unor activatori, incluși și ei în grupa cofactorilor, dar care
Materii prime horticole mai importante pentru industria alimentară. Struguri, fructe, legume. Cunoștințe de bază și aplicații practice by Dumitru D. Beceanu, Anghel Roxana Mihaela, Filimon V. Răzvan () [Corola-publishinghouse/Science/1627_a_3105]