354 matches
-
se utilizeze un extract de probă proaspăt preparat în condiții optime de creștere. Cu toate acestea, metoda poate fi aplicată cu succes pentru extracte conservate în soluție de glicerol la temperaturi între -68 °C și -86 °C. Anumite varietăți de pătlăgea vânătă constituie un mediu excelent de îmbogățire selectivă pentru cultura de C. m. ssp. sepedonicus, chiar și în absența simptomelor și permit, de asemenea, realizarea unui excelent test de confirmare pe gazdă. Pentru a reduce riscul de a obține rezultate
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
asemenea, realizarea unui excelent test de confirmare pe gazdă. Pentru a reduce riscul de a obține rezultate negative false, condițiile de creștere trebuie să fie optime. Pentru detaliile privind cultura, a se vedea apendicele 8. 7.1. Se repartizează pe pătlăgelele vinete, în conformitate cu una dintre metodele indicate în continuare (punctul 7.3 sau 7.4), tot restul de alicotă de test din extractul concentrat repus în suspensie, obținut în conformitate cu indicațiile din secțiunea 3.1.6 sau 3.2.5. Se folosesc
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
celei de-a doua sau a treia frunze, până la dezvoltarea completă a celei de-a treia frunze adevărate. Pentru a folosi integral extractul concentrat repus în suspensie și pentru a asigura eficacitatea inoculării, sunt necesare între 15 și 25 de pătlăgele vinete pe eșantion pentru efectuarea procedurilor descrise în continuare. 7.2. Înainte de inoculare, pătlăgelele vinete nu trebuie udate timp de una sau două zile pentru a reduce presiunea turgescenței. 7.3. Inoculare prin incizie. 7.3.1. Se ține planta
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
a treia frunze adevărate. Pentru a folosi integral extractul concentrat repus în suspensie și pentru a asigura eficacitatea inoculării, sunt necesare între 15 și 25 de pătlăgele vinete pe eșantion pentru efectuarea procedurilor descrise în continuare. 7.2. Înainte de inoculare, pătlăgelele vinete nu trebuie udate timp de una sau două zile pentru a reduce presiunea turgescenței. 7.3. Inoculare prin incizie. 7.3.1. Se ține planta între două degete și se pune cu pipeta pe tulpină, între cotiledoane și prima
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
o lungime de 1,0 cm și o adâncime aproximativ egală cu două treimi din grosimea tulpinii. 7.3.3. Se închide incizia cu vaselină sterilă, folosind o seringă. 7.4. Inoculare prin injecție Inocularea se practică în tulpini de pătlăgele vinete, chiar deasupra cotiledoanelor, cu ajutorul unei seringi dotate cu un ac hipodermic (nu mai puțin de 23 G). Eșantionul se repartizează între pătlăgelele vinete. 7.5. Ca martori pozitivi, se inoculează cinci plante prin aceeași metodă (a se vedea punctul
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
cu vaselină sterilă, folosind o seringă. 7.4. Inoculare prin injecție Inocularea se practică în tulpini de pătlăgele vinete, chiar deasupra cotiledoanelor, cu ajutorul unei seringi dotate cu un ac hipodermic (nu mai puțin de 23 G). Eșantionul se repartizează între pătlăgelele vinete. 7.5. Ca martori pozitivi, se inoculează cinci plante prin aceeași metodă (a se vedea punctul 7.3 sau 7.4) cu o suspensie apoasă care conține între 105 și 106 celule/ml dintr-o cultură cunoscută de C.
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
fitotroane, deoarece sunt susceptibile de a răspândi bacteria de la un eșantion la altul. 7.8. După o săptămână, se examinează cu regularitate plantele pentru a identifica apariția simptomelor. Se numără plantele care prezintă simptome. C. m. ssp. sepedonicus provoacă la pătlăgeaua vânătă o veștejire a frunzelor, care se poate manifesta în primul rând printr-o flaciditate pe margini sau între nervuri. La început, țesutul veștejit poate lua o culoare verde închis sau un aspect pestriț, dar pălește înainte de a se necroza
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
adesea aspectul gras al țesuturilor saturate cu apă. Țesutul necrozat prezintă adesea o margine de culoare galben viu. Plantele nu mor neapărat. Cu cât simptomele întârzie să apară, cu atât șansele de supraviețuire sunt mai mari. Plantele pot învinge infecția. Pătlăgelele vinete tinere sunt mult mai sensibile la populațiile slabe de C. m. ssp. sepedonicus decât plantele mai în vârstă, de unde necesitatea de a utiliza plante în stadiul celei de-a treia frunze sau chiar înaintea acestui stadiu. Veștejirile mai pot
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de C. m. ssp. sepedonicus prin faptul că frunzele sau plantele întregi se ofilesc rapid. De asemenea, se poate recurge la o colorare Gram pentru a distinge C. m. ssp. sepedonicus de Erwinia spp. 7.9. Odată cu apariția simptomelor la pătlăgelele vinete trebuie să se efectueze noi operațiuni de izolare, pe baza segmentelor de țesut care provin de la frunzele veștejite sau pe baza tulpinii plantei (pentru macerarea țesuturilor, a se vedea punctul 3.1.3). Se dezinfectează suprafața frunzelor și a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
să se efectueze noi operațiuni de izolare, pe baza segmentelor de țesut care provin de la frunzele veștejite sau pe baza tulpinii plantei (pentru macerarea țesuturilor, a se vedea punctul 3.1.3). Se dezinfectează suprafața frunzelor și a tulpinilor de pătlăgea vânătă, frecându-le cu etanol la 70 %. Se efectuează un test IF sau PCR pe seva de pătlăgea vânătă și se trece la izolarea pe mediu adecvat (selectiv) (a se vedea secțiunea 8). De asemenea, este posibil să se prepare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
pe baza tulpinii plantei (pentru macerarea țesuturilor, a se vedea punctul 3.1.3). Se dezinfectează suprafața frunzelor și a tulpinilor de pătlăgea vânătă, frecându-le cu etanol la 70 %. Se efectuează un test IF sau PCR pe seva de pătlăgea vânătă și se trece la izolarea pe mediu adecvat (selectiv) (a se vedea secțiunea 8). De asemenea, este posibil să se prepare o colorare Gram (a se vedea apendicele 9). Se identifică culturile pure de izolați presupuși de C. m.
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
ssp. sepedonicus și li se confirmă patogenicitatea (a se vedea secțiunile 9 și 10). 7.10. În anumite circumstanțe și în special în cazul în care condițiile de cultură nu sunt optime, C. m. ssp. sepedonicus poate fi prezent în pătlăgelele vinete în stadiul de infecție latentă, chiar și după perioade de incubație care ajung până la patru săptămâni. În cazul în care după patru săptămâni nu se observă nici un simptom, se efectuează un test IF sau PCR pe o probă compozită
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
și pe baza unei diluții adecvate de extract concentrat, repus în suspensie, de conuri de cartofi prelevate de la stolonul sau tulpina de cartof. Izolările trebuie practicate pe toți tuberculii sau pe toate segmentele de tulpini de cartofi și pe toate pătlăgelele vinete care nu prezintă nici un simptom, dar pentru care testul IF sau PCR efectuat pe proba compozită (a se vedea secțiunea 7.10) a dat un rezultat pozitiv. După caz, tulpinile de pătlăgele vinete trebuie să fie macerate, în conformitate cu metoda
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de tulpini de cartofi și pe toate pătlăgelele vinete care nu prezintă nici un simptom, dar pentru care testul IF sau PCR efectuat pe proba compozită (a se vedea secțiunea 7.10) a dat un rezultat pozitiv. După caz, tulpinile de pătlăgele vinete trebuie să fie macerate, în conformitate cu metoda descrisă la secțiunea 3.1.3. Ca martori pozitivi, se prepară diluții la a zecea parte dintr-o suspensie de 106 ufc/ml de C. m. ssp. sepedonicus (de exemplu, NCPPB 4053 sau
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Materialul de control se testează la fel ca și probele. 8.1. Desfășurare pe medii selective 8.1.1. Pe baza a 100 μl de alicotă de probă de extract concentrat de cartof repus în suspensie sau de sevă de pătlăgea vânătă, se efectuează diluții la a zecea parte într-un tampon de extract concentrat (a se vedea apendicele 3). 8.1.2. Tentativele de izolare pe bază de extract concentrat nediluat de cartof se soldează, în general, cu eșecuri datorită
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
efectua după cinci, șapte și, în final, zece zile. 8.2. Purificarea coloniilor suspecte Nota bene: Trebuie să se efectueze o repicare în mediu YGM a coloniilor cu aspect asemănător cu C. m. ssp. sepedonicus în scopul inoculării ulterioare a pătlăgelelor vinete și/sau al identificării. Operațiunea în cauză trebuie efectuată înainte ca lamele să atingă o abundență excesivă, respectiv, de preferință, după trei-cinci zile. 8.2.1. Se efectuează o însămânțare în striuri a coloniilor cu aspect asemănător cu C.
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
inoculum de aproximativ 106 celule/ml pe baza unei culturi de trei zile a izolatului care trebuie testat și a unei sușe martor pozitive corespunzătoare de C. m. ssp. sepedonicus. 10.2. Se inoculează 5-10 tulpini de plante tinere de pătlăgea vânătă în stadiul celei de-a treia frunze (a se vedea secțiunea 7.3 sau 7.4). 10.3. Se pun la incubat la temperaturi cuprinse între 18 °C și 24 °C, la o umiditate relativ ridicată, asigurând o udare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
trebui să apară o veștejire tipică în două săptămâni; cu toate acestea, plantele care nu prezintă simptome (a se vedea secțiunea 7.8.) la sfârșitul perioadei menționate trebuie lăsate în continuare la incubat până la trei săptămâni, la temperaturi favorabile creșterii pătlăgelelor vinete, dar care să nu depășească 25 °C (a se vedea apendicele 8). În cazul în care cultura nu prezintă simptome la sfârșitul celor trei săptămâni, nu se poate confirma că este vorba despre o formă patogenă de C. m.
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1, pH 7,0 Na2HPO4 8,52 g KH2PO4 5,44 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Apendicele 8 Culturi de pătlăgele vinete Se seamănă semințe de pătlăgele vinete (Solanum melongena) într-un pământ de semănat pasteurizat. Atunci când cotiledoanele sunt complet dezvoltate (10-14 zile), plantulele se repică într-un pământ de replantat pasteurizat. Pătlăgelele vinete trebuie cultivate în seră în următoarele condiții
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
52 g KH2PO4 5,44 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Apendicele 8 Culturi de pătlăgele vinete Se seamănă semințe de pătlăgele vinete (Solanum melongena) într-un pământ de semănat pasteurizat. Atunci când cotiledoanele sunt complet dezvoltate (10-14 zile), plantulele se repică într-un pământ de replantat pasteurizat. Pătlăgelele vinete trebuie cultivate în seră în următoarele condiții: Durata zilei 14 ore sau durata
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
minute la 121 °C. Apendicele 8 Culturi de pătlăgele vinete Se seamănă semințe de pătlăgele vinete (Solanum melongena) într-un pământ de semănat pasteurizat. Atunci când cotiledoanele sunt complet dezvoltate (10-14 zile), plantulele se repică într-un pământ de replantat pasteurizat. Pătlăgelele vinete trebuie cultivate în seră în următoarele condiții: Durata zilei 14 ore sau durata naturală a zilei, în cazul în care este mai mare Temperatura: ziua 21-24 °C noaptea 15 °C. Varietăți sensibile de pătlăgele vinete: "Black Beauty"; "Long Tom
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
un pământ de replantat pasteurizat. Pătlăgelele vinete trebuie cultivate în seră în următoarele condiții: Durata zilei 14 ore sau durata naturală a zilei, în cazul în care este mai mare Temperatura: ziua 21-24 °C noaptea 15 °C. Varietăți sensibile de pătlăgele vinete: "Black Beauty"; "Long Tom"; "Rima"; "Balsas". Furnizor: a se vedea site-ul web la adresa http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. Apendicele 9 Procedura pentru reacția Gram (modificarea lui Hucker) (Doetsch, 1981)32 Soluție de violet
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
orice documentație relevantă, până la încheierea respectivelor proceduri. După caz, conservarea tuberculilor va permite testarea varietăților. 2. În cazul confirmării prezenței organismului, trebuie să se păstreze și să se conserve în condiții adecvate: - materialul menționat la punctul 1; - o probă de pătlăgea vânătă infectată prin inoculare cu extract de tubercul sau de plantă; - cultura izolată a organismului, timp de cel puțin o lună după procedura de notificare prevăzută la articolul 5 alineatul (2). Anexa III 1. Pentru a determina extinderea contaminării probabile
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
În cazul eșuării testului de însămânțare, izolarea trebuie efectuată pe baza plantelor utilizate pentru testul biologic (a se vedea secțiunea 8). 16 Testul biologic este utilizat pentru izolarea C.m. ssp. sepedonicus pe baza extractelor de cartofi prin îmbogățire selectivă în pătlăgele vinete (Solanum melongena). Sunt necesare condiții optime de incubație, în conformitate cu specificațiile procedurii în cauză. Bacteriile care au efect inhibitor asupra C.m. ssp. sepedonicus în prezența unui mediu MTNA sau NCP-88 nu riscă să afecteze desfășurarea testului menționat (a se vedea
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
stare proaspătă sau refrigerată 70 20 Drepturi minime: 350 LBP/kg brut 0709 10 Anghinare, în stare proaspătă sau refrigerată 70 20 Drepturi minime: 350 LBP/kg brut 0709 20 Sparanghel, în stare proaspătă sau refrigerată 25 25 0709 30 Pătlăgele vinete, în stare proaspătă sau refrigerată 70 20 Drepturi minime: 500 LBP/kg brut 0709 40 Țelină, de alt tip decât țelina de rădăcină, în stare proaspătă sau refrigerată 25 25 0709 51 Ciuperci din genul Agaricus, în stare proaspătă
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]