850 matches
-
g K(2)HPO(4) 1 g NaCl 5 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă și se dozează câte 6 ml în eprubete de 16x100 mm. Se sterilizează prin autoclavare la 115°C timp de 10 de minute. Se inoculează. La gura eprubetei, în mod aseptic, se pune o hârtie de acetat de plumb (Merck 9511). Se fixează cu capacul. Se incubează timp de maximum douăzeci de zile. Reacție pozitivă: Producerea H(2)S din tripton este indicată prin colorarea
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
1959) Mediu: Amestec nutritiv bacto difco 8 g NaCl 70 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se dozează câte 6 ml în eprubete. Se sterilizează prin autoclavare la 121°C timp de 15 de minute. Se inoculează și se incubează la 37°C. Reacție pozitivă: Se urmărește creșterea. - Creșterea în clorură de sodiu 7% (Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv difco bacto 8 g NaCl 70 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se dozează
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
30 de minute. - Hidroliza amidonului Mediu: Agar nutritiv bacto difco (topit) 1 litru Amidon solubil bacto difco (nr. 0178) 2 g Se amestecă și se sterilizează prin autoclavare la 115°C timp de 10 minute. Se toarnă în vase. Se inoculează vasele în spoturi. Dacă se constată o creștere bună (10 până la 20 de zile), se prelevează o parte din produs și se imersează în iod Lugol. Reacție pozitivă: Hidroliza amidonului este indicată prin zone limpezi, sub sau în jurul creșterii bacteriene
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
douăsprezece sau douăzeci și patru de cupule. Se pot utiliza alte descendențe celulare cu o eficacitate și sensibilitate confirmate pentru izolarea virusului AIS, ținând seama de variabilitatea sușei și de capacitatea diverselor sușe de a se reproduce în descendențe celulare diferite. Se inoculează o suspensie de organe tratată cu antiser, în culturi celulare tinere, în fază de creștere activă, în scopul obținerii unei diluții finale a materialului tisular, într-un mediu de cultură de 1: 1 000. La fiecare suspensie de organe, se
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
riscul contaminării încrucișate, se recomandă utilizarea unor lame separate, cu douăsprezece sau douăzeci și patru de cupule, în cazul eșantioanelor care provin din situri de acvacultură diferite. III.2.2. Se păstrează o lamă neinoculată care va servi ca martor negativ. Se inoculează o altă lamă cu un izolat de referință al virusului AIS, care va servi ca martor pozitiv și se procedează în felul următor: se inoculează 100 μl dintr-un preparat mamă al virusului AIS (concentrație minimă: 107 TCID50 pe ml
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
III.2.2. Se păstrează o lamă neinoculată care va servi ca martor negativ. Se inoculează o altă lamă cu un izolat de referință al virusului AIS, care va servi ca martor pozitiv și se procedează în felul următor: se inoculează 100 μl dintr-un preparat mamă al virusului AIS (concentrație minimă: 107 TCID50 pe ml) în prima cupulă și se amestecă bine. Se transferă un volum din această materie din prima în a doua cupulă pentru a se obține o
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
timp de 30 de minute, la o temperatură de 0-6 șC și se filtrează suspensia la 0,22 μm. În cazul în care contaminarea bacteriană are loc în cursul fazei de subcultură, suspensia se filtrează la 0,22 μm, se inoculează unor celule proaspete și se lasă la incubat o nouă perioadă de patrusprezece până la optsprezece zile. III.6. Teste de identificare a virusului În cazul depistării unui ECP, indiferent de stadiu sau în cazul unui test de hemadsorbție pozitiv, se
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
Diclorura de sulf (CAS 10545-99-0); 54. Clorura de 2-cloroetildiizopropilamoniu (CAS 4261-68-1). S-1C351 Agenți patogeni umani, zoonoze și toxine: a. Viruși (care pot fi naturali, cu rezistență crescută sau modificați sub formă de "culturi vii izolate" ori material, inclusiv material viu inoculat deliberat sau contaminat cu aceste culturi), după cum urmează: 1. Virusul Chikungunya; 2. Virusul febrei hemoragice Crimeea-Congo; 3. Virusul febrei Denga; 4. Virusul encefalitei cabaline din Est; 5. Virusul Ebola; 6. Virusul Hantaan; 7. Virusul Junin; 8. Virusul febrei Lassa; 9
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
17. Virusul encefalitei cabaline din Vest; 18. Virusul variolei albe; 19. Virusul febrei galbene; 20. Virusul encefalitei japoneze; b. Rickettsii (care pot fi naturali, cu rezistență crescută sau modificați, sub formă de "culturi vii izolate" ori material, inclusiv material viu inoculat deliberat sau contaminat cu aceste culturi), după cum urmează: 1. Coxiella burnetii; 2. Bartonella quintana (Rochalimaea quintana, Rickettsia quintana); 3. Rickettsia prowasecki; 4. Rickettsia rickettsii; c. Bacterii (care pot fi naturale, cu rezistență crescută sau modificate, sub formă de "culturi vii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
după cum urmează: 1. Coxiella burnetii; 2. Bartonella quintana (Rochalimaea quintana, Rickettsia quintana); 3. Rickettsia prowasecki; 4. Rickettsia rickettsii; c. Bacterii (care pot fi naturale, cu rezistență crescută sau modificate, sub formă de "culturi vii izolate" ori material, inclusiv material viu inoculat deliberat sau contaminat prin aceste culturi), după cum urmează: 1. Bacillus anthracis; 2. Brucella abortus; 3. Brucella melitensis; 4. Brucella suiș; 5. Chlamydia psyttaci; 6. Clostridium botulinum; 7. Francisella tularensis; 8. Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei); 9. Burkholderia pseudomallei (Pseudomonas pseudomallei); 10
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
Microcystine (Cyanginosine); 11. Aflatoxine. Notă: S-1C351 nu supune controlului "vaccinuri" sau "imunotoxine". ----- S-1C352 Agenți patogeni animali, după cum urmează: a. Viruși (care pot fi naturali, cu rezistență crescută sau modificați, sub formă de "culturi vii izolate" ori material, inclusiv material viu inoculat deliberat sau contaminat cu aceste culturi), după cum urmează: 1. Virusul febrei porcine africane; 2. Virusul gripei aviare, care sunt: a. Necaracterizați; sau b. Cei definiți prin Directivă 92/40/CCE (JO nr. L 16 din 23.01.1992, pag. 19
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
porcului); 12. Virusul pestei bovine; 13. Virusul variolei ovine; 14. Virusul maladiei Teschen; 15. Virusul stomatitei veziculare; b. Micoplasme micoide (care pot fi naturale, cu rezistență crescută sau modificate, sub formă de "culturi vii izolate" sau material, inclusiv material viu inoculat deliberat sau contaminat cu aceste culturi). Notă: S-1C352 nu supune controlului "vaccinurile". ----- S-1C353 "Microorganisme" modificate genetic, după cum urmează: a. "Microorganisme" modificate genetic sau elemente genetice care conțin secvențe de acid nucleic asociate caracterului patogen al organismelor supuse controlului prin S-1C351
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
supuse controlului prin S-1C351.a. sau a "subunităților de toxine". S-1C354 Agenți patogeni proveniți din vegetale, după cum urmează: a. Bacterii, care pot fi naturale, cu rezistență crescută sau modificate, sub formă de "culturi vii izolate" ori material care a fost inoculat deliberat sau contaminat cu aceste culturi, după cum urmează: 1. Xantomonas albilineans; 2. Xantomonas campestris pv. citri, inclusiv ramurile ulterioare desemnate prin Xantomonas campestris pv. citri de tip A, B, C, D, E sau clasificate ca fiind Xantomonas citri, Xantomonas campestris
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
C, D, E sau clasificate ca fiind Xantomonas citri, Xantomonas campestris pv. aurantifolia sau Xantomonas campestris pv. citrumelo; b. Ciuperci, care pot fi naturale, cu rezistență crescută sau modificate, sub formă de "culturi vii izolate" ori material care a fost inoculat deliberat sau contaminat cu asemenea culturi, după cum urmează: 1. Colletotrichum coffeanum văr. virulans (Colletrotrichum kahawae); 2. Cochliobolus miyabeanus (Helminthosporium oryzae); 3. Microcyclus ulei (syn. Dothidella ulei); 4. Puccinia graminis (syn. Puccinia graminis F. sp. tritici); 5. Puccinia striiformis (syn. Puccinia
EUR-Lex () [Corola-website/Law/140281_a_141610]
-
celulare etc.) care împiedică inocularea celulelor în cele 48 de ore de la colectarea probelor de țesuturi, se poate congela lichidul de suprafață la - 80°C și se poate efectua un examen virusologic în decurs de patrusprezece zile. Inainte de a inocula celulele, se amestecă lichidul de suprafață în proporție egală cu un amestec de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI, diluate corespunzător, și se incubează astfel cel puțin timp de o oră la 15°C sau cel mult timp de
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
de o oră la 15°C sau cel mult timp de 18 ore la 4°C. Proporția de antiser trebuie să fie de cel puțin 1/2 000 într-un test de neutralizare pe porțiuni la 50%. Tratamentul tuturor celulelor inoculate cu un ser antiviral NPI (virus care, în anumite regiuni ale Europei, este prezent în 50% din eșantioanele de pești) are ca scop împiedicarea apariției în culturile celulare inoculate a unui ECP rezultând din virusul NPI. Acest tratament permite reducerea
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
reducerea duratei examenelor virusologice ca și numărul de cazuri în care apariția unui ECP trebuie considerată ca un semn potențial al prezenței SHV sau NHI. Atunci când probele provin din unități de producție considerate ca nefiind atinse de NPI, tratamentul celulelor inoculate cu ser antiviral NPI poate fi omis. III. Examen virusologic 1. Culturi celulare și medii Celule BF-2 sau RTG-2 și EPC sau FHM sunt cultivate la temperaturi de la 20 la 30°C într-un mediu adecvat, de pildă un mediu
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
0,2. Culturile celulare care se folosesc pentru inoculare cu țesuturi trebuie să fie de preferință tinere (de patru până la 48 de ore) și aflate în faza de creștere activă (non confluentă) în momentul inoculării. 2. Inocularea culturilor celulare Se inoculează o suspensie de organe tratată cu antibiotice în culturile celulare la două diluții: diluția inițială și o diluție a acesteia la 1:10, ajungându-se respectiv la diluții finale ale materialului tisular într-un mediu de culturi celulare la 1
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
unei cupule într-o placă celulară cu 24 de cupule. Se recomandă utilizarea plăcilor de cultură celulară, dar se admit și alte suporturi care prezintă o suprafață de creștere similară sau superioară. 3. Incubarea culturilor celulare Se incubează culturile celulare inoculate la 15°C timp de șapte până la zece zile. In cazul în care culoarea mediului de cultură celulară se modifică de la roșu la galben, indicând o acidifiere a mediului, se ajustează pH-ul cu ajutorul unei soluții sterile de bicarbonat sau
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
celulară similară cu cea a culturii primare. Părți alicote din mediu (lichid de suprafață) provenind de la toate culturile/cupulele care constituie cultura primară se reunesc, în funcție de cultura de celule, la șapte sau zece zile de la inoculare. Amestecurile respective sunt apoi inoculate în culturile celulare omoloage, nediluate și diluate la 1:10 (dând diluții finale ale lichidului de suprafață de respectiv 1:10 și 1:100), după descrierea din partea I III 2. Se pot de asemenea inocula părți alicote de 10% din
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
inoculare. Amestecurile respective sunt apoi inoculate în culturile celulare omoloage, nediluate și diluate la 1:10 (dând diluții finale ale lichidului de suprafață de respectiv 1:10 și 1:100), după descrierea din partea I III 2. Se pot de asemenea inocula părți alicote de 10% din mediul care constituie cultura primară direct într-o cupulă cu culturi celulare proaspete (sub-culturi de cupulă la cupulă). Inocularea poate fi precedată de o preincubare a diluțiilor cu antiser împotriva virusului NPI la o diluție
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - grup de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - mediu de cultură singur (control pozitiv). Pentru fiecare din amestecurile de suprafață viral-ser, se inoculează cel puțin două culturi celulare cu 50 de μl de amestec de lichid de suprafață și de ser și se incubează la 15°C. Se controlează apariția unui ECP în conformitate cu partea I III 4. Anumite tulpini ale virusului SHV nu
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
pot folosi și alte tulpini celulare, ca BF-2, RTG-2 sau FHM. Atunci când celulele s-au depus pe suprafața de sticlă (aproximativ la o oră după însămânțare) sau atunci când aceste culturi au fost incubate timp de 24 de ore maximum, se inoculează virusul care trebuie identificat. Se inoculează patru culturi cu un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi cu un raport de 1:1000. Acestea se incubează apoi la 15°C timp de 20 - 30 de ore. După
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
ca BF-2, RTG-2 sau FHM. Atunci când celulele s-au depus pe suprafața de sticlă (aproximativ la o oră după însămânțare) sau atunci când aceste culturi au fost incubate timp de 24 de ore maximum, se inoculează virusul care trebuie identificat. Se inoculează patru culturi cu un raport volum la volum de 1:10 și patru culturi cu un raport de 1:1000. Acestea se incubează apoi la 15°C timp de 20 - 30 de ore. După incubare, se clătesc de două ori
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
strat de reactiv se compune din anticorpi poli- sau monoclonali de referință de calitate. Al doilea reactiv este un antiser combinat cu fluorcrom preparat împotriva imunoglobulinelor din primul ser. Pentru fiecare dintre antiserurile testate, se folosesc cel puțin o cultură inoculată în doză ridicată și o cultură inoculată în doză slabă. Se includ în test martori negativi și pozitivi corespunzători. Se recomandă tipuri de fluorcrom precum FITC sau TRITC. Se montează lamele de cultură folosindu-se o soluție salină glicerolată. Se
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]