392 matches
-
clătesc cu apă și se spală cu soluție (5.3) timp de cel puțin trei ore la un debit de 0,2 ml pe minut. 8.4.2. Rezultatele analizei cromatografice a probei etalon [E] se obțin sub forma unei cromatograme în care fiecare vârf se identifică după timpul de retenție RT după cum urmează: Vârful II: Al doilea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Vârful III: Al treilea vârf al cromatogramei, corespunzând GMP, cu un RT
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
0,2 ml pe minut. 8.4.2. Rezultatele analizei cromatografice a probei etalon [E] se obțin sub forma unei cromatograme în care fiecare vârf se identifică după timpul de retenție RT după cum urmează: Vârful II: Al doilea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Vârful III: Al treilea vârf al cromatogramei, corespunzând GMP, cu un RT de 15,5 + 1,0 minute. Vârful IV: Al patrulea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
se obțin sub forma unei cromatograme în care fiecare vârf se identifică după timpul de retenție RT după cum urmează: Vârful II: Al doilea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Vârful III: Al treilea vârf al cromatogramei, corespunzând GMP, cu un RT de 15,5 + 1,0 minute. Vârful IV: Al patrulea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Calitatea coloanei poate afecta timpii de retenție ai fiecărui vârf. Integratorul (6.10.6
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
urmează: Vârful II: Al doilea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Vârful III: Al treilea vârf al cromatogramei, corespunzând GMP, cu un RT de 15,5 + 1,0 minute. Vârful IV: Al patrulea vârf al cromatogramei cu un RT de aproximativ 17,5 minute. Calitatea coloanei poate afecta timpii de retenție ai fiecărui vârf. Integratorul (6.10.6) calculează automat suprafața A a fiecărui vârf. AII: suprafața vârfului II, AIII: suprafața vârfului III, AIV: suprafața vârfului
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Calitatea coloanei poate afecta timpii de retenție ai fiecărui vârf. Integratorul (6.10.6) calculează automat suprafața A a fiecărui vârf. AII: suprafața vârfului II, AIII: suprafața vârfului III, AIV: suprafața vârfului IV. Este esențial să se examineze aspectul fiecărei cromatograme înainte de realizarea interpretării cantitative pentru a se detecta orice eventuale anomalii datorate fie funcționării necorespunzătoare a aparatului sau a coloanelor, fie originii sau naturii probei analizate. 8.5. Calibrarea 8.5.1. Probelor standard (5.4) li se aplică exact
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Timp Flux % A % B Curba (minute) (ml/minut) Inițial 1,0 90 10 * 27 1,0 60 40 lin 32 1,0 10 90 lin 37 1,0 10 90 lin 42 1,0 90 10 lin Compararea celor două cromatograme trebuie să indice poziția vârfului (vârful GMPA). Cu ajutorul formulei de mai jos se poate calcula compoziția inițială a solventului care se folosește pentru gradientul normal (vezi 8.4.3) % B = 10 - 2,5 + (13,5 + (RTgmpA - 26) / 6)*30/ 27
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
10). 3. După fiecare cinci probe se injectează proba de referință (5) și se folosește pentru calcularea noului coeficient de răspuns R. (9.1.1). 8.4.4. Rezultatele analizei cromatografice a probei analizate (E) se obțin sub forma unei cromatograme în care vârful GMP este identificat pe baza timpului său de retenție de aproximativ 26 minute. Integratorul (6.40.6) calculează automat înălțimea vârfului H pentru vârful GMP. Se verifică poziția liniei de bază în fiecare cromatogramă. Dacă poziția liniei
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
sub forma unei cromatograme în care vârful GMP este identificat pe baza timpului său de retenție de aproximativ 26 minute. Integratorul (6.40.6) calculează automat înălțimea vârfului H pentru vârful GMP. Se verifică poziția liniei de bază în fiecare cromatogramă. Dacă poziția liniei de bază este incorectă, analiza sau integrarea se repetă. Este extrem de important să se examineze aspectul fiecărei cromatograme înainte de interpretarea cantitativă pentru a se detecta orice eventuale anomalii datorate fie funcționării necorespunzătoare a aparatului sau a coloanelor
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
6.40.6) calculează automat înălțimea vârfului H pentru vârful GMP. Se verifică poziția liniei de bază în fiecare cromatogramă. Dacă poziția liniei de bază este incorectă, analiza sau integrarea se repetă. Este extrem de important să se examineze aspectul fiecărei cromatograme înainte de interpretarea cantitativă pentru a se detecta orice eventuale anomalii datorate fie funcționării necorespunzătoare a aparatului sau a coloanelor, fie originii sau naturii probei analizate. Dacă există dubii, analiza se repetă. 8.5. Calibrarea 8.5.1. Se aplică cu
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
24 ore. Pentru seriile lungi de analize este de preferabil ca în injectorul automat să se folosească o tavă răcită pentru probe . Observație 8.4.2 se poate omite dacă se cunoaște % B în condițiile inițiale din analizele efectuate anterior. Cromatograma probei de referință (5) trebuie să fie similară cu cea din Figura 1. În această figură vârful GMPA este precedat de două vârfuri mici. Este extrem de important să se obțină o separare similară. 8.5.2. Înainte de determinarea cromatografică a
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
este precedat de două vârfuri mici. Este extrem de important să se obțină o separare similară. 8.5.2. Înainte de determinarea cromatografică a probei se injectează 100 μl din proba etalon care nu conține zer închegat (0) (5.4.1). Pe cromatogramă nu trebuie să apară un vârf pentru timpul de retenție al vârfului GMPA. 8.5.3. Coeficientul de răspuns R se determină prin injectarea aceluiași volum de filtrat (8.5.1) ca cel folosit pentru probe. 9. Exprimarea rezultatelor 9
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
racordul injectorului fără a se dezasambla coloana. Este absolut necesar să se evite îndoirea vârfului acului provocată de atingerea fundului paharului conținând proba (chiar dacă este greu de observat cu ochiul liber) pentru a nu se distruge peretele despărțitor. Figura 4 Cromatograma trigliceridică a unei probe de grăsime din lapte (a) rezoluție slabă din cauza distrugerii peretelui despărțitor (b) rezoluție bună 6.5.3. Condiționarea coloanei acoperite Pe parcursul etapelor (a) - (c) partea de sus a coloanei nu se conectează la detector pentru a
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
Integrarea, evaluarea și controlul condițiilor de măsurare Trigliceridele cu număr acil-c impar (2n +1) se combină cu trigliceridele anterioare cu număr par (2n). Conținuturile mici mai puțin reproductibile de C56 nu se iau în considerare. Restul trigliceridelor (suprafața vârfului) din cromatogramă, inclusiv colesterolul (suprafața vârfului apropiat de C24) se înmulțesc cu coeficienții de răspuns corespunzători ai grăsimii standard (de la ultima calibrare) și se normalizează global la 100. Astfel se evaluează pe lângă colesterolul liber și trigliceridele C24, C26, C28, C30, C32, C34
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
global la 100. Astfel se evaluează pe lângă colesterolul liber și trigliceridele C24, C26, C28, C30, C32, C34, C36, C38, C40, C42, C44, C46, C48, C50, C52 și C54. Rezultatele se exprimă în % de masă (g/100 g). Evaluarea vârfurilor de pe cromatogramă se realizează cu ajutorul unui integrator care permite reprezentarea liniei de bază. Trebuie să se poată realiza o reintegrare cu parametri de integrare optimizați. În figurile 5 și 6 sunt prezentate două exemple de cromatograme trigliceridice. În figura 5 este prezentată
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
g/100 g). Evaluarea vârfurilor de pe cromatogramă se realizează cu ajutorul unui integrator care permite reprezentarea liniei de bază. Trebuie să se poată realiza o reintegrare cu parametri de integrare optimizați. În figurile 5 și 6 sunt prezentate două exemple de cromatograme trigliceridice. În figura 5 este prezentată o cromatogramă care poate fi bine evaluată, în timp ce în figura 6 există o eroare sporadică în gama C50 - C54, linia de bază fiind incorectă în comparație cu cea din figura 5. Astfel de erori tipice pot
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
realizează cu ajutorul unui integrator care permite reprezentarea liniei de bază. Trebuie să se poată realiza o reintegrare cu parametri de integrare optimizați. În figurile 5 și 6 sunt prezentate două exemple de cromatograme trigliceridice. În figura 5 este prezentată o cromatogramă care poate fi bine evaluată, în timp ce în figura 6 există o eroare sporadică în gama C50 - C54, linia de bază fiind incorectă în comparație cu cea din figura 5. Astfel de erori tipice pot fi detectate cu un grad înalt de precizie
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
C54, linia de bază fiind incorectă în comparație cu cea din figura 5. Astfel de erori tipice pot fi detectate cu un grad înalt de precizie și evitate numai prin folosirea unui integrator cu ajutorul căruia se reprezintă linia de bază. Figura 5 Cromatogramă trigliceridică a grăsimii din lapte cu linie de bază trasată care poate fi evaluată ușor Figura 6 Cromatogramă a grăsimii din lapte integrată greșit integrare greșită Pentru controlarea condițiilor de măsurare se pot folosi deviațiile standard relative (DSR: coeficient de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
cu un grad înalt de precizie și evitate numai prin folosirea unui integrator cu ajutorul căruia se reprezintă linia de bază. Figura 5 Cromatogramă trigliceridică a grăsimii din lapte cu linie de bază trasată care poate fi evaluată ușor Figura 6 Cromatogramă a grăsimii din lapte integrată greșit integrare greșită Pentru controlarea condițiilor de măsurare se pot folosi deviațiile standard relative (DSR: coeficient de variație x 100) din tabelul 1 pentru diferite trigliceride. Acestea au fost calculate în cadrul a 19 analize consecutive
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
tratare a datelor, cu condiția ca datele să poată fi verificate cu ajutorul principiilor descrise în metoda menționată în continuare. Se măsoară fiecare platou sau vârf de maxim pentru congener și vârfurile standardului intern. 9.1. Calcularea factorului de răspuns. Din cromatograma injectării de soluție standard C (5.14.3), se calculează factorii de răspuns pentru fiecare congener folosind ecuația (1). unde: IS = Standard intern Conc. Congener = concentrația de congener în soluția C (5.14.3) Conc. IS = concentrația standardului intern în
jrc4880as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90048_a_90835]
-
UV. Când nivelul solventului a urcat până la 15 - 20 cm (aprox. 1 oră 30 minute), se oprește cromatografia și se usucă hârtia. 7.2 Detectarea prin lumină UV Dacă nivelul antibioticului este mai mare de 1 μg per cm2, după ce cromatograma a fost tratată cu vapori de amoniac (3.7) sunt observate iradiații fluorescente galbene auriu sub lumină UV (4.4). 7.3 Detectarea prin bioautografie Se toarnă mediul de cultură (3.10), anterior inoculat cu B cereus (3.9), într-
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
loc din mediul de cultură, unde rămâne în timpul perioadei de incubație. Se incubează apoi peste noapte la 30ș C. Dacă un antibiotic din grupul tetraciclină este prezent, apar zone de inhibiție slabe în mediul neclar de cultură. Pentru a fixa cromatograma, soluția (3.11) este vaporizată pe hârtie, după incubație. 7.4 Identificare Valorile relative Rf ale antibioticelor din grupul tetraciclinei sunt date mai jos. Aceste valori pot varia ușor în funcție de calitatea hârtiei și conținutul de umiditate: Clorotetraciclină(CTC) 0,60
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de testare și compușii de referință trebuie să fie solubili în faza mobilă într-o concentrație suficientă pentru a permite detectarea lor. Numai în cazuri excepționale pot fi folosiți aditivi împreună cu amestecul metanol-apă, deoarece aditivii vor schimba proprietățile coloanei. Pentru cromatograme cu aditivi este obligatoriu să se folosească o coloană separată de același tip. Dacă amestecul metanol-apă nu este corespunzător, pot fi folosite alte amestecuri solvent organic-apă, de exemplu etanol-apă sau acetonitril-apă. pH-ul eluentului este un factor critic pentru compușii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
25ș Brix), preparată conform descrierii din capitolul "pH-ul vinului și mustului" punctul 4.1.2 și diluată cu apă la un sfert din concentrație prin completarea cu apă într-un balon cotat de 100 ml. 2.3.2. Obținerea cromatogramei Pe o linie paralelă, la 2,5 cm de marginea de jos a plăcii, se depun: - 10 µl de probă, - 10 µl de standard. Placa se așează în cuva saturată în prealabil cu vapori din faza mobilă. Se permite migrarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
45 µm. 3.3.2. Determinarea cromatografică Se injectează în cromatograf, pe rând, 10 µl de soluție standard și 10 µl de probă preparată conform descrierii de la punctul 3.3.1. Aceste injectări se repetă în aceeași ordine. Se înregistrează cromatograma. Timpul de retenție al zaharozei este aproximativ zece minute. 3.4. Calculare Pentru calcule se utilizează media celor două rezultate pentru soluția standard și pentru probă. 3.4.1. Pentru vinuri și must: se calculează concentrația în g/l. 3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ml de eter etilic (punctul 3.1.1). Se extrage acidul sorbic în faza organică prin scuturarea tubului timp de 5 minute. Se lasă să se așeze. 3.3.2. Pregătirea soluției de referință Se selectează un vin pentru care cromatograma extractului cu eter nu arată nici un vârf corespunzător eluției acidului sorbic. Vinul este supraîncărcat cu acid sorbic cu o concentrație de 100 mg/l. Se tratează 20 de ml din proba astfel preparată conform procedurii de la punctul 3.3.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]