2,287 matches
-
caracterizate prin expresia lor preferențială în tumori. Antigenele asociate tumorilor au fost folosite ca ținte pentru inducția răspunsului imun, cu specificitate tumorală. Răspunsul imun antitumoral poate fi generat direct față de tumoră, dacă celulele tumorale exprimă antigene specific tumorale. Situsul expresiei genice poate fi controlat prin introducerea unor regiuni promotoare cu specificitate tumorală într-un ADN plasmidic, sau prin conjugarea ADN cu proteine care interacționează cu receptorii de suprafață, specifici tumorilor. Pe această cale, se asigură expresia genei injectate, cum ar fi
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
inductor al sintezei anticorpilor anti-idiotipici. SV40 (virusul simian 40) induce transformarea celulelor în cultură și formarea tumorilor la șoareci. Imunizarea șoarecilor cu celule transformate cu SV40, sau cu antigenul T mare al lui SV40, Cap. 32. Vaccinarea genetică și terapia genică în tratamentul cancerului și al altor boli cu etiologie virală 510 asigură protecția față de transplantul celulelor tumorale viabile (Tevethia și colab., 1980; Bright și colab., 1994). Imunizarea intramusculară, intraperitoneală sau subcutanată a șoarecilor BALB/c cu ADN plasmidic care conține
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
stimulat expresia β-galactozidazei în melanoamele B16 la șoarecii singenici, nu însă și în tumorile Colo 26. Aceste experiențe au evidențiat capacitatea de stimulare directă și specifică a expresiei genelor la situsul tumoral și oferă o strategie de limitare a expresiei genice în celulele tumorale. Această tehnologie ar putea produce un vaccin ADN care să codifice pentru o proteină toxică, exprimată numai în celulele tumorale, eliminând inconvenientul distrugerii celulelor sănătoase, așa cum se întâmplă în tratamentele radio- sau chimioterapice antitumorale actuale. Într-un
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
inoculare directă a vaccinurilor ADN în pacienții neoplazici, aceasta realizându-se până acum, în special la cei aflați în stadii avansate sau la cei rezistenți la terapia tradițională. Cercetările lui S.A. Rosenberg (1985-1996) au fost deschizătoare de drum în terapia genică. Testele clinice timpurii au demonstrat că incubarea ex vivo a limfocitelor pacientului neoplazic cu IL-2, activează o populație de limfocite care poate distruge celulele tumorale rezistente la celulele natural killer (NK), dar nu și celulele normale (Mule și colab., 1984
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Vaccinarea ADN oferă multiple avantaje pentru terapia sau profilaxia neoplaziilor. Vectorul plasmidic nu este antigenic în sine, și nu are potențial patogen, în contrast cu alți vectori virali de vaccinare (adenovirusurile, retrovirusurile sau poxvirusurile). În plus, ADN plasmidic oferă posibilitatea unei expresii genice intracelulare prelungite. Persistența îndelungată a ADN plasmidic în mușchiul scheletic vaccinat permite realizarea unei stimulări imune continue și dobândirea unei imunități durabile. Expresia endogenă a antigenei oferă avantajul de prezentare a antigenei CMH clasa I care favorizează răspunsul CTL antitumorale
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
tumoral. Pentru utilizarea eficientă a vaccinurilor ADN este necesară realizarea unor cercetări complexe, suplimentare, întrucât se cunosc prea puțin mecanismele prin care sistemul imunitar este stimulat să producă anticorpi sau CTL cu specificitate tumorală, după vaccinarea ADN. Tehnicile de terapie genică necesită un eveniment de infecție cu un virus nepatogen, manipulat genetic, pentru a se realiza transducția genei de interes, în organismul afectat de o tară ereditară. Teoretic, astfel de tehnici mimează o infecție virală abortivă, prin aceea că secvențele genice
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
genică necesită un eveniment de infecție cu un virus nepatogen, manipulat genetic, pentru a se realiza transducția genei de interes, în organismul afectat de o tară ereditară. Teoretic, astfel de tehnici mimează o infecție virală abortivă, prin aceea că secvențele genice introduse codifică pentru sinteza unui antigen exogen care poate să fie prezentat de sistemele moleculare CMH I și CMH II. Vaccinarea ADN a fost aplicată și în controlul malariei (Doolan și colab., 1998), utilizându-se un vaccin ADN PyCSP care
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și colaboratorii (1998) au semnificație clinică importantă pentru imunoterapia purtătorilor cronici de HBV. Rezultatele arată că vaccinurile ADN pot fi utilizate pentru imunizarea profilactică și terapeutică față de HBV. Este de dorit să se realizeze optimizarea dozelor și creșterea eficienței transferului genic, ameliorarea nivelului de expresie genică și creșterea răspunsului imun față de antigena exprimată. Se pot utiliza diferite căi de administrare a acestui vaccin ADN: intramusculară, intradermică și pistol-genetic (biolistica), precum și combinații ale acestor căi. De asemenea, se pot utiliza facilități pentru
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
clinică importantă pentru imunoterapia purtătorilor cronici de HBV. Rezultatele arată că vaccinurile ADN pot fi utilizate pentru imunizarea profilactică și terapeutică față de HBV. Este de dorit să se realizeze optimizarea dozelor și creșterea eficienței transferului genic, ameliorarea nivelului de expresie genică și creșterea răspunsului imun față de antigena exprimată. Se pot utiliza diferite căi de administrare a acestui vaccin ADN: intramusculară, intradermică și pistol-genetic (biolistica), precum și combinații ale acestor căi. De asemenea, se pot utiliza facilități pentru ameliorarea transferului genic, coexprimarea antigenei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de expresie genică și creșterea răspunsului imun față de antigena exprimată. Se pot utiliza diferite căi de administrare a acestui vaccin ADN: intramusculară, intradermică și pistol-genetic (biolistica), precum și combinații ale acestor căi. De asemenea, se pot utiliza facilități pentru ameliorarea transferului genic, coexprimarea antigenei cu molecule costimulatoare sau citokine și utilizarea adjuvanților. Vaccinurile ADN sunt utilizate și pentru terapia infecțiilor cu virusurile herpetice. Sunt cel puțin șapte reprezentanți ai familiei care produc infecții la om: HSV-1, HSV-2, citomegalovirusul uman (CMV), virusul varicela-zoster
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
faptul că au fost propuse atât de numeroase mijloace terapeutice în găsirea unei terapii eficiente față de infecția cu HIV-1. Strategii de imunizare vechi și noi pentru prevenirea și terapia infecției HIV-1 se află în prezent în studiu. În plus, terapia genică urmărește întreruperea multiplicării virale, pe calea manipulării ADN, ARNm sau a altor componente celulare. O abordare mai puțin tradițională care poate fi considerată ca o combinație între imunoterapie și terapia genică este vaccinarea cu constructe de acizi nucleici (vaccinuri ADN
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
se află în prezent în studiu. În plus, terapia genică urmărește întreruperea multiplicării virale, pe calea manipulării ADN, ARNm sau a altor componente celulare. O abordare mai puțin tradițională care poate fi considerată ca o combinație între imunoterapie și terapia genică este vaccinarea cu constructe de acizi nucleici (vaccinuri ADN). Teoretic, imunizarea genetică directă mimează aspectele vaccinurilor atenuate, deoarece stimulează deopotrivă compartimentul umoral și pe cel celular al răspunsului imun, evitându-se însă riscurile infecției cu virusul atenuat. Obstacolele majore în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
este esențială pentru menținerea fenotipului tumoral. Cum am putea identifica asemenea kinaze? În două patologii umane tumorale - cancerul de sân și LCM - sunt țintite direct gene pentru două tirozinkinaze diferite și anume: Her-2/neu și, respectiv Bcr-Abl, fie prin amplificare genică, fie prin translocație cromozomală (Press și colab., 1990; Sawyers, 1999). Faptul că fiecare dintre aceste kinaze este țintită la nivel de ADN și că expresia forțată a fiecărei kinaze se realizează în modele murine conducând la fenotip tumoral reprezintă un
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
care nu apar evidente leziunile genetice, incluzând cele ale genelor supresoare de tumori, dar la care este raportată superexpresia țintei kinazice. Este vorba de o mare complexitate a rețelelor reglatoare care în urma unor blocaje se ajunge la modificări ale expresiei genice, dar devine dificil în aceste cazuri să se aprecieze că asemenea tumori depind de o anumită kinază, dacă nu există date privind un anumit răspuns clinic față de un anume inhibitor kinazic. Sawyers (2002) apreciază că aplicarea terapiei anticanceroase cu inhibitori
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
acelor cancere care sunt determinate și menținute de alterarea căii metabolice pentru o anumită kinază. Un asemenea progres poate deriva din măsurătorile asupra activării căii metabolice, prin utilizarea de anticorpi în monitorizarea substratului fosforilării sau din definirea profilelor de expresie genică care poate prezice dependența de calea kinazică. Analiza moleculară a probelor biopsice prelevate de la pacienți va reprezenta viitorul abordării terapiei cancerului uman, prin strategia utilizării inhibitorilor kinazici ca medicamente antitumorale eficiente, dintre care Herceptin și STI-571 și-au dovedit potențialul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
doar după inhibiția completă a activității telomerazice. Koga și colaboratorii săi (2001) apreciază că 2-5A-anti-hTR este un agent terapeutic potențial al cancerului de vezică urinară. 32.4. UTILIZAREA RIBOZIMELOR ȘI A FENOMENULUI DE INTERFERENȚĂ ARN ÎN TERAPIA BOLII CANCEROASE Expresia genică poate fi anulată prin țintirea ARNm specific unei anumite gene, spre a fi distrus. Țintirea se realizează prin utilizarea unui oligoribonucleotid care este complementar cu cel puțin o parte a secvenței ARNm, ceea ce conduce la formarea pe porțiunea respectivă a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
endogene ce corespund transgenei introduse și astfel le inhibă în mod specific expresia (Strachan și Read, 2004). Ribozimele a căror activitate poate fi controlată printr-o modulare alosterică se numesc maxizime și au fost utilizate în inhibiția condițională a expresiei genice (Kuwabara și colab., 2000; Fanzkij și Verma, 2002). Descoperirea capacității ARN antisens de a coopera cu ARN sens în silențierea unor gene endogene a condus la enunțarea principiului cosupresiei (Bahramian și Zabl, 1999) și a fost identificat la plante, bazându
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
buclă (agrafă) de tip hairpin cu o tulpină dublu-catenară de 19-29 perechi de nucleotide, care se potrivește țintei, și o buclă monocatenară de șase-nouă ribonucleotide. În prezent, iARN reprezintă o excelentă unealtă de laborator prin care sunt abolite diferite exprimări genice în fenotipul plantelor și animalelor de experiență, dar sunt speranțe că asemenea „manevre” de laborator vor putea fi aplicate și în anularea efectelor nocive ale anumitor gene mutante la om și în terapia genică a multor boli ereditare umane. Încă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
prin care sunt abolite diferite exprimări genice în fenotipul plantelor și animalelor de experiență, dar sunt speranțe că asemenea „manevre” de laborator vor putea fi aplicate și în anularea efectelor nocive ale anumitor gene mutante la om și în terapia genică a multor boli ereditare umane. Încă din anii 1960, embriologul genetician englez John Gurdon a evidențiat posibilitatea reprogramării celulelor diferențiate la o stare asemănătoare celulelor stem embrionare (ES) ceea ce a condus la formarea unui embrion manipulat care, reimplantat în uter
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
G418. S-a constatat că atunci când a fost realizată transducția cu câte o singură genă-candidat nu s-au format colonii rezistente la compusul chimic, de unde s-a tras concluzia că o singură genă-candidat nu este suficientă spre a activa locusul genic Fbx15. Transducția simultană a tuturor celor 24 gene-candidat a asigurat formarea a 22 colonii rezistente la G418. În cursul procedurii de selecție a acestor colonii dintre cele 12 clone obținute, cinci au prezentat morfologia similară celulelor ES, având o formă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
metilate în celulele iPS. Celulele desemnate în experiment iPS-MEF4 și iPS-MEF10 au fost pozitive pentru fosfataza alcalină și SSEA-1 și au prezentat înaltă activitate telomerazică. De reținut că acetilarea histonelor permite funcționarea genelor, pe când metilarea ADN se asociază cu silențierea genică. 32.5. TERAPIA GENICĂ ÎN IMUNOEREDOPATOLOGII, ÎN IMUNODEFICIENȚĂ SEVERĂ COMBINATĂ (SCID) ȘI ÎN MALADIA CANCEROASĂ Dintre cele peste 600 de protocoale de terapie genică aprobate până în prezent, 63% se referă la boala canceroasă, 12% la eredopatii monogenice, 6% la boli
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Celulele desemnate în experiment iPS-MEF4 și iPS-MEF10 au fost pozitive pentru fosfataza alcalină și SSEA-1 și au prezentat înaltă activitate telomerazică. De reținut că acetilarea histonelor permite funcționarea genelor, pe când metilarea ADN se asociază cu silențierea genică. 32.5. TERAPIA GENICĂ ÎN IMUNOEREDOPATOLOGII, ÎN IMUNODEFICIENȚĂ SEVERĂ COMBINATĂ (SCID) ȘI ÎN MALADIA CANCEROASĂ Dintre cele peste 600 de protocoale de terapie genică aprobate până în prezent, 63% se referă la boala canceroasă, 12% la eredopatii monogenice, 6% la boli infecțioase și 8% la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
telomerazică. De reținut că acetilarea histonelor permite funcționarea genelor, pe când metilarea ADN se asociază cu silențierea genică. 32.5. TERAPIA GENICĂ ÎN IMUNOEREDOPATOLOGII, ÎN IMUNODEFICIENȚĂ SEVERĂ COMBINATĂ (SCID) ȘI ÎN MALADIA CANCEROASĂ Dintre cele peste 600 de protocoale de terapie genică aprobate până în prezent, 63% se referă la boala canceroasă, 12% la eredopatii monogenice, 6% la boli infecțioase și 8% la boli vasculare (Strachan și Read, 2004). Un asemenea protocol reușit este elaborat pentru condiția SCID. Enzima adenozinădeaminază (ADA) joacă un
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de a da un răspuns imun eficient. Dar, în același timp, s-a administrat și preparatul enzimatic unor astfel de pacienți, astfel că nu s-a putut preciza dacă ameliorarea semnelor clinice SCID s-a datorat tratamentului „clasic” sau terapiei genice. Prima reușită neambiguă a terapiei genice a fost raportată de Cavazzano-Calvo și colaboratorii săi, în anul 2000, în cazul unei imunoeredopatologii înrudite - SCID X-lincat. Și în acest caz, s-a realizat transfecția ex vivo a limfocitelor T cu un vector
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
eficient. Dar, în același timp, s-a administrat și preparatul enzimatic unor astfel de pacienți, astfel că nu s-a putut preciza dacă ameliorarea semnelor clinice SCID s-a datorat tratamentului „clasic” sau terapiei genice. Prima reușită neambiguă a terapiei genice a fost raportată de Cavazzano-Calvo și colaboratorii săi, în anul 2000, în cazul unei imunoeredopatologii înrudite - SCID X-lincat. Și în acest caz, s-a realizat transfecția ex vivo a limfocitelor T cu un vector retroviral în care a fost inserționată
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]