493 matches
-
neutru. De obicei pH-ul optim coincide cu pH-ul lichidelor biologice în care enzimele își desfășoară activitatea. Astfel, în cavitatea bucală, saliva are o reacție neutră, ceea ce face ca acest pH (6, 9, 7) să fie optim pentru activitatea amilazei salivare; în stomac, unde mediul este acid, acționează pepsina care are pH-ul optim de 1,5 2. Sucul pancreatic este alcalin, iar enzimele prezente în acesta tripsina, chimotripsina acționează la pH optim între 8 8,6. La majoritatea enzimelor
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
acesta tripsina, chimotripsina acționează la pH optim între 8 8,6. La majoritatea enzimelor din plante pH-ul optim este în jur de 7 Tabel 11 pH -ul optim al unor enzime Enzima pH optim Pepsina gastrică 1,5 2 * amilaza salivară sau pancreatică 6,9 7 Lipaza pancreatică 7,5 8 Tripsina pancreatică 8 Chimotripsina pancreatică 8 8,6 Fosfataza alcalină din os și ficat 8,6 9,1 Fosfataza acidă din prostată 5,0 5,6 Vitezei de reacție
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
Celobiaza, o *glucozidază, care scindează hidrolitic legătura *-1,4 glicozidică din celuloză, cu eliberare a doi moli de *glucoză. Glicozid hidrolazele care catalizează reacția de hidroliză a amidonului și glicogenului până la faza de maltoză și glucoză se mai numesc și amilaze. În organismul animal amilazele se găsesc în salivă, mușchi, ficat, intestin, sânge. Amilazele sunt de mai multe tipuri: *-amilazele (endoamilaze) care scindează legăturile glicozidice din interiorul lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine: * amilaze (exoamilaze) care scindează legăturile glicozidice
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
scindează hidrolitic legătura *-1,4 glicozidică din celuloză, cu eliberare a doi moli de *glucoză. Glicozid hidrolazele care catalizează reacția de hidroliză a amidonului și glicogenului până la faza de maltoză și glucoză se mai numesc și amilaze. În organismul animal amilazele se găsesc în salivă, mușchi, ficat, intestin, sânge. Amilazele sunt de mai multe tipuri: *-amilazele (endoamilaze) care scindează legăturile glicozidice din interiorul lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine: * amilaze (exoamilaze) care scindează legăturile glicozidice de la capetele lanțului poliglucidic
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
eliberare a doi moli de *glucoză. Glicozid hidrolazele care catalizează reacția de hidroliză a amidonului și glicogenului până la faza de maltoză și glucoză se mai numesc și amilaze. În organismul animal amilazele se găsesc în salivă, mușchi, ficat, intestin, sânge. Amilazele sunt de mai multe tipuri: *-amilazele (endoamilaze) care scindează legăturile glicozidice din interiorul lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine: * amilaze (exoamilaze) care scindează legăturile glicozidice de la capetele lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine; 1,6 amilaze
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
glucoză se mai numesc și amilaze. În organismul animal amilazele se găsesc în salivă, mușchi, ficat, intestin, sânge. Amilazele sunt de mai multe tipuri: *-amilazele (endoamilaze) care scindează legăturile glicozidice din interiorul lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine: * amilaze (exoamilaze) care scindează legăturile glicozidice de la capetele lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine; 1,6 amilaze care scindează legăturile 1,6 din amilopectină intervenind în procesul de deramificare a glicogenului sau amidonului. Celulazele sunt enzime care catalizează hidroliza
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
Amilazele sunt de mai multe tipuri: *-amilazele (endoamilaze) care scindează legăturile glicozidice din interiorul lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine: * amilaze (exoamilaze) care scindează legăturile glicozidice de la capetele lanțului poliglucidic cu formare de maltoză și dextrine; 1,6 amilaze care scindează legăturile 1,6 din amilopectină intervenind în procesul de deramificare a glicogenului sau amidonului. Celulazele sunt enzime care catalizează hidroliza legăturilor *-1,4 glicozidice din molecula celulozei până la faza de celobioză și în final glucoză. Aceste enzime se
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
aparițiua unei colorații albastre, fapt care indică activitatea peroxidazei din sînge. In mod similar prezența peroxidazei din lapte se evidențiază prin apariția unei colorații albastre (cu nuanță verde) datorită formării albastrului de benzidină. 6.8.1.2. Evidențierea activității α amilazei Amilazele sunt enzime care fac parte din clasa hidrolaze. Ele sunt răspândite atât în organismul animal cât și în cel vegetal; α-amilazele sunt prezente în salivă, intestinul subțire, mușchi, ficat, sânge, spermă. Amilazele catalizează scindarea hidrolitică a amidonului și a
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
unei colorații albastre, fapt care indică activitatea peroxidazei din sînge. In mod similar prezența peroxidazei din lapte se evidențiază prin apariția unei colorații albastre (cu nuanță verde) datorită formării albastrului de benzidină. 6.8.1.2. Evidențierea activității α amilazei Amilazele sunt enzime care fac parte din clasa hidrolaze. Ele sunt răspândite atât în organismul animal cât și în cel vegetal; α-amilazele sunt prezente în salivă, intestinul subțire, mușchi, ficat, sânge, spermă. Amilazele catalizează scindarea hidrolitică a amidonului și a glicogenului
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
6.8.1.2. Evidențierea activității α amilazei Amilazele sunt enzime care fac parte din clasa hidrolaze. Ele sunt răspândite atât în organismul animal cât și în cel vegetal; α-amilazele sunt prezente în salivă, intestinul subțire, mușchi, ficat, sânge, spermă. Amilazele catalizează scindarea hidrolitică a amidonului și a glicogenului până la stadiul de maltoză. Ca produși intermediari se obțin dextrinele care, în funcție de masa lor moleculară, determină, în prezența iodului, apariția unor colorații caracteristice: albastră-violetă (pentru amilodextrine), roșie (pentru eritrodextrine) și galbenă (pentru
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
prezența iodului, apariția unor colorații caracteristice: albastră-violetă (pentru amilodextrine), roșie (pentru eritrodextrine) și galbenă (pentru flavodextrine). Acrodextrinele având o masă moleculară mai mică nu se colorează în prezența iodului. Principiul metodei O soluție de amidon ca substrat se incubează cu amilază salivară la temperatura de 370C. Hidroliza enzimatică a amidonului se evidențiază prin reacția cu iodul, iar apariția maltozei, ca produs final al acțiunii amilazei, prin reacția Fehling. Prezența maltozei în mediul de reacție indică hidroliza completă a amidonului. Activitatea enzimatică
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
se colorează în prezența iodului. Principiul metodei O soluție de amidon ca substrat se incubează cu amilază salivară la temperatura de 370C. Hidroliza enzimatică a amidonului se evidențiază prin reacția cu iodul, iar apariția maltozei, ca produs final al acțiunii amilazei, prin reacția Fehling. Prezența maltozei în mediul de reacție indică hidroliza completă a amidonului. Activitatea enzimatică este invers proporțională cu timpul de hidroliză. R e a c t i v i: * Soluție de amidon 1 % * Soluție de iod în iodură
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
maltozei în mediul de reacție indică hidroliza completă a amidonului. Activitatea enzimatică este invers proporțională cu timpul de hidroliză. R e a c t i v i: * Soluție de amidon 1 % * Soluție de iod în iodură de potasiu 0,3 % * Amilază salivară: se colectează salivă într o eprubetă; după filtrare se diluează în raportul 1/10 cu apă distilată * Reactiv Fehling (I, II) Mod de lucru: Intr-o eprubetă se măsoară 10 cm3 soluție de amidon și se incubează minute într-
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
cu apă distilată * Reactiv Fehling (I, II) Mod de lucru: Intr-o eprubetă se măsoară 10 cm3 soluție de amidon și se incubează minute într-o baie de apă la temperatura de 370C. Se adaugă 0,5 cm3 soluție de amilază, se omogenizează și se introduce din nou în baia de apă. Din amestecul de reacție se colectează la intervale de 2-3 minute, probe de câte 1 cm3 și se adaugă în fiecare probă 2 picături soluție de iod. Se obține
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
care s a atins punctul acromic. Se efectuează reacția Fehling pentru punerea în evidență a maltozei ca produs final al hidrolizei enzimatice a amidonului. Interpretarea rezultatelor Prezența maltozei (diglucid reducător) ca produs final al hidrolizei enzimatice a amidonului sub acțiunea amilazei - este indicată de apariția precipitatului roșu-cărămiziu de oxid cupros (Cu2O). Gama de culori constatată în decursul hidrolizei enzimatice denotă prezența dextrinelor care, în funcție de masa lor moleculară, se colorează diferit cu iodul. 6.8.2. Factorii care influențează activitatea enzimatică Enzimele
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
de temperatură: 370C (temperatura optimă) și 600 C. Se urmărește evoluția procesului de hidroliză enzimatică prin efectuarea reacției de culoare cu iodul și a reacției Fehling. Reactivi * Soluție de amidon 1 % * Soluție de iod în iodură de potasiu 0,3 % *Amilază salivară: (diluată în raport de 1/10 cu apă distilată) * Reactiv Fehling (I, II) Mod de lucru Tehnica pentru evidențierea activității amilazei salivare la temperatura de 370C se bazează pe procedeul menționat anterior. Pentru evidențierea efectului temperaturii de 600C asupra
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
și a reacției Fehling. Reactivi * Soluție de amidon 1 % * Soluție de iod în iodură de potasiu 0,3 % *Amilază salivară: (diluată în raport de 1/10 cu apă distilată) * Reactiv Fehling (I, II) Mod de lucru Tehnica pentru evidențierea activității amilazei salivare la temperatura de 370C se bazează pe procedeul menționat anterior. Pentru evidențierea efectului temperaturii de 600C asupra activității enzimatice se procedează identic, dar în condiții de inactivare termică a enzimei.Soluția de amilază salivară conținută într-o eprubetă se
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
de lucru Tehnica pentru evidențierea activității amilazei salivare la temperatura de 370C se bazează pe procedeul menționat anterior. Pentru evidențierea efectului temperaturii de 600C asupra activității enzimatice se procedează identic, dar în condiții de inactivare termică a enzimei.Soluția de amilază salivară conținută într-o eprubetă se menține câteva minute pe o baie de apă la temperatura de 600C înainte de a fi pusă în contact cu substratul de reacție, și anume, cu soluția de amidon. Se efectuează reacția cu iodul și
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pe o baie de apă la temperatura de 600C înainte de a fi pusă în contact cu substratul de reacție, și anume, cu soluția de amidon. Se efectuează reacția cu iodul și reacția Fehling. Rezultate și interpretare La temperatură ridicată (600C), amilaza suferă un proces de denaturare termică însoțit de inactivarea sa. Ca urmare, enzima pierde proprietatea catalitică de a hidroliza amidonul. Amidonul rămas nehidrolizat reacționează cu iodul, obținîndu-se culoarea albastră caracteristică. Reacția Fehling este de asemenea, negativă, deoarece amilaza fiind denaturată
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
ridicată (600C), amilaza suferă un proces de denaturare termică însoțit de inactivarea sa. Ca urmare, enzima pierde proprietatea catalitică de a hidroliza amidonul. Amidonul rămas nehidrolizat reacționează cu iodul, obținîndu-se culoarea albastră caracteristică. Reacția Fehling este de asemenea, negativă, deoarece amilaza fiind denaturată termic nu produce hidroliza amidonului cu formare de maltoză care să reducă reactivul Fehling. In consecință, nu se constată apariția precipitatului roșu-cărămiziu de Cu2O. 6.8.2.2. Influența pH-ului Enzimele își manifestă activitatea lor catalitică într-
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
enzimatici. Modificări mai mult sau mai puțin accentuate în raport cu valoarea pH-ului optim determină, de regulă, o diminuare sau chiar o inhibare a activității enzimatice. Principiul metodei Se determină la temperatura optimă (370C) și la valori diferite de pH activitatea amilazei salivare, prin măsurarea timpului în care substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
amilazei salivare, prin măsurarea timpului în care substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat). * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilază salivară (diluată 1/10). * Soluție de KH2PO4 6,6 · 10-2 m (9,080 g/l). * Soluție de 6,6 · 10-2 m (9,4790 g/l
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat). * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilază salivară (diluată 1/10). * Soluție de KH2PO4 6,6 · 10-2 m (9,080 g/l). * Soluție de 6,6 · 10-2 m (9,4790 g/l). Din ultimele două soluții se prepară: * Soluție tampon fosfați de pH=5,2 (98,0
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pH=8,2 Amidon Tampon fosfați pH=5,2 Tampon fosfați pH=6,8 Tampon fosfați pH=8,2 5,0 2,0 5,0 2,0 5,0 2,0 Se incubează 5 minute la 370C Ulterior se adaugă: Amilază salivară 0,5 0,5 0,5 Eprubetele conținând probele respective se mențin pe baie de apă la 370C. La intervale de timp diferite (3, 5, 7, 15, 20 de minute) se colectează probe de câte 1 cm3. Se adaugă
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
la pH=6,8, punctul acromic atingându-se în aproximativ 10 minute. La valorile de pH 5,2 și 8,2 viteza de reacție este redusă, punctul acromic atingându-se în aproximativ 20 de minute. In concluzie, activitatea optimă a amilazei salivare este la pH = 6,8. 6.8.2.3. Influența efectorilor enzimatici Efectorii enzimatici sunt substanțe de natură chimică diferită care modifică activitatea enzimatică, respectiv viteza reacțiilor enzimatice. In funcție de acțiunea pe care o exercită asupra enzimelor, efectorii pot
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]