34,857 matches
-
folosește curent în fabricile de bere pentru a determina momentul zaharificării plămezilor. Reactivi amidon 1 %, preparat în soluție tampon de acetat cu pH = 4,9; Lugol: 1 g iod metalic, 2 g iodură de potasiu, 300 ml apă distilată. Obținerea preparatului enzimatic 10 g făină de malț (sau alt material care conține amilaze) se aduc la volumul de 100 ml cu apă distilată, se agită bine și se lasă 30 minute pentru extracție, timp în care se mai agită de câteva
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
de la capătul lanțurilor pectinice poartă denumirea de exopectin-glicozidaze sau exo poligalacturonaze. Endo-poli-galacturonaza care uneori se mai numește și pectinază, catalizează hidroliza legăturilor glicozidice α (1-4) existente în substanțele pectice între resturile de acid galacturonic care nu au grupările carboxilice metoxilate. Preparatele enzimatice pectolitice se obțin, în majoritatea cazurilor, din mucegaiuri și sunt comercializate sub denumirea de: aspergol, pectinol, filtragol, etc. În industria alimentară se utilizează în vinificație, în industria sucurilor de fructe. Astfel, în vinificație și în industria sucurilor de fructe
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
se repetă la intervale scurte de timp până când timpul de scurgere al amestecului între cele două repere este egal cu 50 % (T50) față de timpul de scurgere al probei martor. Proba martor se efectuează în aceleași condiții folosind 1 ml de preparat enzimatic inactivat prin firbere. Timpul de scurgere al probei martor se consideră 100 % (T100). Mod de calcul În condițiile arătate, numărul invers al timpului (1/T) de scăderea vâscozității cu 50 % (notat T 50) este direct proporțional cu activitatea enzimei
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
1/T) de scăderea vâscozității cu 50 % (notat T 50) este direct proporțional cu activitatea enzimei care se exprimă în unități. O unitate de endo-poligalacturonoză este cantitatea de enzimă care în condițiile menționate (9 ml substrat 1 % și 1 ml preparat enzimatic, la pH = 4 și la temperatură 30 C) determină reducerea vâscozității pectinei sau acidului poligalacturonic, cu 50 % în timp de 10 minute (T50 = 10, respectiv 1/T = 0,1). Pentru exprimarea directă în unități de endo poligalacturonază = 1/T50
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
acidului poligalacturonic, cu 50 % în timp de 10 minute (T50 = 10, respectiv 1/T = 0,1). Pentru exprimarea directă în unități de endo poligalacturonază = 1/T50, activitatea se calculează în unități pentru 1 ml extract enzimatic nediluat sau 1 g preparat enzimatic uscat. X.2.2. DETERMINAREA ACTIVITĂȚII EXO - POLIGALACTURONAZEI Determinarea activității exo - poligalacturonazei se realizează prin urmărirea creșterii puteri reducătoare a sistemului de reacție care conține pectină sau acid poligalacturonic (substrat) și enzime pectolitice. În urma acțiunii acestor enzime asupra substratului
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
și aminoacizi. Sunt secretate de pancreas sub formă inactivă de prCarboxipeptidaze, care prin intervenția tripsinei (în intestin) se transformă în carboxipeptidaze active. Sunt metal-enzime care conțin Zn2+. Principiul metodei Metoda se bazează pe determinarea produșilor de hidroliză rezultați în urma acțiunii preparatului enzimatic asupra unui substrat (cazeină, hemoglobină sau altă proteină). Produșii de hidroliză pot fi dozați prin metoda titrimetrică (metoda Sörensen) sau colorimetrică (cu reactiv Folin-CiColteu, ninhidrină). a. Metoda titrimetrică Aminoacizii eliberați în urma acțiunii enzimelor proteolitice asupra substratului se dozează prin
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
de hidroxid de sodiu care corespunde aminoacizilor eliberați de enzimă. Activitatea enzimelor proteolitice se exprimă convențional prin: cantitatea de glicCol eliberată de enzimă în timp de o oră din 100 g cazeină, de către 1 ml extract enzimatic sau 1 g preparat enzimatic în condițiile de lucru date. b. Metoda colorimetrică Principiul metodei Metoda se bazează pe reacția de culoare pe care o dau produșii de hidroliză, solubili în acid tricloracetic, care au rezultat în urma acțiunii enzimei asupra substratului. Reacția se realizează
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
cm, folosind ca fond proba martor. Cu valorile obținute se trasează curba etalon trecând pe ordonată E 660 nm, iar pe abscisă micrograme de tirozină. Mod de lucru pentru determinarea activității enzimatice în două eprubete se pipetează câte 1 ml preparat enzimatic diluat corespunzător și se termostatează la 37 C timp de 5 minute. Se pipetează apoi în una din eprubete 1 ml substrat (proba activă) iar în cea de-a două eprubetă 2 ml acid tricloracetic 0,3 N și
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
corespunzător și se termostatează la 37 C timp de 5 minute. Se pipetează apoi în una din eprubete 1 ml substrat (proba activă) iar în cea de-a două eprubetă 2 ml acid tricloracetic 0,3 N și 1 ml preparat enzimatic (proba martor). Ambele eprubete se termostatează timp de o oră la 37 C. După expirarea timpului se oprește reacția enzimatică din proba activă cu 2 ml acid tricloracetic 0,3 N. După omogenizare, se continuă termostatarea celor două probe
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
reactiv Folin-CiCalteu și se agită. Se determină extincția probei active la 660 nm, în cuve de 1 cm, folosind ca fond proba martor și același spectrofotometru care s-a folosit pentru curba etalon. Mod de calcul Activitatea proteolitică a unui preparat enzimatic se exprimă în unități Anson. O unitate Anson (A.U.) reprezintă cantitatea de enzimă care în condiții standard pune în libertate într-un minut produși de hidroliză ai substratului (hemoglobină, cazeină, etc.) solubili în acid tricloracetic, a căror exticție
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
produși de hidroliză ai substratului (hemoglobină, cazeină, etc.) solubili în acid tricloracetic, a căror exticție este echivalentă cu cea a unui miliechivalent de tirozină sau numărul de miliechivalenți de tirozină formați într-un minut de 1 ml sau 1 g preparat enzimatic. În funcție de extincția determinată la spectrofotometru se ia din curba etalon cantitatea de tirozină (T) exprimată în miligrame. Pentru a obține activitatea proteolitică a preparatului enzimatic, în unități Anson / g se aplică următoarea relație: în care: T - cantitatea de tirozină
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
numărul de miliechivalenți de tirozină formați într-un minut de 1 ml sau 1 g preparat enzimatic. În funcție de extincția determinată la spectrofotometru se ia din curba etalon cantitatea de tirozină (T) exprimată în miligrame. Pentru a obține activitatea proteolitică a preparatului enzimatic, în unități Anson / g se aplică următoarea relație: în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, transformată în grame; D - diluția preparatului enzimatic (1 ml) prin amestecul cu substratul (1 ml) și acid tricloracetic (2 ml); 181
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
curba etalon cantitatea de tirozină (T) exprimată în miligrame. Pentru a obține activitatea proteolitică a preparatului enzimatic, în unități Anson / g se aplică următoarea relație: în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, transformată în grame; D - diluția preparatului enzimatic (1 ml) prin amestecul cu substratul (1 ml) și acid tricloracetic (2 ml); 181·10.3 - miliechivalentul tirozinei; 60 - timpul de reacție, minute; c - cantitatea de enzimă luată în lucru (în g) conținută de 1 ml soluție. X.3
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
prin menținere pe o baie de apă sau termostat timp de 15 minute. În una din eprubete se adaugă 2 ml din extractul enzimatic ce trebuie analizat, iar în cea de-a doua 3 ml acid tricloracetic și 2 ml preparat enzimatic (proba martor). După omogenizare, cele două eprubete se termostatează la 40 C timp de 60 minute. După epuizarea timpului în eprubeta în care a acționat enzima se adaugă 3 ml acid tricloracetic (pentru stoparea activității) și se omogenizează. Ambele
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
și proba martor ca fond. Dacă extincțiile nu se încadrează între 0,2 și 0,5 se impune modificarea concentrației enzimatice. Pentru a evita astfel de situații, se recomandă efectuarea în paralel a mai multor probe cu concentrații diferite de preparat enzimatic. De asemenea pentru comparație se pot efectua probe cu enzime pure, de exemplu papaina, în paralel cu probele de analizat. Mod de calcul în funcție de extincția determinată la spectrofotometru se ia din curba etalon cantitatea de tirozină. Activitatea enzimatică se
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
de exemplu papaina, în paralel cu probele de analizat. Mod de calcul în funcție de extincția determinată la spectrofotometru se ia din curba etalon cantitatea de tirozină. Activitatea enzimatică se exprimă în µg de tirozină eliberată de 1 ml sau 1 g preparat enzimatic în timp de o oră în condițiile de lucru date. în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, în µg; 5 - diluția preparatului enzimatic, conform modului de lucru; C - volumul de preparat enzimatic în ml, sau cantitatea
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
enzimatică se exprimă în µg de tirozină eliberată de 1 ml sau 1 g preparat enzimatic în timp de o oră în condițiile de lucru date. în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, în µg; 5 - diluția preparatului enzimatic, conform modului de lucru; C - volumul de preparat enzimatic în ml, sau cantitatea de preparat enzimatic în grame ce se găsește în C ml. X.4. DETERMINAREA ACTIVITĂȚII LIPAZEI Lipaza face parte din clasa hidrolazelor, grupa esterazelor, ele catalizează
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
1 ml sau 1 g preparat enzimatic în timp de o oră în condițiile de lucru date. în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, în µg; 5 - diluția preparatului enzimatic, conform modului de lucru; C - volumul de preparat enzimatic în ml, sau cantitatea de preparat enzimatic în grame ce se găsește în C ml. X.4. DETERMINAREA ACTIVITĂȚII LIPAZEI Lipaza face parte din clasa hidrolazelor, grupa esterazelor, ele catalizează descompunerea legăturilor esterice dintre glicerină și acizii grași din
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
în timp de o oră în condițiile de lucru date. în care: T - cantitatea de tirozină luată din curba etalon, în µg; 5 - diluția preparatului enzimatic, conform modului de lucru; C - volumul de preparat enzimatic în ml, sau cantitatea de preparat enzimatic în grame ce se găsește în C ml. X.4. DETERMINAREA ACTIVITĂȚII LIPAZEI Lipaza face parte din clasa hidrolazelor, grupa esterazelor, ele catalizează descompunerea legăturilor esterice dintre glicerină și acizii grași din lipide, după schema: Lipazele sunt foarte răspândite
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
este de 7,5 - 7,8, al celei stomacale 1,8 - 2,5, iar al lipazei vegetale este de 4,0 - 5,0. Principiul metodei Activitatea lipazei se determină prin măsurarea creșterii acidității unor lipide ca urmare a acțiunii unui preparat enzimatic obținut din semințe oleaginoase. Substratul ideal pentru studiul activității lipazei dintr-un material oarecare sunt lipidele provenite din același material. Totuși, în calitate de substrat al activității lipazei se pot folosi și alte lipide de diferite proveniențe. Reactivi tampon acetat, pH
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
de diferite proveniențe. Reactivi tampon acetat, pH = 4,7; ulei rafinat; hidroxid de sodiu sau potasiu, soluție 0,01 N; fenolftaleină, soluție alcoolică 1 %; hidroxid de sodiu sau potasiu, soluție 0,01 N; alcool etilic 96 %; eter de petrol. Obținerea preparatului enzimatic într-un vas de sticlă prevăzut cu dop, se amestecă o parte semințe de ricin sau soia fin mărunțite, cu două părți eter. Se lasă pentru extracția uleiului timp de 2-3 ore agitând periodic. Se separă eterul și se
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
ține la termostat și se titrază imediat cu KOH sau NaOH 0,01 N. Mod de calcul Activitatea lipazei se exprimă prin numărul de micromoli de acizi grași reprezentați de acid oleic, ce se formează în urma acțiunii unui gram de preparat enzimatic într-un minut. (V în care: V - volumul de hidroxid de sodiu 0,01 N folosit la titrarea probei în care a acționat enzima (corespunzător acizilor grași eliberați de enzimă și celor existenți în substrat), în ml; Vm volumul
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
0,01 N folosit la titrarea probei martor (corespunzător acizilor grași eliberați de enzimă și celor existenți în substrat), în ml; 0,00282 - titrul hidroxidului de sodiu în raport cu acidul oleic; 282·10 - 1 micromol de acid oleic; G - cantitatea de preparat enzimatic luat în analiză, în g sau ml; t - timpul de termostatare, în minute. PROBA PRACTICĂ Se cere determinarea activității enzimelor din următoarele probe de analiză conform tabelului e CAPITOLUL XI VITAMINELE DIN SUBSTRATURILE ALIMENTARE Vitaminele sunt compuși chimici de
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
în mg /100 g. XI.2.2. Dozarea vitaminei A Principiul metodei Determinarea se bazează pe proprietatea vitaminei A de a absorbi lumina la λ= 328 nm. Reactivi și aparatură cloroform; spectrofotometru. Obs: Reactivii utilizați trebuie să fie puri, iar preparatele să fie proaspete. Mod de lucru Se cîntăresc la balanța analitică 0,1-1,0 g probă de concentrat de vitamina A, care se trec cu cloroformul într-un balon cotat de 50 ml sau 100 ml. Se aduce conținutul balonului
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]
-
ziua utilizării, se păstrază în sticle de culoare închisă; KOH 30 %; H2SO4 0,1 N; alcool izoamalic (pentru eliminarea flurescenței la 1 l alcool se adaugă 2 lingurițe de cărbune animal și se filtrează); CH3COONa 2,5 M, care conține preparat enzimatic de fosfataza. Miceliul de Penicillium se usucă la 45 C, se lasă cu acetat de sodiu timp de 2 3 ore (10 mg miceliu la 1 ml acetat) și apoi extractul se filtrează; soluție standard de tiamină: 10 mg
Chimia alimentelor. Analiza substraturilor alimentare by Lucia Carmen Trincă, Adina Mirela Căpraru () [Corola-publishinghouse/Science/430_a_1254]