5,517 matches
-
în evidență a infecției poate fi făcută folosind testele de inhibare hemaglutinică în conformitate cu capitolele 5 și 6. Dacă subtipul hemaglutinic nu este cunoscut, prezența infecției cu virusuri de pestă A poate fi demonstrată prin detectarea anticorpilor direct din grupa de antigene specifică. În acest scop se poate folosi fie testul de imuno-dublă difuzie (conform descrierii din capitolul 9), fie un test ELISA (o problemă a ELISA este specificitatea gazdei, deoarece este dependentă de detectarea imunoglobulinelor gazdei). Păsările acvatice rareori dau rezultate
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
din efectiv sau mai mult este pozitiv, indiferent de mărimea efectivului). Sângele trebuie lăsat să se închege, iar serul se extrage pentru testări. (b) Examinarea pentru anticorpi Probele individuale de ser se testează pentru abilitatea lor de a inhiba hemaglutinarea antigenului virusului pestei, cu teste standard de inhibare hemaglutinică definite în capitolul 6. Există anumite discuții pe marginea faptului dacă ar trebui folosite 4 sau 8 unități hemaglutinice pentru testele H1. Se pare că ambele sunt valabile și alegerea este lăsată
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
de inhibare hemaglutinică definite în capitolul 6. Există anumite discuții pe marginea faptului dacă ar trebui folosite 4 sau 8 unități hemaglutinice pentru testele H1. Se pare că ambele sunt valabile și alegerea este lăsată la latitudinea laboratoarelor naționale. Oricum, antigenul folosit va afecta nivelul la care serul este considerat pozitiv; pentru 4 HAU un ser pozitiv este unul care prezintă un titru de 2 sau mai mare, pentru 8 HAU un ser pozitiv este acela care prezintă un titru de
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
precisă pentru determinarea titrului HA este de a face teste HA pe virusuri de la o diferență mică față de diluțiile inițiale, adică 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, etc. Această metodă se recomandă pentru o preparare mai precisă a antigenelor pentru testele de inhibare hemaglutinică (capitolul 6). CAPITOLUL 6 Testul de inhibare hemaglutinică (HI) Reactivi 1. Soluție tamponată cu fosfat (STF). 2. Virus care conține fluid alantoid diluat cu STF pentru a conține 4 sau 8 HAU la 0,025
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
unui strat de tripsină. Dacă tripsina nu este prezentă în strat, doar virusurile virulente pentru găini vor produce plăci. CAPITOLUL 9 Imuno-dubla difuzie Metoda recomandată pentru a evidenția prezența virusului pestei A este de a demonstra faptul că nucleocapsula sau antigenii matricei sunt comune tuturor virusurilor pestei A. Acest lucru se face în general prin teste de imuno-dublă difuzie, care cuprind fie preparate concentrate de virusuri, fie extracte de la membrane corioalantoide infectate. Preparatele concentrate adecvate de virusuri se pot obține prin
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
cuprind fie preparate concentrate de virusuri, fie extracte de la membrane corioalantoide infectate. Preparatele concentrate adecvate de virusuri se pot obține prin simpla centrifugare la viteză mare a fluidelor alantoide infectate și prin fragmentarea virusului pentru a elimina nucleocapsula internă și antigenii matricei prin tratament cu detergent sarcozinat de sodiu lauril. Precipitarea acidului poate fi folosită prin adăugare de 1N HCL în fluidele alantoide infectate pentru a da la final un pH de 3,5-4,0, apoi răcind la 0C timp
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
Supernatantul poate fi îndepărtat și precipitatul care conține virusul poate fi resuspendat într-un volum minim de glicină-sarcozil tamponat (1% sarcozinat de sodiu lauril la pH 9,0 cu glicină 0,5 M). Aceste preparate conțin atât nucleocapsula cât și antigenii matricei. Beard (1970) a descris prepararea de nucleocapsule bogate în antigen din membrane corioalantoide prelevate de la ouă infectate. Această metodă presupune: îndepărtarea membranelor corioalantoide de la ouă hemaglutinice pozitive infectate, omogenizarea membranelor, congelare și decongelare repetată de 3 ori și urmată
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
resuspendat într-un volum minim de glicină-sarcozil tamponat (1% sarcozinat de sodiu lauril la pH 9,0 cu glicină 0,5 M). Aceste preparate conțin atât nucleocapsula cât și antigenii matricei. Beard (1970) a descris prepararea de nucleocapsule bogate în antigen din membrane corioalantoide prelevate de la ouă infectate. Această metodă presupune: îndepărtarea membranelor corioalantoide de la ouă hemaglutinice pozitive infectate, omogenizarea membranelor, congelare și decongelare repetată de 3 ori și urmată de o centrifugare la 1 000 g timp de 10 minute
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
infectate, omogenizarea membranelor, congelare și decongelare repetată de 3 ori și urmată de o centrifugare la 1 000 g timp de 10 minute. Granula este îndepărtată, iar supernatantul este tratat cu 0,1% formol pentru a fi folosit ulterior ca antigen. Oricare dintre aceste două antigene poate fi folosită în testele de imuno-dublă difuzie folosind 1% agaroză sau agar, geluri care conțin 8,0% clorură de sodiu adusă la o soluție tamponată de fosfat de 0,1 M și pH 7
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
decongelare repetată de 3 ori și urmată de o centrifugare la 1 000 g timp de 10 minute. Granula este îndepărtată, iar supernatantul este tratat cu 0,1% formol pentru a fi folosit ulterior ca antigen. Oricare dintre aceste două antigene poate fi folosită în testele de imuno-dublă difuzie folosind 1% agaroză sau agar, geluri care conțin 8,0% clorură de sodiu adusă la o soluție tamponată de fosfat de 0,1 M și pH 7,2. Virusul pestei A este
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
difuzie folosind 1% agaroză sau agar, geluri care conțin 8,0% clorură de sodiu adusă la o soluție tamponată de fosfat de 0,1 M și pH 7,2. Virusul pestei A este confirmat prin liniile de precipitare formate de antigenul de testare și de antigenul considerat pozitiv împotriva unui antiser cunoscut și el ca fiind pozitiv care, amestecate, formează o linie de identitate. ANEXA IV LISTA LABORATOARELOR NAȚIONALE PENTRU PESTA AVIARĂ Belgia Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, B-1180
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
agar, geluri care conțin 8,0% clorură de sodiu adusă la o soluție tamponată de fosfat de 0,1 M și pH 7,2. Virusul pestei A este confirmat prin liniile de precipitare formate de antigenul de testare și de antigenul considerat pozitiv împotriva unui antiser cunoscut și el ca fiind pozitiv care, amestecate, formează o linie de identitate. ANEXA IV LISTA LABORATOARELOR NAȚIONALE PENTRU PESTA AVIARĂ Belgia Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, B-1180 Bruxelles Danemarca National Veterinary Laboratory
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
rapide de detectare a virusului maladiei de Newcastle la păsările vaccinate și detectarea anticorpilor la păsările nevaccinate. 1. Detectarea virusului maladiei de Newcastle Pentru diagnosticarea infecțiilor la păsările vaccinate au fost utilizate diferite teste rapide care permit detectarea directă a antigenilor maladiei de Newcastle. Testele cel mai des utilizate până în prezent sunt testele cu anticorpi fluorescenți pe secțiuni longitudinale ale traheei și testele cu anticorpi cu peroxidază pe encefal. Se pot folosi, de asemenea, alte teste de detectare directă a antigenului
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
antigenilor maladiei de Newcastle. Testele cel mai des utilizate până în prezent sunt testele cu anticorpi fluorescenți pe secțiuni longitudinale ale traheei și testele cu anticorpi cu peroxidază pe encefal. Se pot folosi, de asemenea, alte teste de detectare directă a antigenului pentru infecțiile cauzate de virusul maladiei de Newcastle. Inconvenientul acestora este că nu se poate realiza examinarea tuturor siturilor potențiale de replicare a virusului maladiei de Newcastle la păsările vaccinate. De exemplu, faptul că nu există o dovadă evidentă a
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
puțin 25% dintre păsările din efectiv sunt pozitive, indiferent de numărul total al păsărilor din efectiv). În vederea efectuării testului sângele se lasă să se coaguleze și se extrage serul. (b) Depistarea anticorpilor Capacitatea eșantioanelor individuale de ser de a inhiba antigenul hemaglutinant al virusului maladiei de Newcastle trebuie verificată prin testele standard de inhibare a hemaglutinării descrise în capitolul 6. În ceea ce privește necesitatea de a utiliza patru sau opt unități hemaglutinante pentru testul de inhibare a hemaglutinării, părerile sunt împărțite. Se pare
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
descrise în capitolul 6. În ceea ce privește necesitatea de a utiliza patru sau opt unități hemaglutinante pentru testul de inhibare a hemaglutinării, părerile sunt împărțite. Se pare că ambele soluții sunt valabile, iar alegerea ar trebui lăsată la latitudinea laboratoarelor naționale. Totuși antigenul utilizat va afecta nivelul la care se consideră că un ser este pozitiv: cu patru unități hemaglutinante se consideră pozitiv orice ser al cărui titru este mai mare sau egal cu 24, iar cu opt unități hemaglutinante orice ser al
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
Alsever. Se spală celulele de trei ori cu tampon fosfat salin înainte de utilizare. Pentru celălalt test se recomandă o suspensie de 1% (valoarea hematocritului) în tampon fosfat salin. 3. Se recomandă sușa Ulster 2C a virusului maladiei de Newcastle ca antigen standard. Metoda (a) Se distribuie 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu al unei microplăci de plastic (se utilizează forme în V). (b) Se toarnă 0,025 ml de suspensie de virus (adică lichid alantoidian) în primul
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
precisă de determinare a titlului hemaglutinant constă în realizarea testelor HA pe virusuri provenind dintr-o gamă completă de diluție inițială de tip 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, etc. Această metodă este recomandată pentru prepararea precisă a antigenului destinat reacției de inhibare a hemaglutinării (vezi cap. 6). CAPITOLUL 6 Reacția de inhibare a hemaglutinării - test (HI) Reactivi (vezi capitolul 5) (a) Tampon fosfat salin. (b) Lichid alantoidian conținând virusul, diluat în tampon fosfat salin, și patru sau opt
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
o reacție pozitivă, se efectuează un control complementar asupra fiecărui animal al exploatării prin intermediul unui test fixare a adaosului. Pentru testul de fixare a adaosului, serul conținând cel puțin 20 de unități ICIFT la mililitru este considerat ca fiind pozitiv. Antigenii utilizați trebuie aprobați de laboratorul național și trebuie să fie standardizați în raport cu al doilea ser la standard internațional anti-brucella abortus. ANEXA D Probe pentru cercetarea epidydimita contagioasă a oilor (B. ovis) Testul de fixare a adaosului Antigenul specific folosit trebuie
jrc1730as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86878_a_87665]
-
ca fiind pozitiv. Antigenii utilizați trebuie aprobați de laboratorul național și trebuie să fie standardizați în raport cu al doilea ser la standard internațional anti-brucella abortus. ANEXA D Probe pentru cercetarea epidydimita contagioasă a oilor (B. ovis) Testul de fixare a adaosului Antigenul specific folosit trebuie să fie aprobat de laboratorul național și trebuie să fie standardizat în raport cu serul la standard internațional anti-brucella ovis. Serul de lucru (de control zilnic) trebuie etalonat în raport cu serul la standard internațional anti-brucella ovis preparat de laboratorul veterinar
jrc1730as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86878_a_87665]
-
600. Se include un control SFT pe lamela de testare pentru a se determina dacă imunoglobulina izotiocianat fluorescent anti-iepure conjugată (FITC) se combină nespecific cu celulele bacteriale. Corynebacterium sepedonicum (ATCC 33113 (NCPPB 2137 ), (NCPPB 2140) trebuie utilizată pentru controale omoloage antigen pe o lamelă separată. Țesutul infectat natural (conservat prin liofilizare sau congelare la -20 C) se utilizează, dacă este posibil, ca un control similar pe aceeași lamelă (figura 2). 5.2. Procedeul 5.2.1. Se prepară trei serii de
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
fi analizată în Comitetul veterinar permanent în conformitate cu procedura stabilită în art. 16." 7. Art. 14 se înlocuiește cu următorul text: "Articolul 14 1. Până la constituirea rezervelor comunitare de vaccin împotriva febrei aftoase, statele membre sunt autorizate să păstreze rezerve de antigene în una din unitățile menționate în anexe. În sensul primului paragraf, se vor încheia contracte între Comisie și responsabilii din unitățile desemnate de statele membre; contractele vor specifica, în special, cantitățile de doze de antigen necesare, ținând seama de cerințele
jrc1610as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86752_a_87539]
-
autorizate să păstreze rezerve de antigene în una din unitățile menționate în anexe. În sensul primului paragraf, se vor încheia contracte între Comisie și responsabilii din unitățile desemnate de statele membre; contractele vor specifica, în special, cantitățile de doze de antigen necesare, ținând seama de cerințele estimate în contextul planurilor menționate în art. 5 alin. (1) din Directiva 90/423/CEE*, pentru maximum 10 serotipuri. După această perioadă tranzitorie, statele membre sunt autorizate să păstreze, sub supraveghere comunitară, unități pentru ambalarea
jrc1610as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86752_a_87539]
-
anterioară inspecției, conform art. 4 alin. (2) din directiva menționată. V. Prezentul certificat este valabil timp de 10 zile. (Numele cu majuscule și titlul medicului veterinar care semnează)7 ANEXA D PESTA CABALINĂ AFRICANĂ DIAGNOSTICARE Test de fixare a complementului Antigenul se prepară din creiere de șoareci în vârstă de o lună inoculate intracerebral cu o sușă neutropică a virusului. Acesta poate fi obținut utilizând următoarea metodă a lui Bourdin. Creierele sunt înghețate și apoi măcinate într-o soluție tampon Veronal
jrc1612as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86754_a_87541]
-
sunt înghețate și apoi măcinate într-o soluție tampon Veronal într-un raport de 10 creiere la 12 ml de soluție tampon. Suspensia care rezultă se centrifughează timp de o oră la 10 000 rot/min la 4oC. Supernatantul constituie antigenul. Acesta se utilizează de preferință fără modificări ulterioare, dar poate fi inactivat cu beta-propiolactonă. Inactivarea se poate realiza prin adăugarea a 0,1 ml de soluție 3% de beta-propiolactonă în apă distilată la fiecare 0,9 ml de antigen și
jrc1612as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86754_a_87541]