4,519 matches
-
lasă la incubat până la 20 de zile. Fiecare test trebuie să includă o sușă cunoscută de C. m. ssp. sepedonicus ca martor. Testele de nutriție și cele fiziologice trebuie să fie efectuate pe un inoculat provenit de la repicări pe agar nutritiv. Comparațiile morfologice trebuie să se efectueze pe baza culturilor pe agar nutritiv cu dextroză. Teste Rezultate preconizate Oxidare/fermentare (O/ F) Inert sau slab oxidant Oxidază - Creștere la 37 °C - Activitate ureazică - Hidroliza esculinei + Hidroliza amidonului - sau slab Toleranța unei
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
o sușă cunoscută de C. m. ssp. sepedonicus ca martor. Testele de nutriție și cele fiziologice trebuie să fie efectuate pe un inoculat provenit de la repicări pe agar nutritiv. Comparațiile morfologice trebuie să se efectueze pe baza culturilor pe agar nutritiv cu dextroză. Teste Rezultate preconizate Oxidare/fermentare (O/ F) Inert sau slab oxidant Oxidază - Creștere la 37 °C - Activitate ureazică - Hidroliza esculinei + Hidroliza amidonului - sau slab Toleranța unei soluții de NaCl la 7 % - Producție de indol - Activitatea catalazei + Producție de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
extract concentrat repus în suspensie pe fiecare fereastră și F = factorul de diluție al extractului concentrat repus în suspensie Apendicele 5 Medii de izolare și de cultură ale C. m. ssp. sepedonicus (a) Medii de cultură de tip general Agar nutritiv Agar nutritiv (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Agar nutritiv cu dextroză Agar nutritiv Difco Bacto care conține 1 % D-glucoză (monohidrat
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
repus în suspensie pe fiecare fereastră și F = factorul de diluție al extractului concentrat repus în suspensie Apendicele 5 Medii de izolare și de cultură ale C. m. ssp. sepedonicus (a) Medii de cultură de tip general Agar nutritiv Agar nutritiv (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Agar nutritiv cu dextroză Agar nutritiv Difco Bacto care conține 1 % D-glucoză (monohidrat). Se sterilizează
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
C. m. ssp. sepedonicus (a) Medii de cultură de tip general Agar nutritiv Agar nutritiv (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Agar nutritiv cu dextroză Agar nutritiv Difco Bacto care conține 1 % D-glucoză (monohidrat). Se sterilizează cu autoclavă la 115 °C timp de 20 de minute. Agar cu drojdie, peptonă și glucoză (YPGA) Extract de drojdie (Difco) 5,0 g Bacto-peptonă (Difco
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
a) Medii de cultură de tip general Agar nutritiv Agar nutritiv (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Agar nutritiv cu dextroză Agar nutritiv Difco Bacto care conține 1 % D-glucoză (monohidrat). Se sterilizează cu autoclavă la 115 °C timp de 20 de minute. Agar cu drojdie, peptonă și glucoză (YPGA) Extract de drojdie (Difco) 5,0 g Bacto-peptonă (Difco) 5,0 g D-
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
la 96 %; amfotericina B (Sigma) (1 mg/ml) în dimetilsulfoxid. Soluțiile depozitate sunt sterilizate prin filtrare. Nota bene: Mediul bazal se conservă timp de trei luni. După adăugarea antibioticelor, mediul se conservă o lună în atmosferă refrigerată. Mediu NCP-88 Agar nutritiv (Difco) 23 g Extract de drojdie (Difco) 2 g D-manitol 5 g K2HPO4 2 g KH2PO4 0,5 g MgSO4.7H2O 0,25 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se ajustează pH-ul la 7,2
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Testul PCR asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.6. 10 În general, agentul patogen se izolează ușor din materialul vegetal simptomatic prin diluare sau însămânțare pe mediul nutritiv (secțiunea II.3). 11 Morfologia coloniei tipice este descrisă în secțiunea II.3.d. 12 Cultivarea riscă să eșueze în stadiile avansate de infectare din cauza concurenței sau a înmulțirii bacteriilor saprofite. În cazul în care simptomele bolii sunt caracteristice, dar
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
sterilă sau într-un tampon fosfat de 50 mM (apendicele 4). Se lasă cinci-zece minute pe masă. (b) Se prepară o serie de diluții zecimale ale suspensiei. (c) Se transferă 50-100 μl de suspensie și de diluții într-un mediu nutritiv general (NA, YPGA și SPA; a se vedea apendicele 2) și/sau în mediul de tetrazoliu Kelman (apendicele 2) și/sau în mediul selectiv validat (de exemplu, SMSA; a se vedea apendicele 2). Se întinde sau se prepară în linii
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
se consideră util, se prepară plăci din cutii Petri separate cu o suspensie de celule diluate din sușa virulentă biovar 2 de R. solanacearum drept control pozitiv. (d) Se incubează plăcile timp de 2-6 zile la 28 °C. - În mediul nutritiv general, izolările virulente de R. solanacearum dezvoltă colonii fluide, neregulate, plate, albicioase, deseori cu verticile caracteristice în centru. Formele avirulente de R. solanacearum formează mici colonii rotunjite, nefluide, untoase, de culoare albicioasă uniformă. - În mediul tetrazolic Kelman și în mediul
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
fiecare eșantion de extract și fiecare diluție. 4.1.2. Plăcile se incubează la 28 °C. Citirea plăcilor se face după 48 ore, iar apoi zilnic pe o perioadă de până la șase zile. Coloniile tipice de R. solanacearum în mediul nutritiv SMSA sunt de culoare alb-lăptos, plate, neregulate și fluide, iar după trei zile de incubare dezvoltă o colorație roz spre roșu-sângeriu în centru, prezentând spirale sau striații interne sau verticile (a se vedea website-ul http://forum.europa.eu.int/Public
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în întregime de culoare roșie și nefluide sau parțial fluide fiind, prin urmare, greu de deosebit de bacteriile saprofite care formează colonii. 4.1.3. Coloniile prezumtive de R. solanacearum se purifică după însămânțare sau diluare și însămânțare într-un mediu nutritiv general pentru a obține colonii izolate (a se vedea apendicele 2). 4.1.4. Culturile pot fi păstrate pe termen scurt în apă sterilă (pH 6-8, fără clor) la temperatura ambiantă și în întuneric sau pe termen lung într-un
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
și să fie găsite în controalele pozitive colonii caracteristice de R. solanacearum. Testul de diluare-însămânțare este pozitiv atunci când sunt izolate colonii prezumtive de R. solanacearum. 4.2. Procedura de îmbogățire A se utiliza un mediu de îmbogățire validat, precum mediul nutritiv modificat Wilbrink (a se vedea apendicele 2). Această procedură poate fi folosită pentru a crește în mod selectiv populațiile de R. solanacearum în extractele de eșantioane și pentru a ameliora sensibilitatea detectării. Procedura permite, de asemenea, diluarea inhibitorilor reacției PCR
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de asemenea, diluarea inhibitorilor reacției PCR (1:100). Cu toate acestea, trebuie observat faptul că îmbogățirea R. solanacearum poate eșua din cauza concurenței sau antagonismului organismelor saprofite care sunt, de multe ori, îmbogățite simultan. În consecință, izolarea R. solanacearum în medii nutritive de cultură îmbogățite poate fi dificilă. De asemenea, întrucât populațiile de saprofite apropiate din punct de vedere serologic se pot înmulți, în cazul utilizării testului ELISA, se recomandă utilizarea de anticorpi monoclonali specifici în locul anticorpilor policlonali. 4.2.1. Pentru
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de vedere serologic se pot înmulți, în cazul utilizării testului ELISA, se recomandă utilizarea de anticorpi monoclonali specifici în locul anticorpilor policlonali. 4.2.1. Pentru îmbogățirea PCR, se transferă 100 μl de extract de eșantion în 10 ml de mediu nutritiv lichid de îmbogățire (apendicele 2) împărțit anterior în tuburi sau flacoane fără urme de ADN. Pentru îmbogățirea ELISA, se pot folosi proporții mai mari de mediu nutritiv lichid (de exemplu, 100 μl în 1,0 ml de mediu nutritiv lichid
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
se transferă 100 μl de extract de eșantion în 10 ml de mediu nutritiv lichid de îmbogățire (apendicele 2) împărțit anterior în tuburi sau flacoane fără urme de ADN. Pentru îmbogățirea ELISA, se pot folosi proporții mai mari de mediu nutritiv lichid (de exemplu, 100 μl în 1,0 ml de mediu nutritiv lichid de îmbogățire). 4.2.2. Se incubează timp de 72 ore între 27 și 30 °C într-o cultură agitată sau statică fără a închide ermetic dopul
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
mediu nutritiv lichid de îmbogățire (apendicele 2) împărțit anterior în tuburi sau flacoane fără urme de ADN. Pentru îmbogățirea ELISA, se pot folosi proporții mai mari de mediu nutritiv lichid (de exemplu, 100 μl în 1,0 ml de mediu nutritiv lichid de îmbogățire). 4.2.2. Se incubează timp de 72 ore între 27 și 30 °C într-o cultură agitată sau statică fără a închide ermetic dopul tubului, pentru a permite aerisirea. 4.2.3. Se amestecă bine înainte de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
30 °C într-o cultură agitată sau statică fără a închide ermetic dopul tubului, pentru a permite aerisirea. 4.2.3. Se amestecă bine înainte de a se utiliza pentru testele ELISA sau PCR. 4.2.4. În testele anterioare, mediul nutritiv lichid de îmbogățire se tratează în același mod ca și eșantioanele. Notă: În cazul în care se prevede o inhibare sau o îmbogățire a R. solanacearum din cauza populațiilor considerabile de anumite bacterii saprofite concurente, îmbogățirea extractelor de eșantioane până la centrifugare
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Portugalia Salamanca Spania Valencia Spania Uppsala Suedia 1 Experți de contact: a se vedea http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. Apendicele 2 Medii pentru izolarea și cultura R. solanacearum (a) Medii de creștere în general Geloză nutritivă (GN) Geloză nutritivă (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute. Geloză cu drojdie - peptonă - glucoză (YPGA) Extract de levură (Difco) 5,0 g
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Valencia Spania Uppsala Suedia 1 Experți de contact: a se vedea http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main. Apendicele 2 Medii pentru izolarea și cultura R. solanacearum (a) Medii de creștere în general Geloză nutritivă (GN) Geloză nutritivă (Difco) 23,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute. Geloză cu drojdie - peptonă - glucoză (YPGA) Extract de levură (Difco) 5,0 g Bacto-peptonă (Difco) 5
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de calitate prin însămânțarea unei suspensii dintr-o cultură de referință de R. solanacearum (a se vedea apendicele 3) și observarea formării de colonii tipice după incubarea la 28 °C timp de 2-5 zile. (c) Medii de îmbogățire validate Mediu nutritiv SMSA (Elphinstone et al., 1996) Se prepară ca și pentru mediul selectiv SMSA, dar se elimină Bacto-Agar și clorura de 2-3-5-tetrazoliu. Mediu nutritiv modificat Wilbrink (Caruso et al., 2002) Zaharoză 10 g Proteoză peptonă 5 g K2HPO4 0,5 g
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
colonii tipice după incubarea la 28 °C timp de 2-5 zile. (c) Medii de îmbogățire validate Mediu nutritiv SMSA (Elphinstone et al., 1996) Se prepară ca și pentru mediul selectiv SMSA, dar se elimină Bacto-Agar și clorura de 2-3-5-tetrazoliu. Mediu nutritiv modificat Wilbrink (Caruso et al., 2002) Zaharoză 10 g Proteoză peptonă 5 g K2HPO4 0,5 g MgSO4 0,25 g NaNO3 0,25 g Apă distilată 1 l Se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
g MgSO4 0,25 g NaNO3 0,25 g Apă distilată 1 l Se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute și se răcește la 50 °C. Se adaugă soluții concentrate de antibiotice ca și pentru mediul nutritiv SMSA. Apendicele 3 A. Material de control standardizat disponibil în comerț (a) Izolate de bacterii Următoarele izolate de bacterii se recomandă spre utilizare în calitate de material standard de referință sau control pozitiv (tabelul 1) sau pe parcursul optimizării testelor pentru a evita
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
hl cu condiția ca produsul astfel tratat să aibă un conținut de cupru care să nu fie mai mare de 1 mg/l Cărbune pentru utilizare oenologică 100 g produs uscat per hl 100 g produs uscat per hl Săruri nutritive: fosfat diamonic sau sulfat de amoniu 1 g/l (exprimat în săruri) (*) 0,3 g/l (exprimat în săruri) pentru elaborarea vinului spumant Sulfit de amoniu sau bisulfit de amoniu 0,2 g/l (exprimat în săruri) (*) Factori de creștere
32006R0643-ro () [Corola-website/Law/295245_a_296574]
-
și Științe Administrative al României, cu modificările ulterioare, se prorogă până la data de 1 martie 2017. Articolul 21 În perioada 1 ianuarie-28 februarie 2017 se suspendă aplicarea prevederilor Legii nr. 509/2006 privind acordarea de miere de albine ca supliment nutritiv pentru preșcolari și elevii din clasele I-IV din învățământul de stat și confesional, cu modificările ulterioare.*) Articolul 22 Prin derogare de la prevederile art. 43 alin. (3) din Legea nr. 411/2004 privind fondurile de pensii administrate privat, republicată, cu
ORDONANŢĂ DE URGENŢĂ nr. 99 din 15 decembrie 2016 (*actualizată*) privind unele măsuri pentru salarizarea personalului plătit din fonduri publice, prorogarea unor termene, precum şi unele măsuri fiscal-bugetare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/279258_a_280587]