5,310 matches
-
cromatidelor surori (SCE) ................................. 68 - Testul de letalitate recesivă în raport cu sexul la drosophila melanogaster (SLRL) 71 - Test in vitro de transformare a celulelor de mamifere.................................... 73 - Testul genei letale dominante la rozătoare................................................. 76 - Teste citogenetice in vivo asupra celulelor germinative la mamifere.................. 79 - Testul petei la șoarece........................................................................ 82 - Apariția translocațiilor ereditare la șoareci................................................. 85 PARTEA C: Metode de determinare a ecotoxicității...................................... 88 Introducere generală: Partea C................................................................ 88 Test de inhibare a algelor...................................................................... 89 Toxicitatea pentru râme: Test pe sol artificial.............................................. 95 Biodegradare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
secțiune pot fi în general utilizate la investigarea oricăruia din aceste două aspecte. Introducere Evaluarea inițială a activității mutagene a unei substanțe constă din prelevarea de probe pentru decelarea mutațiilor genetice (punctuale) la bacterii și a deteriorării citogenetice a celulelor mamiferelor (in vitro sau in vivo); metode corespunzătoare pentru aceste studii din "dosarul de bază" au fost descrise anterior. Prezenta secțiune privește studiile suplimentare corespunzătoare pentru verificarea și/sau extinderea rezultatelor obținute în dosarul de bază și care pot fi utilizate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
unei substanțe de a produce mutații genetice, ar putea fi utile unul sau mai multe din testele următoare: (a) studiul mutației directe sau reverse la microorganismele eucariote (Saccharomyces cerevisiae); (b) studii in vitro pentru decelarea mutației directe la celulele de mamifere; (c) studiul genei letale recesive legate de sex la Drosophila melanogaster; (d) studiul mutației somatice in vivo: testul petei la șoareci. Studii pentru investigarea aberațiilor cromozomiale Pentru investigarea aprofundată a potențialului unei substanțe de a produce aberații cromozomiale, se pot
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
vivo: testul petei la șoareci. Studii pentru investigarea aberațiilor cromozomiale Pentru investigarea aprofundată a potențialului unei substanțe de a produce aberații cromozomiale, se pot dovedi fi adecvate unul sau mai multe din testele următoare: (a) studii citogenetice in vivo pe mamifere; Analiza in vivo a celulelor din măduva osoasă aflate în metafază trebuie luată în considerare, dacă nu a fost inclusă în evaluarea inițială (studiile din "dosarul de bază"). În plus, poate fi cercetată in vivo citogenetica celulelor germinative; (b) studii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
măduva osoasă aflate în metafază trebuie luată în considerare, dacă nu a fost inclusă în evaluarea inițială (studiile din "dosarul de bază"). În plus, poate fi cercetată in vivo citogenetica celulelor germinative; (b) studii citogenetice in vitro pe celule de mamifere, dacă acesta nu a fost inclus în evaluarea inițială; (c) studiul genei letale dominante la rozătoare; (d) studiul translocării ereditare la șoarece. Teste indicatoare privind efectele asupra ADN-ului Există metode care dau indicații cu privire la anumite efecte asupra ADN-ului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
studii pot furniza informații complementare celor obținute în urma studiilor de potențial mutagen și care pot fi utile la interpretarea acestor studii. Dacă aceste investigații sunt necesare, poate fi adecvată una din metodele următoare care folosesc microorganisme eucariote sau celule de mamifere: (a) recombinație mitotică la Saccharomyces cerevisiae; (b) alterarea și repararea ADN - sinteză neprogramată ADN - celule de mamifere (in vitro) (c) schimbul de cromatide surori la celule de mamifere (in vitro) Alte teste indicatoare ale potențialului cancerigen Sunt disponibile probe de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
la interpretarea acestor studii. Dacă aceste investigații sunt necesare, poate fi adecvată una din metodele următoare care folosesc microorganisme eucariote sau celule de mamifere: (a) recombinație mitotică la Saccharomyces cerevisiae; (b) alterarea și repararea ADN - sinteză neprogramată ADN - celule de mamifere (in vitro) (c) schimbul de cromatide surori la celule de mamifere (in vitro) Alte teste indicatoare ale potențialului cancerigen Sunt disponibile probe de transformare a celulelor de mamifere care pot măsura capacitatea unei substanțe de a determina în cultura celulară
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
adecvată una din metodele următoare care folosesc microorganisme eucariote sau celule de mamifere: (a) recombinație mitotică la Saccharomyces cerevisiae; (b) alterarea și repararea ADN - sinteză neprogramată ADN - celule de mamifere (in vitro) (c) schimbul de cromatide surori la celule de mamifere (in vitro) Alte teste indicatoare ale potențialului cancerigen Sunt disponibile probe de transformare a celulelor de mamifere care pot măsura capacitatea unei substanțe de a determina în cultura celulară schimbări morfologice și comportamentale despre care se crede că sunt asociate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Saccharomyces cerevisiae; (b) alterarea și repararea ADN - sinteză neprogramată ADN - celule de mamifere (in vitro) (c) schimbul de cromatide surori la celule de mamifere (in vitro) Alte teste indicatoare ale potențialului cancerigen Sunt disponibile probe de transformare a celulelor de mamifere care pot măsura capacitatea unei substanțe de a determina în cultura celulară schimbări morfologice și comportamentale despre care se crede că sunt asociate cu o transformare malignă in vivo. Pot fi folosite utilizate mai multe tipuri de celule și criterii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
determina în cultura celulară schimbări morfologice și comportamentale despre care se crede că sunt asociate cu o transformare malignă in vivo. Pot fi folosite utilizate mai multe tipuri de celule și criterii pentru transformare. Evaluarea riscurilor cu privire la efectele ereditare la mamifere Există o serie de metode de măsurare a efectelor ereditare la mamifere, produse de mutații genetice (punctuale) (testul locusului specific la șoarece 4) sau pentru aberațiile cromozomiale (testul translocării ereditare la șoarece). Aceste metode pot fi utilizate la estimarea posibilului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
că sunt asociate cu o transformare malignă in vivo. Pot fi folosite utilizate mai multe tipuri de celule și criterii pentru transformare. Evaluarea riscurilor cu privire la efectele ereditare la mamifere Există o serie de metode de măsurare a efectelor ereditare la mamifere, produse de mutații genetice (punctuale) (testul locusului specific la șoarece 4) sau pentru aberațiile cromozomiale (testul translocării ereditare la șoarece). Aceste metode pot fi utilizate la estimarea posibilului risc genetic al unei substanțe pentru om. Totuși, având în vedere complexitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Obiectivul testului combinat de toxicitate cronică/potențial cancerigen este acela de a determina efectele cronice și cancerigene ale unei substanțe după administrare prelungită la o specie de mamifere. În acest scop, testul de potențial cancerigen se suplimentează cu cel puțin un lot satelit tratat și un lot satelit martor. Doza folosită pentru lotul satelit expus la doza maximă poate fi mai mare decât cea utilizată pe loturile expuse
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
relația doză/răspuns (dacă este cazul), evaluarea statistică a datelor, ― discutarea rezultatelor, ― interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. TEST IN VITRO DE MUTAȚIE GENICĂ PE CELULE DE MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nu sunt specificate. 1.4. Principiul metodei de testare Pentru determinarea mutațiilor cauzate de substanțele chimice se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nu sunt specificate. 1.4. Principiul metodei de testare Pentru determinarea mutațiilor cauzate de substanțele chimice se pot folosi sisteme de culturi celulare de mamifere. Printre cele mai utilizate linii celulare se numără celulele limfomatoase L5178Y de șoarece și liniile celulare CHO și V-79 de hamster chinezesc. În aceste linii celulare, sistemele cele mai utilizate măsoară mutațiile la nivelul locusurilor timidin kinazei (TK), hipoxantin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
a excipientului în sistemul de cultură nu trebuie să afecteze viabilitatea sau rata de creștere celulară. Activarea metabolică Celulele se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să corespundă clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi Fiecare experiment include martori pozitivi, folosind atât un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
temperatura de incubare, timpul de incubare, durata perioadei de expresie fenotipică (dacă este cazul, raportul poate include numărul de celule cultivate și subculturile și schemele de alimentare), durata tratamentului, densitatea celulară pe parcursul tratamentului, tipul de sistem de activare metabolică la mamifere folosit, martorii pozitivi și negativi, tipul de agent selectiv folosit, - argumentarea alegerii dozelor, - metoda folosită pentru exprimarea numărului de celule viabile și mutante, - evaluarea statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. ALTERAREA ȘI REPARAREA ADN-ului - SINTEZA NEPROGRAMATĂ A ADN (UDS - UNSCHEDULED DNA SYNTHESIS) - TEST IN VITRO PE CELULE DE MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Sinteza neprogramată a ADN (UDS) reprezintă un test care permite
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
măsurarea sintezei de reparare a ADN-ului după excizia și eliminarea unui fragment de ADN care conține regiunea alterată de agenți chimici și fizici. Testul se bazează pe încorporarea timidinei marcate cu tritiu (timidină tritiată) (3H-TdR) în ADN-ul celulelor mamifere care nu sunt în faza S a ciclului celular. Încorporarea 3H-TdR se poate determina prin autoradiografiere sau prin LSC (liquid scintillation counting) ADN-ului din celulele tratate. Cu excepția cazului când se folosesc hepatocite de șobolan, culturile de celule de mamifere
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mamifere care nu sunt în faza S a ciclului celular. Încorporarea 3H-TdR se poate determina prin autoradiografiere sau prin LSC (liquid scintillation counting) ADN-ului din celulele tratate. Cu excepția cazului când se folosesc hepatocite de șobolan, culturile de celule de mamifere se tratează cu agentul testat cu și fără un sistem exogen de activare metabolică. USD poate fi măsurată prin tehnici in vivo. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire: Substanța chimică de testare și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
însă datele existente despre bazele moleculare ale procesului sunt limitate. Detectarea SCE necesită câteva mijloace de marcare diferențiată a cromatidelor surori, rezultat ce poate fi obținut prin încorporarea bromodeoxiuridinei (BrdU) în ADN-ul cromozomial pentru două cicluri celulare. Celulele de mamifere sunt tratate in vitro cu substanța de testare cu și fără un sistem exogen de activare metabolică la mamifere, dacă este cazul, apoi sunt cultivate pe o perioadă de două cicluri de replicare într-un mediu ce conține BrdU. După
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
cromatidelor surori, rezultat ce poate fi obținut prin încorporarea bromodeoxiuridinei (BrdU) în ADN-ul cromozomial pentru două cicluri celulare. Celulele de mamifere sunt tratate in vitro cu substanța de testare cu și fără un sistem exogen de activare metabolică la mamifere, dacă este cazul, apoi sunt cultivate pe o perioadă de două cicluri de replicare într-un mediu ce conține BrdU. După tratarea cu un inhibitor de fus mitotic (de exemplu colchicină) pentru oprirea celulelor în stadiul de metafază al mitozei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
semnificativ viabilitatea celulară sau rata de creștere, iar efectele asupra frecvenței SCE trebuie monitorizate printr-un solvent martor. Celulele se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Alternativ, dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să fie corespunzătoare clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesec cel puțin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
desfășurare a testului: compoziția mediului, concentrația CO2, concentrația substanței de testare, excipientul folosit, temperatura de incubare, durata tratamentului, inhibitorul fusului de diviziune celulară folosit, concentrația acestuia și timpul de tratament cu acesta, tipul de sistem folosit pentru activarea metabolică la mamifere, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi la fiecare punct experimental, - detalii despre tehnica folosită pentru prepararea lamelor, - numărul de metafaze analizate (datele vor fi redate separat pentru fiecare cultură în parte), - numărul mediu de SCE per celulă și per
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
numărarea mutațiilor letale, - dacă este posibil, relația expunere/efect, - evaluarea statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. TEST IN VITRO DE TRANSFORMARE A CELULELOR DE MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Pentru determinarea modificărilor fenotipice in vitro induse de substanțele chimice
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Pentru determinarea modificărilor fenotipice in vitro induse de substanțele chimice asociate cu transformări maligne in vivo, se folosesc sisteme de cultură de celule de mamifere. Cele mai des utilizate celule sunt C3H10T1/2, 3T3, SHE și celule de la șobolani Fisher. Testele urmăresc modificările în morfologia celulară, formarea de focare sau modificări în dependența de ancorare pe agar-agar semisolid. Există sisteme folosite mai rar care depistează
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]