4,448 matches
-
de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - specie, linie, vârsta și greutatea animalelor, numărul animalelor pe sexe folosite atât în lotul tratat cât și în lotul martor, - substanța de testare, excipientul, criterii de selecționare a dozelor testate, substanțe folosite ca martor negativ și pozitiv, date de toxicitate, - calea de administrare și schema de tratament, - schema de împerechere, - metoda folosită pentru confirmarea împerecherii, - momentul sacrificării animalelor, - criteriul de inventariere a genelor letale dominante, - relația doză/răspuns, - evaluarea statistică
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
apoi colorate, care se examinează microscopic. Analiza spermatocitelor în stadiul diachineză-metafaza I permite obținerea unor informații suplimentare referitoare la translocarea multivalentă a spermatogoniei, în urma tratamentului. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Substanțele chimice testate se dizolvă în soluție izotonică salină. Dacă sunt insolubile, acestea se dizolvă sau se suspensionează în excipiente corespunzătoare. Se utilizează soluții proaspăt preparate. Excipientul folosit pentru realizarea soluției nu trebuie să interfereze cu substanța de testare și nu trebuie să
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
va fi comparată cu media petelor rezultată de la embrionii tratați doar cu solvent. Testul petei decelează apariția presupuselor mutații somatice ce survin în celulele fetale. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei Pregătire Dacă este posibil, substanțele testate se dizolvă sau se suspensionează în soluție izotonică salină. Substanțele chimice insolubile în apă sunt dizolvate sau suspensionate în excipienți corespunzători. Excipientul nu trebuie să interfereze cu substanța de testare și nu trebuie să producă efecte toxice. Se utilizează soluții
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
posibil, informațiile următoare: ― liniile folosite la împerechere, ― numărul femelelor gestante din loturile de experiment și loturile martor, ― media numărului de pui dintr-o serie, la loturile de experiment și loturile martor, la naștere și la înțărcare; ― nivelurile dozei de substanță testate, ― solventul utilizat; ― ziua de gestație în care s-a efectuat tratamentul; ― calea de administrare; ― numărul total de pui și numărul cu WMVS, MDS și RS la loturile de experiment și loturile martor, ― malformațiile macroscopice, ― relația doză-răspuns la RS dacă este
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
din punct de vedere sexual. Numărul animalelor Numărul de animale necesare depinde de frecvența apariției translocațiilor spontane și de rata minimă de inducție necesară pentru un rezultat pozitiv. De obicei, testul se efectuează pe masculi din prima generație (F1). Trebuie testați cel puțin 500 de masculi F1 pe lot. Dacă experimentul include și femele F1, sunt necesari 300 de masculi și 300 de femele. Martori negativi și pozitivi Ca martori se pot folosi rezultatele obținute de la lotul martor pregătit simultan sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
stabilită prin observații asupra numărului puilor și/sau prin analizarea conținutului uterin la femelele gestante. Criteriile de determinare a fertilități normale sau reduse trebuie stabilite pentru rasa de șoareci folosită. Observații asupra numărului de pui dintr-o serie: Masculii F1 testați sunt puși în cuști individuale cu femele fie din același experiment, fie din colonie. Cuștile se verifică zilnic începând cu a 18-a zi de la împerechere. La fătare, se înregistrează numărul și sexul descendenților F2, care apoi sunt eliminați. Dacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
sau sunt supuse direct analizelor citogenetice. Examinarea conținutului uterin: Reducerea numărului de pui la o fătare în cazul purtătorilor de translocații se datorează morții embrionilor, astfel încât un număr mare de implanturi moarte este un indiciul al prezenței translocațiilor la animalele testate. Masculii F1 testați sunt împerecheați cu două-trei femele fiecare. Momentul concepției se stabilește prin examinarea zilnică, dimineața, în vederea decelării prezenței dopului vaginal. Femelele se sacrifică în a 14 - 16-a zi de gestație, înregistrându-se apoi implanturile vii sau moarte
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
direct analizelor citogenetice. Examinarea conținutului uterin: Reducerea numărului de pui la o fătare în cazul purtătorilor de translocații se datorează morții embrionilor, astfel încât un număr mare de implanturi moarte este un indiciul al prezenței translocațiilor la animalele testate. Masculii F1 testați sunt împerecheați cu două-trei femele fiecare. Momentul concepției se stabilește prin examinarea zilnică, dimineața, în vederea decelării prezenței dopului vaginal. Femelele se sacrifică în a 14 - 16-a zi de gestație, înregistrându-se apoi implanturile vii sau moarte din uterul fiecăreia
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Preparatele testiculare se obțin prin tehnica de uscării la aer. Purtătorii de translocații se identifică prin prezența configurațiilor multivalente la diachineză-metafaza I la nivelul spermatociților primari. Prezența a cel puțin două celule cu asociații multivalente constituie dovada necesară că animalul testat este purtătorul unei translocații. Dacă nu s-a produs nici o selecție prin reproducere, toți masculii F1 se examinează citogenetic. Se analizează microscopic minim 25 de celule în faza de diachineză-metafaza I pentru fiecare mascul. Examinarea metafazei mitotice în spermatogonii sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
referință, rezultatele se indică în protocolul de test. Dicromatul de potasiu poate fi utilizat ca substanță de referință. 1.4. Principiul metodei de testare Culturi cu creștere exponențială de alge verzi selecționate se expun la acțiunea diferitelor concentrații de substanță testată, pe câteva generații, în condiții definite. Se determină inhibarea creșterii prin comparație cu o cultură martor într-o perioadă dată. 1.5. Criterii de calitate 1.5.1. Condiții pentru validitatea testului Concentrația celulară din culturile martor trebuie să crească
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
capricornutum, de exemplu, ATCC 22662, - Scenedesmus subspicatus, de exemplu, 86.81 SAG, - Chlorella vulgaris, CCAP 211/11b Dacă se folosesc alte specii, trebuie raportată sușa. 1.6.1.4. Planul testului Concentrația celulară inițială Concentrația celulară inițială recomandabilă pentru culturile testate este de circa 104 celule/ml pentru Selenastrum capricornutum și Scenedesmus subspicatus. Dacă se folosesc alte specii, biomasa trebuie să fie comparabilă. Concentrațiile substanței de testare Intervalul de concentrații în cadrul căruia este probabilă apariția efectelor se stabilește pe baza rezultatelor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
comparabilă. Concentrațiile substanței de testare Intervalul de concentrații în cadrul căruia este probabilă apariția efectelor se stabilește pe baza rezultatelor din testele de stabilire a intervalelor. Pentru testare, se aleg cel puțin cinci concentrații dispuse în progresie geometrică. La concentrațiile minime testate trebuie să nu se observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate trebuie să inhibeze creșterea cu cel puțin 50 % față de martor și, de preferință, să o oprească total. Culturi replici și martori Planul testului include trei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
stabilește pe baza rezultatelor din testele de stabilire a intervalelor. Pentru testare, se aleg cel puțin cinci concentrații dispuse în progresie geometrică. La concentrațiile minime testate trebuie să nu se observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate trebuie să inhibeze creșterea cu cel puțin 50 % față de martor și, de preferință, să o oprească total. Culturi replici și martori Planul testului include trei replici la fiecare concentrație testată și, în mod ideal, un număr dublu de martori. Dacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate trebuie să inhibeze creșterea cu cel puțin 50 % față de martor și, de preferință, să o oprească total. Culturi replici și martori Planul testului include trei replici la fiecare concentrație testată și, în mod ideal, un număr dublu de martori. Dacă este necesar, planul testului poate fi modificat astfel încât să se mărească numărul de concentrații și să se reducă numărul de replici per concentrație. Dacă se folosește un excipient pentru solubilizarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de o unitate. 1.6.2.2. Testarea substanțelor cu solubilitate scăzută în apă Dacă solubilitatea substanței de testare este de ordinul concentrației maxime folosite în test, sunt necesare doar abateri ușoare de la metoda de mai sus pentru prepararea soluțiilor testate. O soluție saturată poate servi ca soluție de rezervă a substanței de testare. O altă posibilitate poate consta în dizolvarea substanței de testare la concentrația dorită în mediul de alge înaintea introducerii suspensiei de alge. Soluțiile de rezervă ale substanțelor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
fi solvenții organici, emulsificatorii sau dispersanții. Dacă se utilizează un excipient, concentrația nu trebuie să depășească 100 mg/litru, iar în planul testului trebuie incluși martori suplimentari, în care se încorporează excipientul la cea mai mare concentrație prezentă în soluțiile testate. 1.6.2.3. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se pot folosi flacoane de testare închise, cu spațiul liber între capac
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
1)]. Trebuie făcute încercări pentru a determina cantitatea de substanță care rămâne în soluție și se recomandă o atenție deosebită la interpretarea rezultatelor testelor cu substanțe chimice volatile folosind sisteme închise. 2. DATE ȘI EVALUARE Concentrațiile celulare măsurate în culturile testate și culturile martor se înregistrează în tabele împreună cu concentrațiile substanței de testare și momentul măsurătorilor. Valoarea medie a concentrațiilor celulare pentru fiecare concentrație a substanței de testare și pentru martori se reprezintă în funcție de timp (0 - 72 ore) pentru a obține
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează ca diferența dintre zona de sub curba de creștere la cultura martor (Ac) și zona de sub curba de creștere la fiecare concentrație testată (At) prin formula: Valorile IA se reprezintă pe hârtie semilogaritmică sau pe hârtie probit semilogaritmică ca funcții de concentrațiile corespunzătoare. Dacă se reprezintă pe hârtie probit, punctele se unesc printr-o dreaptă trasată cu ochiul liber sau se poate trasa
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
pH-ul soluției la începutul și sfârșitul testului (trebuie să se furnizeze explicații dacă se observă deviații ale pH-ului cu mai mult de 1 unitate), ― excipientul și metoda folosite pentru solubilizarea substanței de testare și concentrația substanței în soluțiile testate, ― intensitatea și calitatea luminii, ― concentrațiile testate (măsurate sau nominale). ― Rezultate: ― concentrația celulară pentru fiecare flacon la fiecare timp de măsurare și metoda pentru măsurarea concentrației celulare, ― valorile medii ale concentrației celulare, ― curbele de creștere, ― prezentarea grafică a relației concentrație-efect, ― valorile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
sfârșitul testului (trebuie să se furnizeze explicații dacă se observă deviații ale pH-ului cu mai mult de 1 unitate), ― excipientul și metoda folosite pentru solubilizarea substanței de testare și concentrația substanței în soluțiile testate, ― intensitatea și calitatea luminii, ― concentrațiile testate (măsurate sau nominale). ― Rezultate: ― concentrația celulară pentru fiecare flacon la fiecare timp de măsurare și metoda pentru măsurarea concentrației celulare, ― valorile medii ale concentrației celulare, ― curbele de creștere, ― prezentarea grafică a relației concentrație-efect, ― valorile CE și metoda de calcul, ― NOEC
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Testul de stabilire a intervalului Intervalul de concentrații care provoacă mortalități de 0 - 100 % se poate determina printr-un test de stabilire a intervalului, care să ofere informații despre domeniul de concentrații ce trebuie folosit în testul final. Substanța trebuie testată la următoarele concentrații: 1000; 100; 10; 1 și 0,1 mg substanță/kg substrat de testare (masă uscată). Dacă urmează să se efectueze un test final, complet, un lot per concentrație și un lot pentru martorul netratat, fiecare cu câte
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
precizând deviația standard. Dacă două concentrații consecutive aflate în raport de 1,8 dau numai 0% și 100% mortalitate, aceste două valori sunt suficiente pentru a indica intervalul în care se află CL50. Amestecul de substrat de bază și substanță testată Dacă este posibil, substratul de testare trebuie preparat fără agenți suplimentari alții decât apa. Imediat înainte de începerea testului, o emulsie sau dispersie de substanță testată în apă deionizată sau alt solvent se amestecă cu substratul de bază sau este pulverizată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
sau testul definitiv), - descrierea exactă a condițiilor experimentale sau mențiunea că testul a fost efectuat în conformitate cu metoda; trebuie raportate orice abateri, - descrierea exactă a modului în care s-a amestecat substanța de testare în substratul de bază, - informații despre organismele testate (specia, vârsta, media și gama de greutate, condiții de păstrare și creștere, furnizor), - metoda folosită pentru determinarea CL50, - rezultatele testului, inclusiv toate datele folosite, - descrierea simptomelor observate sau a modificărilor de comportament ale organismelor testate, - mortalitatea la loturile martor, - CL50
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de bază, - informații despre organismele testate (specia, vârsta, media și gama de greutate, condiții de păstrare și creștere, furnizor), - metoda folosită pentru determinarea CL50, - rezultatele testului, inclusiv toate datele folosite, - descrierea simptomelor observate sau a modificărilor de comportament ale organismelor testate, - mortalitatea la loturile martor, - CL50 sau cea mai mare concentrație testată fără mortalitate și concentrația minimă testată cu mortalitate de 100 % la 14 zile (și opțional 7 zile) de la începerea testului, - trasarea unei diagrame ce conține curba concentrație/răspuns, - rezultatele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
dizolvat sau a consumului chimic de oxigen pentru a evalua biodegradabilitatea totală a substanței de testare. Folosirea simultană a unei metode analitice specifice permite evaluarea biodegradabilității primare a substanței (dispariția structurii chimice inițiale). Metoda este aplicabilă numai acelor substanțe organice testate care la concentrația folosită în test: ― sunt solubile în apă în condițiile experimentale; ― au o presiune de vapori neglijabilă în condițiile experimentale; ― nu sunt inhibitoare pentru bacterii; ― sunt adsorbite în sistemul de testare numai în cantități limitate;. ― nu se pierd
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]