2,108 matches
-
poate realiza o măsurătoare suplimentară, de exemplu în ziua 7. Datele obținute în ziua 28 se folosesc pentru determinarea valorii CEx a substanței chimice. Datele din ziua 0 privind probele martor pot fi utilizate pentru estimarea cantității inițiale de biomasă microbiană cu activitate metabolica din sol (12). 1.7.2.2 Măsurarea ratelor de respirație induse de glucoză Rata respirației induse de glucoză se determina pentru fiecare proba de sol tratat și pentru fiecare proba martor la fiecare prelevare. Probele de
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
exemplu sol agricol, forestier etc.); - adâncimea de prelevare a probelor (cm); - conținutul de nisip/aluviuni/argilă (% greutate uscată); - pH (în apă); - conținut de carbon organic (% greutate uscată); - conținut de azot (% greutate uscată); - capacitate de schimb de cationi (mmol/kg); - biomasă microbiană inițială că procent de carbon organic total; - metode de referință utilizate pentru determinarea fiecărui parametru; - toate informațiile privind prelevarea și depozitarea probelor de sol; - detalii privind pre-incubarea solului, daca este cazul. Substanță de testat: - natură fizică și, daca este cazul
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
necesar, se poate dizolva într-o cantitate minimă de acetona sau de alti solvenți organici (6) dacă este suficient de solubila și de stabilă. Cu toate acestea, cantitatea de solvent selectata nu trebuie să aibă o influență semnificativă asupra activității microbiene din sol (vezi secțiunile 1.5 și 1.9.2-1.9.3). Trebuie evitată utilizarea unor solvenți care inhiba activitatea microbiană cum sunt cloroformul, diclormetanul și alți solvenți halogenați. Substanță de testat se poate adaugă și sub formă solidă, amestecata
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
și de stabilă. Cu toate acestea, cantitatea de solvent selectata nu trebuie să aibă o influență semnificativă asupra activității microbiene din sol (vezi secțiunile 1.5 și 1.9.2-1.9.3). Trebuie evitată utilizarea unor solvenți care inhiba activitatea microbiană cum sunt cloroformul, diclormetanul și alți solvenți halogenați. Substanță de testat se poate adaugă și sub formă solidă, amestecata cu nisip cuarțos (6) sau într-o subprobă de sol uscat cu aer și sterilizata de mici dimensiuni. Dacă substanță de
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
reprezentativ; se recomandă argilă nisipoasa sau lutul nisipos fin sau argilă sau nisipul lutos [conform clasificării FAO și USDA (18)] cu un pH de 5,5-8,0, cu conținut de carbon organic de 0,5-2,5% și cu o biomasă microbiană de cel putin 1% din carbonul organic total (10). Pentru studiile privind ratele de transformare se folosesc cel puțin trei soluri suplimentare reprezentative pentru gamă de soluri în cauză. Solurile trebuie să aibă pH-uri, conținuturi de argilă și biomase
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
de cel putin 1% din carbonul organic total (10). Pentru studiile privind ratele de transformare se folosesc cel puțin trei soluri suplimentare reprezentative pentru gamă de soluri în cauză. Solurile trebuie să aibă pH-uri, conținuturi de argilă și biomase microbiene diferite (10). Toate solurile se clasifică, cel puțin din punctul de vedere al texturii (% nisip, % aluviuni, % argilă) [conform clasificării FAO și USDA (18)], al pH-ului, al capacității de schimb de cationi, al densității aparente, al caracteristicilor de reținere a
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
se clasifică, cel puțin din punctul de vedere al texturii (% nisip, % aluviuni, % argilă) [conform clasificării FAO și USDA (18)], al pH-ului, al capacității de schimb de cationi, al densității aparente, al caracteristicilor de reținere a apei14 și al biomasei microbiene (numai pentru studiile aerobe). Pentru interpretarea rezultatelor pot fi utile informații suplimentare privind proprietățile solului. Pentru determinarea caracteristicilor solului se pot utiliza metodele recomandate la referințe (19)(20)(21)(22)(23). Masă microbiană se determina prin metoda respirației induse de
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
de reținere a apei14 și al biomasei microbiene (numai pentru studiile aerobe). Pentru interpretarea rezultatelor pot fi utile informații suplimentare privind proprietățile solului. Pentru determinarea caracteristicilor solului se pot utiliza metodele recomandate la referințe (19)(20)(21)(22)(23). Masă microbiană se determina prin metoda respirației induse de substrat (ȘIR) (25)(26) sau prin metode alternative (20). 1.8.3.2 Prelevarea, manipularea și depozitarea solurilor Se furnizează informații detaliate privind istoricul locului din care se prelevează solul testat. Aceste informatii
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
sol proaspăt prelevat, dar dacă solul prelevat și prelucrat trebuie depozitat înainte de inițierea studiului, condițiile de depozitare trebuie să fie adecvate iar depozitarea să se realizeze pe parcursul unei perioade limitate (4+2șC timp de maximum trei luni) pentru menținerea activității microbiene.15 Referințele (8)(10)(15)(26)(27) conțin instrucțiuni detaliate privind prelevarea, manipularea și depozitarea solurilor utilizate în cadrul experimentelor de biotransformare. Înainte de a fi utilizat în cadrul acestui test, solul tratat se pre-incubează pentru a permite germinarea și eliminarea semințelor și
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
10)(15)(26)(27) conțin instrucțiuni detaliate privind prelevarea, manipularea și depozitarea solurilor utilizate în cadrul experimentelor de biotransformare. Înainte de a fi utilizat în cadrul acestui test, solul tratat se pre-incubează pentru a permite germinarea și eliminarea semințelor și restabilirea echilibrului metabolismului microbian după trecerea de la condițiile de prelevare sau de depozitare la condițiile de incubare. În general este adecvat să se prevadă o perioadă de pre-incubare de 2 până la 28 de zile, aproximativ în condițiile de temperatură și de umiditate din cadrul testului
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
rata și căile de transformare nu trebuie să depășească 120 de zile18 (3)(6)(8), deoarece după acest termen sistemele artificiale de laborator în care nu se produce o reconstituire naturală sunt afectate în timp de o scădere a activității microbiene din sol. Dacă este necesară o caracterizare a epuizării substanței de testat și a formării și epuizării principalilor produși de transformare, studiile pot fi continuate pe parcursul unor perioade mai lungi (de exemplu între 6 și 12 luni) (8). Dacă se
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
în solurile agricole. Dacă aceasta concentrație nu este suficient de ridicată pentru identificarea principalilor produși de transformare, este utilă incubarea unor probe de sol separate care conțin rate mai mari de substanță, dar trebuie evitate ratele excesive care influențează funcțiile microbiene ale solului (vezi secțiunile 1.5 și 1.8.2). Ca alternativă, se poate trata un lot mai mare de sol (1 până la 2 kg) cu substanță de testat, amestecându-se bine într-un malaxor adecvat, si se transferă părți
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
de solvent sau solvenți în aceleași condiții (aerobe) că și probele tratate cu substanță de testat. Aceste probe se folosesc pentru măsurarea biomasei la începutul, în timpul și la finalul studiilor pentru a se verifică efectele solventului sau solvenților asupra biomasei microbiene. Baloanele care conțin sol tratat se conectează la un sistem cu circulație continuă de tipul celui descris în Figură 1 sau se închid cu o coloană de absorbție de tipul celei prezentate în Figură 2 (vezi anexă 3). 1.9
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
de regresie, respectiv segmentul și pantă dreptei de interpolare determinate de regresia liniară a ln k față de 1/Ț, unde k este constantă de viteză la temperatura Ț, iar Ț este temperatura în grade Kelvin. Dacă transformarea depinde de activitatea microbiană, trebuie acordată o atenție specială intervalului limitat de temperaturi în care se aplică relația Arrhenius. 2.2 EVALUAREA ȘI INTERPRETAREA REZULTATELOR Deși studiile se realizează într-un sistem artificial de laborator, rezultatele permit estimarea ratei de transformare a substanței de
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
și de epuizare a produșilor de transformare în condiții de teren (36)(37). Studiile asupra căilor de transformare a unei substanțe de testat oferă informații privind modul în care structura substanței aplicate se modifică în sol prin reacții chimice și microbiene. 3. RAPORTARE RAPORTUL TESTULUI Raportul testului trebuie să conțină următoarele informații: Substanță de testat: - denumirea comună, denumirea chimică, numărul CAS, formula structurală [indicându-se poziția marcajului (marcajelor) radioactiv(e) dacă se folosește material marcat radioactiv] și proprietățile fizice și chimice
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
detalii privind locul de colectare; - dată și procedura de prelevare a solului; - proprietățile solului cum sunt pH-ul, conținutul de carbon organic, textura (% nisip, % aluviuni, % argilă), capacitatea de schimb de cationi, densitatea aparentă, caracteristicile de reținere a apei și biomasă microbiană; - durată depozitarii solului și condițiile de depozitare (dacă este depozitat); Condiții de testare; - datele la care au fost realizate studiile; - cantitatea de substanță de testat aplicată; - solvenții utilizați și metodă de aplicare a substanței de testat; - greutatea solului tratat inițial
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
substanței de testat; - greutatea solului tratat inițial și prelevat la fiecare interval în vederea analizei; - descrierea sistemului de incubare utilizat; - debitul de aer (numai pentru sistemele cu circulație continuă); - temperatura la începutul experimentului; - conținutul de umiditate din sol pe parcursul incubării; - biomasă microbiană inițială, de pe parcursul derulării și de la sfârșitul studiilor aerobe și în condiții de orezărie; - pH-ul, concentrația de oxigen și potențialul redox inițiale, de pe parcursul derulării și de la sfârșitul studiilor aerobe și în condiții de orezărie; - metodă(metodele) de extracție
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
în condiții de orezărie; - metodă(metodele) de extracție; - metodele de identificare și de cuantificare a substanței de testat și principalii produși de transformare din sol și materialele de absorbție; - numărul de duplicate și de probe martor. Rezultate: - rezultatul determinării activității microbiene; - repetabilitatea și sensibilitatea metodelor analitice utilizate; - ratele de recuperare (procentele acceptabile pentru că un studiu să fie considerat valabil sunt prezentate în secțiunea 1.7.1); - tabelul rezultatelor exprimate că % din doză inițială aplicată și, daca este cazul, în mg·kg-1
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
x x Concentrație de O2* x x x x x Potențial redox* x x x x Sediment Origine/sursă x Adâncimea stratului x pH x x x x x Repartizarea dimensiunii particulelor x COT x x x x x Biomasă microbiană** x x x Potențial redox** Observație (culoare/miros) x x x x *Conform rezultatelor cercetărilor recente, măsurarea concentrațiilor de oxigen din apă și a potențialului redox nu au nici valoare mecanică, nici valoare predictiva în ceea ce privește creșterea și dezvoltarea coloniilor microbiene
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
microbiană** x x x Potențial redox** Observație (culoare/miros) x x x x *Conform rezultatelor cercetărilor recente, măsurarea concentrațiilor de oxigen din apă și a potențialului redox nu au nici valoare mecanică, nici valoare predictiva în ceea ce privește creșterea și dezvoltarea coloniilor microbiene în apele de suprafață (24)(25). Determinarea consumului biochimic de oxigen (la prelevare, la începutul și la sfarsitul testului) și a concentrațiilor micro/macro elementelor nutritive Că, Mg și Mn (la începutul și la sfarsitul testului) în apă și măsurarea
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
testului) în apă și măsurarea N total și P total în sedimente (la prelevare și la sfarsitul testului) pot constitui instrumente mai bune de interpretare și de evaluare a ratelor și a căilor de biotransformare aeroba. ** Metodă ratei de respirație microbiene (26), metoda fumigării (27) sau măsurători numerice (bacterii, actinomicete, ciuperci și total colonii) pentru studiile aerobe; rata metanogenezei pentru studiile anaerobe. 1.8.3 Colectarea, manipularea și depozitarea 1.8.3.1 Colectarea Pentru prelevarea de probe de sediment se
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
cu ușurință la o rată egală cu 10% din rata de aplicare a substanței de testat. Cu toate acestea, dacă se folosesc concentrații mai mari ale substanței de testat, acestea nu trebuie să aibă un efect advers important asupra activității microbiene din sistemul apă-sediment. Pentru obținerea unei concentrații constante a substanței de testat în recipiente de diferite dimensiuni, poate fi indicată ajustarea cantității de produs aplicat în funcție de adâncimea coloanei de apă din recipient față de adâncimea apei de pe teren (care se presupune
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
se pot utiliza cantități mici de solvenți miscibili în apă (cum sunt acetona sau etanolul) pentru repartizarea și aplicarea substanței de testat, dar aceștia nu trebuie să depășească 1% v/v și nu trebuie să aibă efecte adverse asupra activității microbiene a sistemului de testare. Soluția apoasa de substanță de testat se prepară cu atenție - pentru a asigura o omogenizare totală se poate efectua o amestecare prealabilă cu ajutorul coloanelor de generator. După adăugarea soluției apoase în sistemul de testare se recomandă
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
testare, astfel încât două astfel de sisteme să poată fi sacrificate la fiecare prelevare. Dacă se folosesc unități martor pentru fiecare sistem de sedimente acvatice, acestea nu se tratează cu substanță de testat. Unitățile martor pot fi utilizate pentru determinarea biomasei microbiene din sediment și a carbonului organic total din apă și din sediment la finalul studiului. Două dintre unitățile martor (de exemplu o unitate de martor din fiecare sediment acvatic) pot fi utilizate pentru monitorizarea parametrilor necesari privind sedimentul și apa
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]
-
pentru monitorizarea parametrilor necesari privind sedimentul și apa pe parcursul perioadei de aclimatizare (vezi tabelul din secțiunea 1.8.2.2). Dacă substanță de testat se aplică cu ajutorul unui solvent se adaugă doi martori suplimentari pentru măsurarea efectelor negative asupra activității microbiene din sistemul de testare. 1.9.3 Durată testului și recoltarea probelor Durată experimentului nu trebuie să depășească în mod normal 100 de zile (6) și trebuie să se desfășoare până la stabilirea căilor de degradare și a profilului de repartizare
32004L0073-ro () [Corola-website/Law/292696_a_294025]