11,250 matches
-
completată cu teste suplimentare după cum prevede diagrama funcțională. NOTĂ: Se utilizează o sursă validată de anticorpi de Ralstonia solanacearum (vezi website-ul http://forum. europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Se recomandă stabilirea titrului pentru fiecare lot nou de anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai mare diluție la care se obține o reacție optimă atunci când se testează o suspensie de 10^5-10^6 celule pe ml din tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se un conjugat corespunzător de
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se un conjugat corespunzător de izotiocianat de fluoresceină (FITC), în conformitate cu recomandările producătorului. Toate antiserurile policlonale validate au un titru de imunofluorescență de cel puțin 1: 2.000. La efectuarea testului, diluțiile de lucru ale anticorpilor trebuie să fie aproximativ egale sau egale cu cele ale titrului. Testul trebuie efectuat cu extracte de probe proaspăt preparate. După caz, se pot folosi și extracte conservate în soluție de glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68°C și
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
de 1/4 din titru (T/4), 1/2 din titru (T/2), titru (T) și de două ori titrul (2T). (îi) În conformitate cu metoda de pregătire a lamelor-test indicată la punctul 5.1(îi): Se prepară diluția de lucru a anticorpilor în tampon IF. Diluția de lucru are efect asupra specificității. Figura 1: Pregătirea lamei-test în conformitate cu pct. 5.1 (i) și 5.3 (i) Diluții ale extractului concentrat resuspendat 1/100 1/1 1/1 1/1 1/1 Diluții ale
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
1 (i) și 5.3 (i) Diluții ale extractului concentrat resuspendat 1/100 1/1 1/1 1/1 1/1 Diluții ale extractului concentrat resuspendat (T = T/2 T/4 T/2 T 2T Diluții duble ale titru) antiserului/anticorpilor Figura 2: Pregătirea lamei-test în conformitate cu pct. 5.1 (îi) și 5.3 (îi) Diluție de lucru a antiserului/anticorpilor Diluție zecimală a sedimentului resuspendat 1/1 1/10 1/100 gol gol 5.3.1. Lamele se așază pe hârtie
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
1/1 Diluții ale extractului concentrat resuspendat (T = T/2 T/4 T/2 T 2T Diluții duble ale titru) antiserului/anticorpilor Figura 2: Pregătirea lamei-test în conformitate cu pct. 5.1 (îi) și 5.3 (îi) Diluție de lucru a antiserului/anticorpilor Diluție zecimală a sedimentului resuspendat 1/1 1/10 1/100 gol gol 5.3.1. Lamele se așază pe hârtie absorbantă umedă. Se acoperă complet fiecare godeu de test cu diluția sau diluțiile de anticorpi. Volumul de antiser pipetat
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
de lucru a antiserului/anticorpilor Diluție zecimală a sedimentului resuspendat 1/1 1/10 1/100 gol gol 5.3.1. Lamele se așază pe hârtie absorbantă umedă. Se acoperă complet fiecare godeu de test cu diluția sau diluțiile de anticorpi. Volumul de antiser pipetat în fiecare godeu trebuie să fie cel puțin echivalent cu volumul de extract pipetat pe lamă. Următoarea procedură ar trebui aplicată în absența instrucțiunilor specifice ale furnizorilor de anticorpi: 5.3.2. Se incubează lamele pe
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
de test cu diluția sau diluțiile de anticorpi. Volumul de antiser pipetat în fiecare godeu trebuie să fie cel puțin echivalent cu volumul de extract pipetat pe lamă. Următoarea procedură ar trebui aplicată în absența instrucțiunilor specifice ale furnizorilor de anticorpi: 5.3.2. Se incubează lamele pe hârtie umedă acoperite timp de 30 de minute la temperatura ambiantă (18-25°C). 5.3.3. Se îndepărtează antiserul de pe fiecare lamă și se spală lamele cu atenție cu tamponul IF. Se spală
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
cu o hârtie de filtru. 5.3.4. Lamele se așază pe hârtie umedă. Se acoperă godeurile lamelor-test cu diluții ale conjugatului FITC utilizat pentru determinarea titrului. Volumul de conjugat pipetat în godeuri trebuie să fie egal cu volumul de anticorpi pipetat. 5.3.5. Se incubează lamele pe hârtie umedă, acoperite, timp de 30 de minute la temperatura ambiantă (18-25°C). 5.3.6. Se îndepărtează conjugatul de pe lamă. Se spală în conformitate cu cele indicate anterior (pct. 5.3.3). Se
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
lungul perimetrului. Pentru probele fără celule sau cu un număr redus de celule se examinează cel puțin 40 câmpuri microscopice. Se verifică mai întâi lama de control pozitiv. Celulele trebuie să fie intens fluorescente și colorate complet la titrul de anticorpi sau la diluția de lucru determinată. Testul IF (pct. 5) trebuie repetat în cazul în care apare o colorație anormală. 5.4.2. Se caută prezența celulelor intens fluorescente cu morfologie caracteristică bacteriei Ralstonia solanacearum în godeurile lamelor-test (vezi website-ul
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
intens fluorescente cu morfologie caracteristică bacteriei Ralstonia solanacearum în godeurile lamelor-test (vezi website-ul http://forum.europa.eu.int/ Public/irc/sanco/Home/main). Intensitatea fluorescenței trebuie să fie echivalentă cu cea a tulpinii de control pozitiv la aceeași diluție de anticorpi. Celulele cu colorație incompletă sau cu fluorescență slabă nu trebuie luate în considerare. În cazul în care se suspectează o contaminare, testul trebuie repetat. Acest lucru se poate întâmpla atunci când în toate lamele unei serii de analize se observă celule
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
precum și bacterii saprofite care pot conduce la reacții încrucișate, având mărime și morfologie asemănătoare cu Ralstonia solanacearum. 5.4.4. Trebuie luate în considerare numai celulele fluorescente ale căror dimensiune și morfologie sunt caracteristice titrului sau diluției de lucru a anticorpilor menționați la pct. 5.3. 5.4.5. Interpretarea testului IF: (i) În cazul în care se observă celule intens fluorescente cu morfologie caracteristică, se determină numărul mediu de celule tipice pe câmp microscopic și se calculează numărul de celule
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
control pozitiv folosindu-se filtrul cu rodamină. 8. Testele ELISA Principiu Testul ELISA nu poate fi utilizat ca test secundar pe lângă testele IF, PCR sau FISH din cauza sensibilității sale relativ slabe. În cazul aplicării metodei DAS-ELISA, îmbogățirea probelor și utilizarea anticorpilor monoclonali sunt obligatorii (vezi website-ul http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/ Home/main). Îmbogățirea probelor înainte de efectuarea testului ELISA poate fi utilă pentru creșterea sensibilității acestuia, dar poate să inhibe testul din cauza competiției cu alte organisme prezente în
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
eu.int/Public/irc/sanco/ Home/main). Îmbogățirea probelor înainte de efectuarea testului ELISA poate fi utilă pentru creșterea sensibilității acestuia, dar poate să inhibe testul din cauza competiției cu alte organisme prezente în probă. NOTĂ: Se folosește o sursă validată de anticorpi de Ralstonia solanacearum (vezi website-ul http://forum.europa.eu.int/ Public/irc/sanco/Home/main). Se recomandă să se determine titrul pentru fiecare lot nou de anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai mare diluție la care se obține
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
cu alte organisme prezente în probă. NOTĂ: Se folosește o sursă validată de anticorpi de Ralstonia solanacearum (vezi website-ul http://forum.europa.eu.int/ Public/irc/sanco/Home/main). Se recomandă să se determine titrul pentru fiecare lot nou de anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai mare diluție la care se obține o reacție optimă atunci când se testează o suspensie de 10^5-10^6 celule pe ml din tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se conjugate corespunzătoare de anticorpi
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
anticorpi. Titrul se definește ca fiind cea mai mare diluție la care se obține o reacție optimă atunci când se testează o suspensie de 10^5-10^6 celule pe ml din tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se conjugate corespunzătoare de anticorpi secundari, în conformitate cu recomandările producătorului. La efectuarea testului, diluția de lucru a anticorpilor trebuie să fie aproximativ egală sau egală cu cea a titrului formulei comerciale. Se determină titrul anticorpilor pentru o suspensie de 10^5-10^6 celule/ml dintr-o
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
se obține o reacție optimă atunci când se testează o suspensie de 10^5-10^6 celule pe ml din tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se conjugate corespunzătoare de anticorpi secundari, în conformitate cu recomandările producătorului. La efectuarea testului, diluția de lucru a anticorpilor trebuie să fie aproximativ egală sau egală cu cea a titrului formulei comerciale. Se determină titrul anticorpilor pentru o suspensie de 10^5-10^6 celule/ml dintr-o tulpină omologă de Ralstonia solanacearum. Drept controale negative se utilizează un extract
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
din tulpina omologă de Ralstonia solanacearum folosindu-se conjugate corespunzătoare de anticorpi secundari, în conformitate cu recomandările producătorului. La efectuarea testului, diluția de lucru a anticorpilor trebuie să fie aproximativ egală sau egală cu cea a titrului formulei comerciale. Se determină titrul anticorpilor pentru o suspensie de 10^5-10^6 celule/ml dintr-o tulpină omologă de Ralstonia solanacearum. Drept controale negative se utilizează un extract de probă care a dat anterior rezultate negative pentru Ralstonia solanacearum și o suspensie bacteriană preparată în
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
extractele din godeuri. Se spală godeurile de 3 ori cu PBS-Tween (apendicele 4), lăsând ultima soluție de spălare în godeuri cel puțin 5 minute. (5) Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului anti-Ralstonia solanacearum în tampon de saturație (apendicele 4). Pentru anticorpii comerciali validați, se folosesc diluțiile recomandate (de obicei, de două ori mai concentrate decât titrul). ... (6) Se pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37°C. ... (7) Se îndepărtează soluția de anticorpi din godeuri și
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
apendicele 4). Pentru anticorpii comerciali validați, se folosesc diluțiile recomandate (de obicei, de două ori mai concentrate decât titrul). ... (6) Se pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37°C. ... (7) Se îndepărtează soluția de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior [pct. (4)]. ... (8) Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat secundar de anticorpi și de fosfatază alcalină în tampon de saturație Se pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37°C. ... (7) Se îndepărtează soluția de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior [pct. (4)]. ... (8) Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat secundar de anticorpi și de fosfatază alcalină în tampon de saturație Se pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37°C. ... (9) Se îndepărtează conjugatul de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior [pct. (4
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
pct. (4)]. ... (8) Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat secundar de anticorpi și de fosfatază alcalină în tampon de saturație Se pipetează 100 f2μl în fiecare godeu și se incubează o oră la 37°C. ... (9) Se îndepărtează conjugatul de anticorpi din godeuri și se spală în conformitate cu cele indicate anterior [pct. (4)]. ... (10) Se pipetează 100 f2μl de soluție de substrat de fosfatază alcalină (apendicele 4) în fiecare godeu. Se incubează în întuneric la temperatura ambiantă și se măsoară absorbanța la
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
se adaugă controlul pozitiv și negativ în câte două godeuri pe fiecare placă. Se incubează timp de 16 ore la 4°C. (3) Se spală godeurile de 3 ori cu PBS-Tween (apendicele 4). ... (4) Se prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici Ralstonia solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se pipetează 190 f2μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37°C. ... (5) Se spală godeurile de 3 ori cu PBS-Tween
ORDIN nr. 586 din 13 iulie 2007 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/189771_a_191100]
-
agenți chimici de război și care accelerează viteza de degradare a acestora. Notă tehnică "Enzime" înseamnă "biocatalizatori" pentru reacții chimice specifice sau biochimice specifice. "Biopolimeri" (ML7, ML22) Macromolecule biologice, după cum urmează: a) enzime pentru reacții chimice sau biochimice specifice; ... b) anticorpi monoclonali, policlonali sau antiidiotipici; ... c) receptori special concepuți sau special prelucrați; ... Note tehnice 1. "Anticorpi antiidiotipici" înseamnă anticorpi care sunt legați în punctele de legătură ale antigenei specifice a altor anticorpi. 2. "Anticorpi monoclonali" înseamnă proteine care sunt legate la
HOTĂRÂRE nr. 924 din 7 august 2007 pentru aprobarea Listei cuprinzând produsele militare supuse regimului de control al exporturilor, importurilor şi altor operaţiuni. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/190301_a_191630]
-
înseamnă "biocatalizatori" pentru reacții chimice specifice sau biochimice specifice. "Biopolimeri" (ML7, ML22) Macromolecule biologice, după cum urmează: a) enzime pentru reacții chimice sau biochimice specifice; ... b) anticorpi monoclonali, policlonali sau antiidiotipici; ... c) receptori special concepuți sau special prelucrați; ... Note tehnice 1. "Anticorpi antiidiotipici" înseamnă anticorpi care sunt legați în punctele de legătură ale antigenei specifice a altor anticorpi. 2. "Anticorpi monoclonali" înseamnă proteine care sunt legate la o antigenă și sunt produse de o singură clonă de celule. 3. "Anticorpi policlonali" înseamnă
HOTĂRÂRE nr. 924 din 7 august 2007 pentru aprobarea Listei cuprinzând produsele militare supuse regimului de control al exporturilor, importurilor şi altor operaţiuni. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/190301_a_191630]
-
reacții chimice specifice sau biochimice specifice. "Biopolimeri" (ML7, ML22) Macromolecule biologice, după cum urmează: a) enzime pentru reacții chimice sau biochimice specifice; ... b) anticorpi monoclonali, policlonali sau antiidiotipici; ... c) receptori special concepuți sau special prelucrați; ... Note tehnice 1. "Anticorpi antiidiotipici" înseamnă anticorpi care sunt legați în punctele de legătură ale antigenei specifice a altor anticorpi. 2. "Anticorpi monoclonali" înseamnă proteine care sunt legate la o antigenă și sunt produse de o singură clonă de celule. 3. "Anticorpi policlonali" înseamnă un amestec de
HOTĂRÂRE nr. 924 din 7 august 2007 pentru aprobarea Listei cuprinzând produsele militare supuse regimului de control al exporturilor, importurilor şi altor operaţiuni. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/190301_a_191630]