5,310 matches
-
unii inhibitori de topoizomerază și unii analogi de nucleozide). În aceste cazuri, s-ar putea ca testele de mutație pe celule de mamifere să fie mai potrivite. Deși mulți compuși care dau rezultate pozitive în prezentul test sunt cancerigene pentru mamifere, corelația nu este absolută. Aceasta depinde de clasa de substanțe chimice și există agenți cancerigeni care nu se detectează cu prezentul test, deoarece acționează prin alte mecanisme negenotoxice sau mecanisme care nu sunt prezente în celulele bacteriene. 1.4. PRINCIPIUL
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
Assays, in: UKEMS Sub-Committee on Guidelines for Mutagenicity Testing. Part II. Statistical Evaluation of Mutagenicity Test Data, ed. Kirkland, D. J., Cambridge University Press, pp. 28-65. ANEXA 4E B.17. MUTAGENITATEA - TEST IN VITRO DE MUTAȚIE GENICĂ PE CELULE DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 476, Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere se poate utiliza pentru
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
University Press, pp. 28-65. ANEXA 4E B.17. MUTAGENITATEA - TEST IN VITRO DE MUTAȚIE GENICĂ PE CELULE DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 476, Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere se poate utiliza pentru detectarea mutațiilor genice produse de substanțele chimice. Liniile celulare corespunzătoare conțin celule de limfom de șoarece L5178Y, liniile CHO, CHO-AS52 și V79
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
GENICĂ PE CELULE DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 476, Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere se poate utiliza pentru detectarea mutațiilor genice produse de substanțele chimice. Liniile celulare corespunzătoare conțin celule de limfom de șoarece L5178Y, liniile CHO, CHO-AS52 și V79 de celule de hamster chinezesc și celule limfoblastoide umane TK6 (1). În liniile celulare
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
autozomică a TK și XPRT poate să permită detectarea fenomenelor genetice (de ex. deleții importante) care nu sunt detectate în locusul HPRT la cromozomii X (2) (3) (4) (5) (6). În testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere, se pot utiliza culturi de linii celulare stabilite sau sușe celulare. Celule utilizate se selectează în funcție de capacitatea de creștere în cultură și de stabilitatea frecvenței de mutație spontană. Testele realizate in vitro necesită, în general, utilizarea unei surse exogene de
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de creștere în cultură și de stabilitatea frecvenței de mutație spontană. Testele realizate in vitro necesită, în general, utilizarea unei surse exogene de activare metabolică. Sistemul de activare metabolică de acest tip nu poate să reproducă integral condițiile celulelor de mamifere in vivo. Ar trebui să se acorde atenție evitării condițiilor care ar putea să conducă la obținerea unor rezultate care nu reflectă o mutagenitate intrinsecă. Rezultatele pozitive care reflectă o mutagenitate intrinsecă ar putea să provină în urma modificărilor de pH
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
mutagenitate intrinsecă. Rezultatele pozitive care reflectă o mutagenitate intrinsecă ar putea să provină în urma modificărilor de pH, de osmolalitate sau din valori mari ale citotoxicității (7). Prezentul test se utilizează la depistarea substanțelor cu posibile efecte mutagene și cancerigene pentru mamifere. Mulți compuși care dau rezultate pozitive la acest test sunt cancerigeni pentru mamifere; cu toate acestea, nu există o corelație perfectă între prezentul test și cancerigenicitate. Corelația depinde de clasa chimică și sunt tot mai multe dovezi cu privire la existența unor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
în urma modificărilor de pH, de osmolalitate sau din valori mari ale citotoxicității (7). Prezentul test se utilizează la depistarea substanțelor cu posibile efecte mutagene și cancerigene pentru mamifere. Mulți compuși care dau rezultate pozitive la acest test sunt cancerigeni pentru mamifere; cu toate acestea, nu există o corelație perfectă între prezentul test și cancerigenicitate. Corelația depinde de clasa chimică și sunt tot mai multe dovezi cu privire la existența unor agenți cancerigeni care nu se depistează prin prezentul test, deoarece este posibil ca
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
celulele cu deficit de HPRT sau XPRT sunt selectate în funcție de rezistența la 6-tioguanină (TG) sau 8-azaguanină (AG). Dacă analogul unei baze sau un compus înrudit cu agentul selectiv este supus la unul din testele de mutație genică pe celule de mamifere, proprietățile substanței de testat trebuie studiate cu grijă. De exemplu, ar trebui să se examineze substanța de testat suspectată de toxicitate selectivă pentru celule mutante și nemutante. În consecință, performanța sistemului/agentului de selecție trebuie să fie confirmată atunci când se
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
datele stabilite vor exclude posibilitatea unei concluzii definitive cu privire la activitatea substanței de testat. Rezultatele pot să rămână nesigure sau discutabile independent de numărul de repetări ale experimentului. Rezultatele pozitive ale unui test in vitro de mutație genică pe celule de mamifere indică faptul că substanța de testat produce mutații genice în celulele de mamifere, în cultură. Un rezultat concentrație-răspuns pozitiv reproductibil este foarte semnificativ. Rezultatele negative indică faptul că, în condiții experimentale, substanța de testat nu produce mutații genice în celulele
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
Rezultatele pot să rămână nesigure sau discutabile independent de numărul de repetări ale experimentului. Rezultatele pozitive ale unui test in vitro de mutație genică pe celule de mamifere indică faptul că substanța de testat produce mutații genice în celulele de mamifere, în cultură. Un rezultat concentrație-răspuns pozitiv reproductibil este foarte semnificativ. Rezultatele negative indică faptul că, în condiții experimentale, substanța de testat nu produce mutații genice în celulele de mamifere utilizate, în cultură. 3. RAPORTAREA RAPORTUL TESTULUI Raportul testului trebuie să
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
faptul că substanța de testat produce mutații genice în celulele de mamifere, în cultură. Un rezultat concentrație-răspuns pozitiv reproductibil este foarte semnificativ. Rezultatele negative indică faptul că, în condiții experimentale, substanța de testat nu produce mutații genice în celulele de mamifere utilizate, în cultură. 3. RAPORTAREA RAPORTUL TESTULUI Raportul testului trebuie să conțină următoarele informații: Solventul/vehiculul: - justificarea alegerii vehiculului, - solubilitatea și stabilitatea substanței de testat în solvent/vehicul, dacă se cunoaște. Celulele: - tipul și sursa celulelor, - numărul de culturi celulare
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
M. and Doerr, C. L. (1990), Comparison of Chromosome Aberration Frequency and Small-Colony TK-Deficient Mutant Frequency in L5178Y/TK+/- - 3.7.2C Mouse Lymphoma Cells, Mutagenesis 5, pp. 609-614. ANEXA 4F B.23. TEST DE ABERAȚIE CROMOZOMIALĂ PE SPERMATOGONII DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 483, Testul de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere constă în identificarea acelor substanțe
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
7.2C Mouse Lymphoma Cells, Mutagenesis 5, pp. 609-614. ANEXA 4F B.23. TEST DE ABERAȚIE CROMOZOMIALĂ PE SPERMATOGONII DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 483, Testul de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere constă în identificarea acelor substanțe care produc aberații cromozomiale ale structurii în celulele spermatogoniale ale mamiferelor (1) (2) (3) (4) (5). Aberațiile de structură pot
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
ABERAȚIE CROMOZOMIALĂ PE SPERMATOGONII DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 483, Testul de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere constă în identificarea acelor substanțe care produc aberații cromozomiale ale structurii în celulele spermatogoniale ale mamiferelor (1) (2) (3) (4) (5). Aberațiile de structură pot fi de două tipuri, cromozomiale sau cromatidice. La majoritatea mutagenilor chimici, aberațiile induse sunt de
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
TG 483, Testul de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de aberație cromozomială pe spermatogonii de mamifere constă în identificarea acelor substanțe care produc aberații cromozomiale ale structurii în celulele spermatogoniale ale mamiferelor (1) (2) (3) (4) (5). Aberațiile de structură pot fi de două tipuri, cromozomiale sau cromatidice. La majoritatea mutagenilor chimici, aberațiile induse sunt de tip cromatidic, dar se produc și aberații de tip cromozomial. Prezenta metodă nu este destinată determinării
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
4. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.4.1. Preparatele 1.4.1.1. Selectarea speciilor de animale Se utilizează, de obicei, hamsteri chinezești și șoareci de sex masculin. Cu toate acestea, se pot utiliza masculi din orice altă specie de mamifere adecvată. Se recomandă utilizarea unor animale adulte tinere sănătoase, din sușe utilizate în mod curent în laborator. La începutul studiului, greutatea animalelor ar trebui să prezinte o variație minimă, ce nu trebuie să depășească ±20% din greutatea medie. 1.4
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
Test Data. UKEMS Sub-Committee on Guidelines for Mutagenicity Testing, report, Part III, Cambridge University Press, Cambridge, New York, Port Chester, Melbourne, Sydney, pp. 184-232. ANEXA 4G " B.39. TEST IN VIVO DE SINTEZĂ NEPROGRAMATĂ A ADN (UDS) PE CELULE HEPATICE DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 486, Testul in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
39. TEST IN VIVO DE SINTEZĂ NEPROGRAMATĂ A ADN (UDS) PE CELULE HEPATICE DE MAMIFERE 1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 486, Testul in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere este identificarea substanțelor de testat care induc regenerarea ADN în celulele hepatice ale animalelor (1) (2) (3) (4). Prezentul test in
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
este reprodusă după linia directoare OCDE TG 486, Testul in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Scopul testului in vivo de sinteză neprogramată a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere este identificarea substanțelor de testat care induc regenerarea ADN în celulele hepatice ale animalelor (1) (2) (3) (4). Prezentul test in vivo oferă o metodă pentru studiul efectelor genotoxice ale produselor chimice în ficat. Efectul măsurat este o indicație a
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
reparării ADN după excizia și eliminarea unui fragment din ADN, ce conține o regiune deteriorată indusă de acțiunea unor substanțe chimice sau a unor agenți fizici. 1.3. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul in vivo UDS pe celule hepatice de mamifere indică o sinteză de reparare a ADN după excizia și eliminarea unui fragment din ADN, ce conține o regiune deteriorată indusă de acțiunea unor substanțe chimice sau a unor agenți fizici. Testul se întemeiază, de obicei, pe încorporarea 3H-TdR în
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
celulele în fază S, așa cum este, de exemplu, numărătoarea în scintilație lichidă. 1.4. DESCRIEREA METODEI 1.4.1. Preparatele 1.4.1.1. Selectarea speciei de animale Se utilizează, de obicei, șobolani, deși se poate utiliza orice specie de mamifere. Se recomandă utilizarea unor animale adulte tinere sănătoase din sușe folosite în mod curent în laborator. La începutul studiului, greutatea animalelor ar trebui să prezinte variații minime, ce nu trebuie să depășească ±20% din greutatea medie a fiecărui sex. 1
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
ore de la tratament), cu excepția cazului în care există un răspuns pozitiv net după 12-16 ore, Cu toate acestea, se pot utiliza și alte momente de prelevare, dacă datele toxicokinetice justifică acest lucru. Culturile pe termen scurt de celule hepatice de mamifere se realizează, de obicei, perfuzând ficatul in situ cu colagenază și lăsând celulele hepatice proaspăt disociate să se fixeze pe o suprafață corespunzătoare. Celulele hepatice de la animale martori negativi ar trebui să aibă o viabilitate (5) de minimum 50%. 1
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
datele stabilite vor exclude posibilitatea unei concluzii definitive cu privire la activitatea substanței de testat. Rezultatele pot să rămână nesigure sau discutabile independent de numărul de repetări ale experimentului. Un rezultat pozitiv al unui test UDS in vivo pe celule hepatice de mamifere indică faptul că substanța de testat produce leziuni in vivo ale ADN din celulele hepatice ale mamiferelor, care se pot remedia prin sinteza neprogramată a ADN in vitro. Un rezultat negativ indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
nesigure sau discutabile independent de numărul de repetări ale experimentului. Un rezultat pozitiv al unui test UDS in vivo pe celule hepatice de mamifere indică faptul că substanța de testat produce leziuni in vivo ale ADN din celulele hepatice ale mamiferelor, care se pot remedia prin sinteza neprogramată a ADN in vitro. Un rezultat negativ indică faptul că, în condițiile experimentale, substanța de testat nu produce o deteriorare a ADN care să se poată detecta prin prezentul test. Ar trebui să
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]