408 matches
-
Notă: Dacă se observă acestea, testul trebuie repetat. Se observă celulele intens fluorescente cu morfologia caracteristică a Ralstonia solanacearum în ferestrele de test. Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a sușei de control pozitiv la aceeași diluție a antiserului. Celulele cu colorație incompletă sau cu fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare, dacă nu sunt în număr mare (vezi interpretarea rezultatului testului IF). Interpretarea rezultatului testului IF: (i) Dacă nu sunt descoperite celule intens fluorescente cu morfologie caracteristică, atunci
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
este considerat pozitiv, - pentru eșantioane cu N < 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat testul IF poate fi considerat pozitiv, (iii) dacă se observă un număr mare (>105 celule pe ml) de celule incomplet sau slab fluorescente în titrul antiserului, trebuie efectuat un al doilea test: - un test bazat pe un principiu biologic diferit sau - o repetare a testului IF, cu un al doilea antiser sau cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
un număr mare (>105 celule pe ml) de celule incomplet sau slab fluorescente în titrul antiserului, trebuie efectuat un al doilea test: - un test bazat pe un principiu biologic diferit sau - o repetare a testului IF, cu un al doilea antiser sau cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza Robinson - Smith et al., 1995 Se folosește antiser pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul suspensiei de 106 celule pe ml
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
test bazat pe un principiu biologic diferit sau - o repetare a testului IF, cu un al doilea antiser sau cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza Robinson - Smith et al., 1995 Se folosește antiser pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul suspensiei de 106 celule pe ml din sușa omologă de Ralstonia solanacearum. Se recomandă folosirea plăcilor de microtritrare NUNC - Polysorb. Se include un extract de cartof de control negativ
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
noapte la 4 șC. 3.4. Se scot extractele din puțuri. Se spală puțurile de trei ori cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsând ultima soluție de spălare cel puțin cinci minute în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
în puțuri. 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se aplică 100 μl de diluție de antiser în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC. 3.6. Se scoate antiserul din puțuri. Se spală ca mai înainte (3.4). 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat de fosfatază alcalină în tampon de blocare. Se aplică 100 μl de diluție conjugată în puțuri. Se incubează o oră la 37 șC.
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121°C timp de 15 minute. Apendicele 3 Materiale pentru testul IF Tampon IF: 10 mM salin tamponat fosfatic (PBS) pH 7,2 Acest tampon este utilizat pentru diluarea antiserurilor. Na2HPO4·12H2O 2,7 g NaH2PO4·2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
decât produsul. Totuși, materialele încadrate la aceeași poziție tarifară pot fi folosite cu condiția ca valoarea lor să nu depășească 20% din prețul de uzină al produsului 3002 Sânge uman; sânge animal pregătit pentru utilizări terapeutice, profilactice sau de diagnosticare; antiseruri și alte fracțiuni sanguine; vaccinuri, toxine, culturi de micro-organisme (cu excepția fermenților) și produse similare: - Produse constând din doi sau mai mulți constituenți care au fost amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate sau în forme sau pachete pentru vânzarea en detail - Altele: - Sânge uman - Sânge animal pregătit pentru uz terapeutic sau profilactic - Fracțiuni de sânge, altele decât antiseruri, hemoglobină și globulină ser - Hemoglobină, globulină sanguină și globulină ser - Altele Fabricare din materiale de la orice poziție tarifară, inclusiv alte materiale de la poziția tarifară nr. 3002. Materialele menționate în coloana alăturată pot fi de asemenea folosite cu condiția ca valoarea
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
decât produsul. Totuși, materialele încadrate în aceeași poziție tarifară pot fi folosite cu condiția ca valoarea lor să nu depășească 20% din prețul de uzină al produsului 3002 Sânge uman; sânge animal pregătit pentru utilizări terapeutice, profilactice sau de diagnosticare; antiseruri și alte fracțiuni sanguine; vaccinuri, toxine, culturi de micro-organisme (cu excepția fermenților) și produse similare: - Produse constând din doi sau mai mulți constituenți care au fost amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate sau în forme sau pachete pentru vânzarea en detail - Altele: - Sânge uman - Sânge animal pregătit pentru uz terapeutic sau profilactic - Fracțiuni de sânge, altele decât antiseruri, hemoglobină și globulină ser - Hemoglobină, globulină sanguină și globulină ser - Altele Fabricare din materiale de la orice poziție tarifară, inclusiv alte materiale de la poziția tarifară nr. 3002. Materialele ce corespund acestei descrieri pot fi de asemenea folosite cu condiția ca valoarea
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
decât produsul. Totuși, materialele încadrate în aceeași poziție tarifară pot fi folosite cu condiția ca valoarea lor să nu depășească 20% din prețul de uzină al produsului 3002 Sânge uman; sânge animal pregătit pentru utilizări terapeutice, profilactice sau de diagnosticare; antiseruri și alte fracțiuni sanguine; vaccinuri, toxine, culturi de micro-organisme (cu excepția fermenților) și produse similare: - Produse constând din doi sau mai mulți constituenți care au fost amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
amestecați pentru utilizări terapeutice sau profilactice sau produse neamestecate pentru aceste utilizări, în doze măsurate sau în forme sau pachete pentru vânzarea en detail - Altele: - Sânge uman - Sânge animal pregătit pentru uz terapeutic sau profilactic - Fracțiuni de sânge, altele decât antiseruri, hemoglobină și globulină ser - Hemoglobină, globulină sanguină și globulină ser - Altele Fabricare din materiale de la orice poziție tarifară, inclusiv alte materiale de la poziția tarifară nr. 3002. Materialele ce corespund acestei descrieri pot fi de asemenea folosite cu condiția ca valoarea
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
1. TEST ELISA DE COMPETIȚIE PENTRU DETECTAREA PREZENȚEI ANTICORPILOR VIRUSULUI PESTEI CABALINE AFRICANE (VPCA) (TEST OBLIGATORIU) Testul ELISA de competiție este utilizat pentru detectarea prezenței anticorpilor specifici ai virusului pestei cabaline africane în serurile provenite de la toate speciile de ecvidee. Antiserul de cobai împotriva VPCA, denumit de aici înainte "antiser de cobai", este un antiser cu spectru larg, policlonal și imun; este specific serogrupului PCA și permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului acestei boli. Principiul testului este o diminuare a
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
VIRUSULUI PESTEI CABALINE AFRICANE (VPCA) (TEST OBLIGATORIU) Testul ELISA de competiție este utilizat pentru detectarea prezenței anticorpilor specifici ai virusului pestei cabaline africane în serurile provenite de la toate speciile de ecvidee. Antiserul de cobai împotriva VPCA, denumit de aici înainte "antiser de cobai", este un antiser cu spectru larg, policlonal și imun; este specific serogrupului PCA și permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului acestei boli. Principiul testului este o diminuare a reacției între antigenul VPCA și un antiser de cobai
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
TEST OBLIGATORIU) Testul ELISA de competiție este utilizat pentru detectarea prezenței anticorpilor specifici ai virusului pestei cabaline africane în serurile provenite de la toate speciile de ecvidee. Antiserul de cobai împotriva VPCA, denumit de aici înainte "antiser de cobai", este un antiser cu spectru larg, policlonal și imun; este specific serogrupului PCA și permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului acestei boli. Principiul testului este o diminuare a reacției între antigenul VPCA și un antiser de cobai pe un eșantion de ser
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
aici înainte "antiser de cobai", este un antiser cu spectru larg, policlonal și imun; este specific serogrupului PCA și permite detectarea tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului acestei boli. Principiul testului este o diminuare a reacției între antigenul VPCA și un antiser de cobai pe un eșantion de ser de testat. Anticorpii VPCA din eșantionul de ser de testat sunt în competiție cu cei ai antiserului de cobai, ceea ce antrenează o reducere a culorii preconizate (după adăugarea unui anticorp anticobai marcat cu
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
ale virusului acestei boli. Principiul testului este o diminuare a reacției între antigenul VPCA și un antiser de cobai pe un eșantion de ser de testat. Anticorpii VPCA din eșantionul de ser de testat sunt în competiție cu cei ai antiserului de cobai, ceea ce antrenează o reducere a culorii preconizate (după adăugarea unui anticorp anticobai marcat cu o enzimă și a substratului). Serurile pot fi testate la o singură diluție de 1/5 (metoda testului punctual) sau pot fi titrate (metoda
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
diluții din 2 în 2 din fiecare eșantion de testat (de la 1/5 la 1/640) într-un tampon de blocare în opt godeuri în fiecare dintre coloanele de la 3 la 12. apoi 1.1.5. Se adaugă 50 µl antiser de cobai, diluat în prealabil într-un tampon de blocare, în toate godeurile, cu excepția godeurilor de CONTROL CU BLANC din placa ELISA (toate godeurile conțin în prezent un volum final de 100 µl). 1.1.5.1. Se incubează timp
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
de țesuturi, se poate congela lichidul de suprafață la - 80°C și se poate efectua un examen virusologic în decurs de patrusprezece zile. Inainte de a inocula celulele, se amestecă lichidul de suprafață în proporție egală cu un amestec de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI, diluate corespunzător, și se incubează astfel cel puțin timp de o oră la 15°C sau cel mult timp de 18 ore la 4°C. Proporția de antiser trebuie să fie de cel puțin
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
proporție egală cu un amestec de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI, diluate corespunzător, și se incubează astfel cel puțin timp de o oră la 15°C sau cel mult timp de 18 ore la 4°C. Proporția de antiser trebuie să fie de cel puțin 1/2 000 într-un test de neutralizare pe porțiuni la 50%. Tratamentul tuturor celulelor inoculate cu un ser antiviral NPI (virus care, în anumite regiuni ale Europei, este prezent în 50% din eșantioanele
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
III 2. Se pot de asemenea inocula părți alicote de 10% din mediul care constituie cultura primară direct într-o cupulă cu culturi celulare proaspete (sub-culturi de cupulă la cupulă). Inocularea poate fi precedată de o preincubare a diluțiilor cu antiser împotriva virusului NPI la o diluție corespunzătoare, după descrierea din partea I II 3. Se incubează apoi culturile inoculate timp de șapte până la zece zile la 15°C, ținându-se cont de dispozițiile din partea I III 4. Dacă se produce un
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - grup de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - mediu de cultură singur (control pozitiv). Pentru fiecare din amestecurile de suprafață viral-ser, se inoculează cel puțin două culturi celulare cu 50 de μl de
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
Eagle's MEM fără ser, se fixează cu o soluție de acetonă înghețată de 80% și se efectuează reacția IF. Primul strat de reactiv se compune din anticorpi poli- sau monoclonali de referință de calitate. Al doilea reactiv este un antiser combinat cu fluorcrom preparat împotriva imunoglobulinelor din primul ser. Pentru fiecare dintre antiserurile testate, se folosesc cel puțin o cultură inoculată în doză ridicată și o cultură inoculată în doză slabă. Se includ în test martori negativi și pozitivi corespunzători
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]