34,291 matches
-
rezultat pozitiv, iar martorii negativi un rezultat negativ. IV. Examenul eșantioanelor cu RT-PCR IV.1. În prezenta secțiune sunt descrise procedurile necesare amplificării prin PCR a unei părți din segmentul 8 al genomului virusului AIS, care poate fi realizată pe țesuturi de pește sau într-o cultură a virusului IV.1.1. Extragerea ARN a) Din fiecare eșantion se îndepărtează RNAlater. Se adaugă 1 ml de apă distilată tratată cu DEPC în fiecare tub și tuburile sunt centrifugate la o viteză
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
a fi egală sau mai mare, în fiecare eșantion și într-un tub martor care conține o substanță de control corespunzătoare (400 μl apă distilată sau un homogenat de rinichi prelevat de la pești indemni de organisme patogene). Dacă este necesar, țesuturile se separă prin pipetări repetate. Tuburile sunt lăsate la incubat, la temperatura ambiantă, timp de 5 minute. Se adaugă 160 μm de cloroform în fiecare tub și se agită energic tuburile timp de 3 minute, apoi acestea sunt supuse unei
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
ARN-ul virusului AIS. Ele pot fi supuse unui examen suplimentar practicat cu sonde ADN sau unei secvențieri. IV.1.4. Confirmarea prin PCR a virusului AIS izolat într-o cultură tisulară Dacă în cursul examenului virologic al eșantioanelor de țesut din celulele SHK-1 se produce un efect citopatic (ECP) complet, din cupulă se scot 400 µl de suspensie, care sunt turnați într-un tub steril de 1,5 ml. Din eșantionul respectiv se extrage ARN-ul, după cum se indică la
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
lot, inclusiv controalele pozitive, sunt negative, testul este considerat invalidat pentru toate lamele din lotul respectiv. Dacă eșecul controalelor invalidează un lot de lame, acestea se distrug și se efectuează un nou test, cu calculi dubluri. V.5. Examinarea altor țesuturi Această tehnică poate fi aplicată altor țesuturi de pește, precum ficatul, splina și inima, cu condiția ca pe lame să se poată depune o cantitate suficientă de celule endoteliale, de leucocite și de limfocite. Procedura de marcare este identică pentru
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
este considerat invalidat pentru toate lamele din lotul respectiv. Dacă eșecul controalelor invalidează un lot de lame, acestea se distrug și se efectuează un nou test, cu calculi dubluri. V.5. Examinarea altor țesuturi Această tehnică poate fi aplicată altor țesuturi de pește, precum ficatul, splina și inima, cu condiția ca pe lame să se poată depune o cantitate suficientă de celule endoteliale, de leucocite și de limfocite. Procedura de marcare este identică pentru toate țesuturile, chiar dacă pentru unele dintre ele
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
tehnică poate fi aplicată altor țesuturi de pește, precum ficatul, splina și inima, cu condiția ca pe lame să se poată depune o cantitate suficientă de celule endoteliale, de leucocite și de limfocite. Procedura de marcare este identică pentru toate țesuturile, chiar dacă pentru unele dintre ele este preferabil să se renunțe la marcarea cu iodură de propidiu și să se utilizeze iluminarea în fază pentru identificarea tipurilor de celule prezente în calculul renal. VI. Histologie Eșantioanele introduse în parafină la 5
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
animale cu blană" înseamnă animale crescute pentru producția de blană care nu sunt destinate consumului uman; 26. "gelatină" înseamnă proteine naturale, solubile, gelatinizante sau negelatinizante, obținute prin hidroliza parțială a colagenului obținut din oase, piei brute sau prelucrate, tendoane și țesut fibros de animale (inclusiv pești și păsări de curte); 27. "jumări" înseamnă reziduuri cu conținut de proteine obținute prin topire, după separarea parțială a grăsimii și a apei; 28. "recipient închis ermetic" înseamnă un recipient proiectat și destinat a fi
jrc5828as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91000_a_91787]
-
de proteine obținute prin topire, după separarea parțială a grăsimii și a apei; 28. "recipient închis ermetic" înseamnă un recipient proiectat și destinat a fi folosit astfel încât să asigure protecție împotriva pătrunderii microorganismelor; 29. "piei brute și prelucrate" înseamnă toate țesuturile cutanate și subcutanate; 30. "instalație de incinerare de capacitate mare" înseamnă o instalație de incinerare alta decât instalațiile de incinerare de capacitate mică; 31. "proteine hidrolizate" înseamnă polipeptidele, peptidele și aminoacizii, precum și amestecurile acestora, obținute prin hidroliza produselor animale secundare
jrc5828as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91000_a_91787]
-
IDENTIFICAREA AGENTULUI Prezența Mycobacterium bovis (M. bovis), agent al tuberculozei bovine, pe eșantioane clinice și post mortem, poate fi stabilită prin examinarea frotiurilor colorate sau a tehnicilor de imunoperoxidază și confirmată prin cultivarea organismului pe un mediu de izolare primar. Țesutul patologic de confirmare a prezenței M. bovis se prelevează din ganglioni anormali și organe parenchimatoase precum plămâni, ficat, splină etc. În cazul în care animalul nu prezintă leziuni patologice, eșantioanele se prelevează din ganglioni retrofaringieni, ganglioni pulmonari, ganglioni mediastinali, ganglioni
jrc5790as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90962_a_91749]
-
probe de sânge pe parcurs, se procedează la următoarele examene hematologice: hematocrit, concentrație de hemoglobina, numărătoarea eritrocitelor și a leucocitelor, formula leucocitara, numărătoarea plachetelor sangvine, măsurarea timpului de coagulare. Determinările de biochimie clinică în scopul determinării efectelor toxice majore în țesuturi și, în special, efectele asupra rinichiului și a ficatului sunt practicate pe probe de sânge obținute de la fiecare animal imediat înainte de sacrificare sau ca parte a acestei proceduri (dar nu de la cele găsite muribunde sau care au fost sacrificate pe
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
analize de urină în ultima săptămână a studiului, folosind probe de urină prelevate după un anumit orar: aspect, volum, osmolaritate sau densitate, pH, proteinurie, glucozurie, hematurie. În plus, trebuie avute în vedere investigații asupra constantelor plasmatice ale leziunilor generale ale țesuturilor. Dacă proprietățile cunoscute ale substanței testate pot sau se apreciază că pot să afecteze curbele metabolice conexe, trebuie efectuate și alte analize, cum sunt: calciu, fosfor, trigliceride à jeun, hormoni specifici, methemoglobina și colinesteraza. Acestea trebuie identificate pentru substanțele chimice
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
orificiilor, a cavităților craniana, toracica și abdominală, precum și a conținutului acestora. Ficatul, rinichii, glandele suprarenale, testiculele, epididimul, uterul, ovarele, timusul, splina, creierul și inima fiecărui animal (cu excepția celor găsite muribunde și/sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare se conserva în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
epididimul, uterul, ovarele, timusul, splina, creierul și inima fiecărui animal (cu excepția celor găsite muribunde și/sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare se conserva în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând leziuni macroscopice, creierul (regiunile reprezentative, cuprinzând encefalul, cerebelul și trunchiul cerebral), măduva spinării (din trei segmente
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare se conserva în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând leziuni macroscopice, creierul (regiunile reprezentative, cuprinzând encefalul, cerebelul și trunchiul cerebral), măduva spinării (din trei segmente: cervical, medio-toracic și lombar), hipofiza, glanda tiroidă, glandele paratiroide, timusul, esofagul, glandele salivare, stomacul, intestinul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
o probă de măduvă osoasă (și/sau o puncție aspirativă de măduvă osoasă examinată pe loc), piele și ochi (dacă s-au constat modificări la examenele oftalmologice). Observațiile clinice și cele macroscopice pot să conducă la necesitatea de a examina țesuturi suplimentare. Se conserva și alte organe considerate probabile organe-țintă pentru substanță testată, având în vedere proprietățile sale cunoscute. 1.5.2.4. Histopatologia Se efectuează un examen histopatologic complet al țesuturilor și organelor tuturor animalelor aparținând grupului martor și grupului
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
macroscopice pot să conducă la necesitatea de a examina țesuturi suplimentare. Se conserva și alte organe considerate probabile organe-țintă pentru substanță testată, având în vedere proprietățile sale cunoscute. 1.5.2.4. Histopatologia Se efectuează un examen histopatologic complet al țesuturilor și organelor tuturor animalelor aparținând grupului martor și grupului tratat cu doză cea mai mare. Aceste examene trebuie extinse la animalele tratate cu alte doze, dacă se constată modificări care au legătură cu tratamentul la grupul tratat cu doză cea
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
la animalele tratate cu alte doze, dacă se constată modificări care au legătură cu tratamentul la grupul tratat cu doză cea mai mare. Se examinează toate leziunile macroscopice. Atunci când se folosește un grup satelit, se efectuează un examen histopatologic al țesuturilor și organelor la care au fost identificate efecte în grupurile tratate. 2. REZULTATELE ȘI PREZENTAREA ACESTORA 2.1. REZULTATELE Rezultatele se prezintă individual. În plus, toate rezultatele trebuie rezumate în formă tabelara, arătându-se pentru fiecare grup de experiență, numărul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
coagulare, timpul de protombină sau de tromboplastina, la începutul studiului și apoi la intervale lunare sau la jumatatea perioadei de testare și, în cele din urmă, la încheierea testului. Determinările de biochimie clinică în scopul determinării efectelor toxice majore în țesuturi și, în special, efectele asupra rinichiului și a ficatului sunt practicate pe probe de sânge obținute de la toate animalele la începutul studiului, la intervale lunare sau la jumatatea perioadei de testare și la încheierea testului. Domeniile de analiză care trebuie
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
aspect, volum, osmolaritate sau densitate, pH, proteinurie, glucozurie, hematurie. Se pot folosi și alți parametri dacă este necesar să se extindă investigarea efectului (efectelor) observat(e). În plus, trebuie avute în vedere investigații asupra constantelor plasmatice ale leziunilor generale ale țesuturilor. Alte analize care se pot dovedi necesare pentru o evaluare toxicologica adecvată includ: analiza lipidelor, a hormonilor, echilibrul acido-bazic, methemoglobina și inhibarea colinesterazei. Pot fi folosite analize de biochimie clinică suplimentare, daca este necesar să se extindă investigarea efectelor observate
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
și abdominală, precum și a conținutului acestora. Ficatul, rinichii, glandele suprarenale, testiculele, epididimul, ovarele, uterul, glanda tiroidă (cu glandele paratiroide) timusul, splina, creierul și inima fiecărui animal (cu excepția celor găsite muribunde și/sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare trebuie conservate în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
cu glandele paratiroide) timusul, splina, creierul și inima fiecărui animal (cu excepția celor găsite muribunde și/sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare trebuie conservate în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând leziuni macroscopice, creierul (regiunile reprezentative, cuprinzând encefalul, cerebelul și trunchiul cerebral), măduva spinării (din trei segmente
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
sau a celor sacrificate pe parcurs) sunt curățate de țesuturile aderente, după caz, si cântărite proaspete cât mai repede după disecție, pentru a evita deshidratarea. Țesuturile următoare trebuie conservate în mediul de fixare cel mai adecvat atât pentru tipul de țesut cât și pentru examenul histopatologic prevăzut: toate organele prezentând leziuni macroscopice, creierul (regiunile reprezentative, cuprinzând encefalul, cerebelul și trunchiul cerebral), măduva spinării (din trei segmente: cervical, medio-toracic și lombar), hipofiza, ochii, glanda tiroidă, glandele paratiroide, timusul, esofagul, glandele salivare, stomacul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
sistemice), nervii periferici (sciatic sau tibial), de preferat din apropierea mușchiului, o probă de măduvă osoasă (și/sau o puncție aspirativă de măduvă osoasă examinată pe loc), piele. Observațiile clinice și cele macroscopice pot să conducă la necesitatea de a examina țesuturi suplimentare. Se conserva și alte organe considerate probabile organe-țintă pentru substanță testată, având în vedere proprietățile sale cunoscute. 1.5.5.4. Histopatologia Se efectuează un examen histopatologic complet al țesuturilor și organelor conservate ale tuturor animalelor aparținând grupului martor
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
macroscopice pot să conducă la necesitatea de a examina țesuturi suplimentare. Se conserva și alte organe considerate probabile organe-țintă pentru substanță testată, având în vedere proprietățile sale cunoscute. 1.5.5.4. Histopatologia Se efectuează un examen histopatologic complet al țesuturilor și organelor conservate ale tuturor animalelor aparținând grupului martor și grupului tratat cu doză cea mai mare. Aceste examene trebuie extinse la animalele tratate cu alte doze, dacă se constată modificări care au legătură cu tratamentul la grupul tratat cu
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]
-
la animalele tratate cu alte doze, dacă se constată modificări care au legătură cu tratamentul la grupul tratat cu doză cea mai mare. Se examinează toate leziunile macroscopice. Atunci când se folosește un grup satelit, se efectuează un examen histopatologic al țesuturilor și organelor la care au fost identificate efecte în grupurile tratate. 2. REZULTATELE ȘI PREZENTAREA ACESTORA 2.1. REZULTATELE Rezultatele se prezintă individual. În plus, toate rezultatele trebuie rezumate în formă tabelara, arătându-se pentru fiecare grup de experiență, numărul
jrc5127as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90295_a_91082]