4,448 matches
-
termic, astfel încât să se obțină o temperatură de minimum 56oC timp de 30 minute în miezul lemnului sau - cioplit și afumat pentru a se asigura dispariția NLP vii; (ii) obținut din alți copaci decât cei menționați la pct. (i) este: testat oficial pentru depistarea prezenței NLP și a Monochamus spp.; dacă prezența acestora este confirmată, lemnul este supus dispozițiilor menționate la (i); dacă prezența este dezmințită, lemnul poate să fie transportat sub control oficial până la o fabrică de prelucrare pentru a
jrc4930as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90098_a_90885]
-
56oC timp de 30 minute sau - cioplit și afumat imediat, pentru a se asigura lipsa NLP vii; (ii) obținut din alți copaci decât cei menționați la pct. (i) este imediat decojit la locul doborârii sau în imediata vecinătate și este: - testat oficial pentru depistarea prezenței NLP și a Monochamus spp.; dacă prezența acestora este confirmată, lemnul este supus dispozițiilor menționate la (i); dacă prezența este dezmințită, lemnul poate să fie transportat sub control oficial până la o fabrică de prelucrare pentru a
jrc4930as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90098_a_90885]
-
80% și se efectuează reacția IF. Primul strat de reactiv se compune din anticorpi poli- sau monoclonali de referință de calitate. Al doilea reactiv este un antiser combinat cu fluorcrom preparat împotriva imunoglobulinelor din primul ser. Pentru fiecare dintre antiserurile testate, se folosesc cel puțin o cultură inoculată în doză ridicată și o cultură inoculată în doză slabă. Se includ în test martori negativi și pozitivi corespunzători. Se recomandă tipuri de fluorcrom precum FITC sau TRITC. Se montează lamele de cultură
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
activatoare specifice, poate furniza potențialul pentru o activare endogenă. Alegerea liniilor celulare ar trebui să fie justificată din punct de vedere științific (de ex. prin importanța izoenzimei citocromului P450 pentru metabolismul substanței de testat). 1.4.1.5. Substanța de testat/prepararea Substanțele de testat în stare solidă ar trebui să se preparare sub formă de soluții sau suspensii în solvenții sau vehiculele corespunzătoare, care, dacă este cazul, se diluează înaintea tratamentului celulelor. Substanțele de testat lichide se pot adăuga direct
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
care să demonstreze stabilitatea acestora în caz de păstrare. 1.4.2. Condițiile de testare 1.4.2.1. Solventul/vehiculul Solventul/vehiculul ar trebui să fie ales, astfel încât să nu existe suspiciunea reacției chimice a acestuia cu substanța de testat și să nu afecteze negativ supraviețuirea celulelor și activitatea S9. Utilizarea altor solvenți/vehicule decât cele recunoscute ar trebui să fie justificată cu date care să demonstreze compatibilitatea acestora. Se recomandă ca, ori de câte ori este posibil, să se prefere un solvent
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
celule în dublu exemplar, procedură recomandată cu fermitate pentru culturile cu martor negativ/solvent. Dacă datele testelor anterioare pot să dovedească existența unor diferențe minime între culturile duble (13) (14), se poate preconiza utilizarea unor culturi unice pentru fiecare concentrație testată. Substanțele în stare gazoasă sau cele volatile ar trebui să fie testate prin metode corespunzătoare, de exemplu în vase de cultură închise ermetic (15) (16). 1.4.3.3. Momentul recoltării culturilor În primul experiment, expunerea celulelor la substanța de
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
rezultatelor testelor se pot utiliza metode statistice (3) (13). Semnificația statistică nu ar trebui să fie singurul factor determinant pentru a decide cu privire la un răspuns pozitiv. O creștere a numărului de celule poliploide poate să indice faptul că substanța de testat este capabilă să inhibe procesele mitotice și să producă aberații ale numărului de cromozomi. O creștere a numărului de celule cu cromozomi endoreduplicați poate să indice faptul că substanța de testat poate inhiba avansarea ciclului celular (17) (18). Dacă rezultatele
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
celule poliploide poate să indice faptul că substanța de testat este capabilă să inhibe procesele mitotice și să producă aberații ale numărului de cromozomi. O creștere a numărului de celule cu cromozomi endoreduplicați poate să indice faptul că substanța de testat poate inhiba avansarea ciclului celular (17) (18). Dacă rezultatele obținute pentru o substanță de testat nu îndeplinesc criteriile menționate anterior, se consideră că substanța respectivă nu este mutagenă în sistemul respectiv. Deși majoritatea experimentelor vor da în mod clar rezultate
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
zile și de 1 000 mg/kg greutate corp/zi pentru un tratament mai lung de 14 zile. În funcție de expunerea umană preconizată, ar putea fi necesară o doză mai mare în testul limită. 1.5.5. Administrarea dozelor Substanța de testat se administrează, de obicei, prin cavitatea nazală cu ajutorul unui tub stomacal sau a unei canule de intubație adaptate sau printr-o injecție intraperitoneală. Se pot accepta și alte căi de administrare, dacă se pot justifica. Volumul maxim de lichid care
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
pentru a decide cu privire la un răspuns pozitiv. Rezultatele nesigure ar trebui să fie clarificate prin teste suplimentare, realizate de preferință printr-o modificare a condițiilor experimentale. O creștere a numărului de celule poliploide poate să indice faptul că substanța de testat poate produce aberații ale numărului de cromozomi. O creștere a numărului de celule cu cromozomi enderoduplicați poate să indice faptul că substanța de testat poate să inhibe avansarea ciclului celular (7) (8). Dacă rezultatele pentru o substanță de testat nu
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
condițiilor experimentale. O creștere a numărului de celule poliploide poate să indice faptul că substanța de testat poate produce aberații ale numărului de cromozomi. O creștere a numărului de celule cu cromozomi enderoduplicați poate să indice faptul că substanța de testat poate să inhibe avansarea ciclului celular (7) (8). Dacă rezultatele pentru o substanță de testat nu îndeplinesc criteriile menționate anterior, substanța respectivă se consideră a fi nemutagenă în prezentul test. Deși majoritatea experimentelor vor da în mod clar rezultate pozitive
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
activitatea substanței de testat. Rezultatele pot să rămână nesigure sau discutabile independent de numărul de experimente efectuate. Rezultatele pozitive ale unui test de aberație cromozomială in vivo indică faptul că o substanță provoacă aberații cromozomiale în măduva osoasă a speciei testate. Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat nu provoacă aberații cromozomiale în măduva osoasă a speciei testate. Ar trebui discutată probabilitatea ca substanța de testat sau metaboliții acesteia să ajungă în circulația generală sau în mod
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
test de aberație cromozomială in vivo indică faptul că o substanță provoacă aberații cromozomiale în măduva osoasă a speciei testate. Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat nu provoacă aberații cromozomiale în măduva osoasă a speciei testate. Ar trebui discutată probabilitatea ca substanța de testat sau metaboliții acesteia să ajungă în circulația generală sau în mod specific în țesutul-țintă (de ex. toxicitatea sistemică). 3. RAPORTAREA RAPORTUL TESTULUI Raportul testului trebuie să conțină următoarele informații: Solventul/vehiculul: - justificarea
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
datele din studiul pentru stabilirea dozelor, dacă s-a realizat, - justificarea alegerii dozelor utilizate, - detalii privind prepararea substanței de testat, - detalii privind administrarea substanței de testat, - justificarea căii de administrare selectate, - metodele de verificare pentru a constata dacă substanța de testat a ajuns în circulația generală sau în țesutul-țintă, dacă este cazul, - conversia concentrației substanței de testat (ppm) în hrană/apa de băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
prepararea substanței de testat, - detalii privind administrarea substanței de testat, - justificarea căii de administrare selectate, - metodele de verificare pentru a constata dacă substanța de testat a ajuns în circulația generală sau în țesutul-țintă, dacă este cazul, - conversia concentrației substanței de testat (ppm) în hrană/apa de băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei, - descrierea amănunțită a modalităților de tratare și de prelevare a probelor, - metodele de măsurare a toxicității
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
a facilita administrarea unui volum mare de material, substanțele de testat se pot administra și în doză fracționată, adică două tratamente în aceeași zi, la un interval de câteva ore. Testul se poate realiza în două moduri: (a) Substanța de testat se administrează animalelor într-o singură repriză. Probele de măduvă osoasă se prelevează de cel puțin două ori, prelevarea începând cel mai devreme la 24 de ore după tratament, fără să se prelungească mai mult de 48 de ore după
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de 1 000 mg/kg greutate corp/zi pentru un tratament mai lung de 14 zile. În funcție de expunerea umană preconizată, s-ar putea să fie necesară o doză mai mare în testul limită. 1.5.5. Administrarea dozelor Substanța de testat se administrează, de obicei, prin cavitatea nazală cu ajutorul unui tub stomacal sau a unei canule de intubație adaptate sau printr-o injecție intraperitoneală. Se pot accepta și alte căi de administrare, dacă se pot justifica. Volumul maxim de lichid care
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
sau egal cu 2 ml/100g greutate corp. Utilizarea unor volume mai mari decât cel menționat ar trebui să se justifice. Cu excepția substanțelor iritante și corozive care vor prezenta în mod normal efecte exacerbate la concentrații mai mari, variația volumului testat ar trebui să fie redusă la minim prin ajustarea concentrației, astfel încât să se asigure un volum constant pentru toate dozele. 1.5.6. Prepararea măduvei osoase/a sângelui Celule de măduvă osoasă se extrag în mod curent din femur sau
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de testat. Rezultatele pot să rămână nesigure sau discutabile, independent de numărul de experimente. Rezultatele pozitive ale testului de micronucleu indică faptul că substanța induce formarea de micronuclee ca urmare a leziunilor cromozomiale sau leziunilor aparatului mitotic din eritroblaștii speciei testate. Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat nu produce micronuclee în eritrocitele imature ale speciei testate. Ar trebui să fie discutată probabilitatea ca substanța de testat sau metaboliții acesteia să ajungă în circulația generală sau în
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
indică faptul că substanța induce formarea de micronuclee ca urmare a leziunilor cromozomiale sau leziunilor aparatului mitotic din eritroblaștii speciei testate. Rezultatele negative indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat nu produce micronuclee în eritrocitele imature ale speciei testate. Ar trebui să fie discutată probabilitatea ca substanța de testat sau metaboliții acesteia să ajungă în circulația generală sau în mod specific în țesutul-țintă (de ex. toxicitatea sistemică). 3. RAPORTAREA RAPORTUL TESTULUI Raportul testului ar trebui să conțină următoarele informații
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
datele din studiul pentru stabilirea dozelor, dacă s-a realizat, - justificarea alegerii dozelor utilizate, - detalii privind prepararea substanței de testat, - detalii privind administrarea substanței de testat, - justificarea căii de administrare selectate, - metodele de verificare pentru a constata dacă substanța de testat a ajuns în circulația generală sau în țesutul-țintă, dacă este cazul, - conversia concentrației substanței de testat (ppm) în hrană/apa de băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
prepararea substanței de testat, - detalii privind administrarea substanței de testat, - justificarea căii de administrare selectate, - metodele de verificare pentru a constata dacă substanța de testat a ajuns în circulația generală sau în țesutul-țintă, dacă este cazul, - conversia concentrației substanței de testat (ppm) în hrană/apa de băut în doza reală (mg/kg greutate corp/zi), dacă este cazul, - detalii privind calitatea hranei și a apei, - descrierea amănunțită a modalităților de tratare și de prelevare a probelor, - metodele de preparare a lamelelor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
s-ar putea să fie convenabilă utilizarea mai multor concentrații ale fracției postmitocondriale. Pentru coloranții azoici și diazoderivați, s-ar putea să fie mai potrivită utilizarea unui sistem de activare metabolică reducător (6) (13). 1.5.1.4. Substanța de testat/prepararea Substanțele de testat în stare solidă ar trebui să se prepare sub formă de soluții sau suspensii în solvenții sau vehiculele corespunzătoare, care, dacă este cazul, se diluează înaintea tratamentului bacteriilor. Substanțele de testat lichide se pot adăuga direct
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
din 0,5 ml preparat de activare metabolică, ce conține o cantitate specifică de fracție postmitocondrială (în proporție de 5 până la 30% vol./ vol. în preparatul de activare metabolică), 2,0 ml de geloză de acoperire, bacterii și substanța de testat/soluția de testat. Conținutul din fiecare eprubetă se agită și se toarnă pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru metoda de preincubare (2) (3) (5) (6
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
testat. Conținutul din fiecare eprubetă se agită și se toarnă pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru metoda de preincubare (2) (3) (5) (6), substanța de testat/soluția de testat se supune la preincubare împreună cu sușa experimentală (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și cu tamponul steril sau sistemul de activare metabolică (0,5 ml) de obicei timp de 20 de minute sau mai mult, la 30-37oC
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]