4,448 matches
-
conținut de oxigen adecvat și o distribuție uniformă a produsului de testare în aer. Incinta martor și cea de testare trebuie să fie identice ca proiectare și construcție, astfel încât să asigure condiții comparabile sub toate aspectele, cu excepția expunerii la substanțele testate. În incintă se menține o presiune ușor negativă pentru a împiedica pierderea substanței de testare în zona înconjurătoare. În incinte trebuie redusă la minim aglomerarea animalelor testate Ca regulă generală, pentru a asigura stabilitatea atmosferei din incintă, volumul total al
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
construcție, astfel încât să asigure condiții comparabile sub toate aspectele, cu excepția expunerii la substanțele testate. În incintă se menține o presiune ușor negativă pentru a împiedica pierderea substanței de testare în zona înconjurătoare. În incinte trebuie redusă la minim aglomerarea animalelor testate Ca regulă generală, pentru a asigura stabilitatea atmosferei din incintă, volumul total al animalelor nu trebuie să depășească 5% din volumul incintei. Se măsoară și se controlează: (i) fluxul de aer: debitul de aer în incintă este recomandabil să fie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
fie monitorizați continuu; (iv) analiza granulometrică a particulelor: în atmosfera incintei unde există aerosoli lichizi sau solizi, trebuie să fie determinată distribuția granulometrică a particulelor. Particulele din componența aerosolilor trebuie să aibă o dimensiune compatibilă cu respirarea lor de către animalele testate. Probele din atmosfera incintei se prelevează de la nivelul zonei de respirație. Probele de aer trebuie să fie reprezentative din punct de vedere al distribuției particulelor la care sunt expuse animalele și trebuie să reflecte, în termeni gravimetrici, toate suspensiile de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
conținut de oxigen adecvat și o distribuție uniformă a produsului de testare în aer. Incinta martor și cea de testare trebuie să fie identice ca proiectare și construcție, astfel încât să asigure condiții comparabile sub toate aspectele, cu excepția expunerii la substanțele testate. În incintă se menține o presiune ușor negativă pentru a împiedica pierderea substanței de testare în zona înconjurătoare. În incinte trebuie redusă la minim aglomerarea animalelor testate Ca regulă generală, pentru a asigura stabilitatea atmosferei din incintă, volumul total al
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
construcție, astfel încât să asigure condiții comparabile sub toate aspectele, cu excepția expunerii la substanțele testate. În incintă se menține o presiune ușor negativă pentru a împiedica pierderea substanței de testare în zona înconjurătoare. În incinte trebuie redusă la minim aglomerarea animalelor testate Ca regulă generală, pentru a asigura stabilitatea atmosferei din incintă, volumul total al animalelor nu trebuie să depășească 5% din volumul incintei. Se măsoară și se controlează: (i) fluxul de aer: debitul de aer în incintă este recomandabil să fie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
fie monitorizați continuu; (iv) analiza granulometrică a particulelor: în atmosfera incintei unde există aerosoli lichizi sau solizi, trebuie să fie determinată distribuția granulometrică a particulelor. Particulele din componența aerosolilor trebuie să aibă o dimensiune compatibilă cu respirarea lor de către animalele testate. Probele din atmosfera incintei se prelevează de la nivelul zonei de respirație. Probele de aer trebuie să fie reprezentative din punct de vedere al distribuției particulelor la care sunt expuse animalele și trebuie să reflecte, în termeni gravimetrici, toate suspensiile de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
sau excreție, fiecare lot tratat trebuie să cuprindă inițial patru animale. Alegerea în funcție de sexe nu este obligatorii, dar în anumite circumstanțe ar putea fi necesară studierea animalelor de ambele sexe. Dacă răspunsul la substanța de testare diferă în funcție de sex, trebuie testate câte patru animale din fiecare sex. În cazul studiilor pe nerozătoare, se pot utiliza mai puține animale. În studiile privind distribuția tisulară, mărimea inițială a lotului trebuie stabilită și în funcție de numărul de animale care trebuie sacrificate la fiecare dată fixată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
animalelor la momente diferite după expunere și determinarea concentrației și cantității totale de substanță și/sau metaboliți în țesuturi și organe. Excreția În studiile de excreție se colectează: urină, fecale, aer expirat și, în anumite circumstanțe, bilă. Cantitatea de substanță testată și/sau metaboliții în acești produși de excreție se măsoară de mai multe ori după administrare, până când aproximativ 95% din doza administrată a fost excretată, sau timp de șapte zile, dacă acest termen este mai apropiat. În cazuri speciale, se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mutații ale cadrului de citire. Dintre sușele diploide de Saccharomyces cerevisiae, singura sușă folosită pe scară largă este D7, care este homozigotă pentru ilv 1-92. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Soluțiile substanțelor testate și soluțiile martor trebuie să fie preparate imediat înaintea testării, utilizându-se un excipient corespunzător. În cazul compușilor organici insolubili în apă, trebuie să se utilizeze soluții de cel mult 2% v/v solvenți organici precum etanolul, acetona sau dimetilsulfoxidul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
metabolică. Cel mai utilizat sistem este o fracțiune postmitocondrială suplimentată cu un cofactor preparat din ficatul de rozătoare tratate cu inductori enzimatici. Pentru activarea metabolică, pot fi folosite și alte specii, țesuturi, fracțiuni postmitocondriale sau alte metode. Condiții experimentate Sușe testate Sușele cel mai des utilizate în studiile de potențial mutagen sunt sușa haploidă XV185-14C și sușa diploidă D7. Se pot utiliza și alte sușe. Medii de cultură Pentru stabilirea numărului de colonii supraviețuitoare și mutante sunt utilizate medii de cultură
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
trebuie preparați simultan. Pentru fiecare mecanism mutagen specific se folosesc substanțe martor pozitiv adecvate. Concentrația de expunere Trebuie folosite cel puțin cinci concentrații ale substanței de testare, cu intervale corespunzătoare între acestea. În cazul substanțelor toxice, cea mai mare concentrație testată nu trebuie să reducă supraviețuirea la mai puțin de 5 - 10%. Substanțele relativ insolubile în apă se testează până la limita de solubilitate, folosind metode adecvate. Pentru substanțele netoxice cu un grad ridicat de solubilitate în apă, limita superioară a concentrației
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
D5 sau în D7 (care, de asemenea, măsoară conversia genică mitotică și mutația reversă la ilv1-92), ambele sușe fiind heteroalelice pentru alelele complementare ale ade2. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Soluțiile substanțelor testate și ale compușilor martor sau de referință trebuie preparate chiar înaintea testării, folosind un excipient corespunzător. În cazul compușilor organici insolubili în apă, trebuie utilizate soluții de cel mult 2% v/v de solvenți organici precum etanolul, acetona sau dimetilsulfoxidul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
puțin cinci concentrații ale substanței de testare, cu intervale corespunzătoare între acestea. Printre factorii care trebuie luați în considerare se numără citotoxicitatea și solubilitatea. Concentrația minimă trebuie să nu afecteze viabilitatea celulară. În cazul substanțelor toxice, cea mai mare concentrație testată nu trebuie să reducă supraviețuirea la mai puțin de 5 - 10%. Substanțele relativ insolubile în apă trebuie să fie testate până la limita solubilității, folosind metode adecvate. În cazul substanțelor netoxice cu un grad ridicat de solubilitate în apă, limita superioară
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
atât în prezența cât și în absența unui sistem exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să corespundă clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi Fiecare experiment include martori pozitivi, folosind atât un compus cu activitate directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (excipient). Exemple de substanțe ce
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
bine caracterizate (de exemplu, celule ovariene de hamster chinezesc). Liniile celulare trebuie verificate pentru a decela contaminarea cu Mycoplasma. * Trebuie folosite medii de cultură și condiții de incubare (de exemplu temperatură, vase de cultură, concentrația CO2 și umiditate) corespunzătoare. * Substanțele testate pot fi preparate în mediul de cultură sau dizolvate sau suspensionate într-un excipient adecvat înainte de începerea tratamentului celulelor. Concentrația finală de excipient în mediul de cultură nu trebuie să afecteze în mod semnificativ viabilitatea celulară sau rata de creștere
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
prezența cât și în absența unui sistem exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Alternativ, dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să fie corespunzătoare clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesec cel puțin două culturi. Folosirea martorilor pozitivi și negativi În toate experimentele se folosesc martori pozitivi, folosind atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
pentru a depista absența masculilor din tulpinile sălbatice. Dacă o cultură provine dintr-o femelă F1 purtătoare de genă letală în cromozomul X parental (de exemplu, nu se observă masculi cu cromozomul tratat), fiicele acestei femele cu același genotip trebuie testate pentru a se constata dacă gena letală se repetă în generația următoare. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele în care se specifică numărul de cromozomi X testați, numărul de masculi nefertili și numărul de cromozomi letali la fiecare concentrație
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
observă masculi cu cromozomul tratat), fiicele acestei femele cu același genotip trebuie testate pentru a se constata dacă gena letală se repetă în generația următoare. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele în care se specifică numărul de cromozomi X testați, numărul de masculi nefertili și numărul de cromozomi letali la fiecare concentrație de expunere și pentru fiecare perioadă de împerechere, pentru fiecare mascul tratat. Trebuie raportat numărul de clustere de diferite dimensiuni per mascul. Aceste rezultate trebuie confirmate într-un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
detecta promotori tumorali. Citotoxicitatea poate fi determinată prin măsurarea efectelor materialului testat asupra capacităților de formare de colonii (eficiența de clonare) sau asupra ratei de creștere a culturilor. Măsurarea citotoxicității are rolul de a stabili dacă expunerea la substanța chimică testată are relevanță toxicologică, dar nu poate fi folosită pentru a calcula frecvența transformărilor în toate testele, deoarece unele dintre acestea pot necesita incubare prelungită și/sau recultivare. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
manifestă modificări fenotipice corespunzătoare după expunerea la un agent cancerigen cunoscut și că testul efectuat are o validitate și o fiabilitate demonstrate și documentate. Mediu Se utilizează medii și condiții experimentale corespunzătoare testului de transformare efectuat. Substanța de testare Substanțele testate pot fi preparată în mediile de cultură sau dizolvate ori suspensionate într-un excipient adecvat, înainte de tratarea celulelor. Concentrația finală a excipientului în sistem nu trebuie să afecteze viabilitatea celulară, rata de creștere sau incidența transformărilor. Activarea metabolică Celulele trebuie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
să tratate cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. Dacă tipul celular folosit are activitate metabolică intrinsecă, natura acestei activități trebuie să fie cunoscută și adecvată clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi În fiecare experiment trebuie folosiți martori pozitivi, atât un compus cu activitate directă cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (pentru excipient). Printre exemplele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
ale substanței de testare. Acestea trebuie să prezinte efect toxic în funcție de concentrație, concentrația maximă determinând un nivel scăzut de supraviețuire, iar supraviețuirea la concentrația minimă fiind aproximativ aceeași cu cea de la martorul negativ. Pentru substanțele relativ insolubile în apă trebuie testată limita superioară a solubilității, folosind procedee corespunzătoare. Pentru substanțele netoxice, foarte ușor solubile în apă, limita superioară a concentrației se stabilește de la caz la caz. Mod de operare Celulele se tratează o perioadă corespunzătoare, în funcție de sistemul de testare utilizat, acest
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Efectele genei letale dominante determină moartea embrionului sau a fetusului. Inducerea genelor letale dominante prin expunere la o substanță chimică indică faptul că acea substanță a acționat la nivelul țesutului germinativ al speciei testate. Este cunoscut faptul că genele letale dominante se datorează unei anomalii cromozomiale (numerice și structurale). Moartea embrionului, în cazul în care femelele sunt tratate poate fi cauzată și de efecte toxice. În general, masculii se tratează cu substanța de testare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
fi dizolvate sau suspensionate în excipiente corespunzătoare. Excipientul folosit nu trebuie să interfereze chimic cu substanța de testare și nu trebuie să producă efecte toxice. Pentru testarea chimică, se folosesc preparate proaspete. Condiții experimentale Calea de administrare De regulă, compusul testat trebuie administrat o singură dată. Pe baza informațiilor toxicologice se poate utiliza un test cu administrare repetată. Căile normale de administrare sunt: intubarea orală sau injectarea intraperitoneală. Se pot folosi și alte căi de administrare convenabile. Animale de experiență Se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Se utilizează un număr corespunzător de masculi tratați, luând în considerare variația spontană a caracterelor biologice evaluate. Numărul se stabilește în funcție de sensibilitatea predeterminată a detectării și de mărimea semnificației. De exemplu, în cadrul unui test tipic, numărul masculilor din fiecare lot testat trebuie să fie suficient pentru a asigura între 30 - 50 de femele gestante în fiecare perioadă de împerechere. Martori negativi și pozitivi În general, în fiecare experiment se utilizează substanțe martor pozitive și negative. Când experimente efectuate recent în același
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]