5,936 matches
-
apar la baza electroforegramei. Benzile negre din partea de sus reprezintă albumină serică. Se pot vedea, de asemenea, α-globulina și β-globulina (după Kimball, 1994). Imunoglobulinele sunt molecule efectoare ale sistemului imunitar (SI) care apar fie ca molecule secretate de limfocitele B mature, reprezentând anticorpi liberi, fie ca receptori de suprafață celulară, pentru expresia de suprafață celulară desemnat receptor de celulă B (BCR), constând dintr-o moleculă tetrameră imunoglobulinică asociată cu proteinele transmembranare Igα și Igβ (fig. 2.3). Acestea reprezintă componentele de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de antigen cu celulele T helper. Studiile cristalografice au permis descifrarea structurii imunoglobulinelor și elaborarea modelului de structură tetracatenară a acestora, în forma literei „Y”. Prototipul moleculelor imunoglobulinice este cel al imunoglobulinei G - IgG - produsă de limfocitele B derivate (celule mature, plasmatice) secretoare. Molecula tetracatenară IgG are două catene polipeptidice de 214 aminoacizi numite catene „ușoare” și notate cu L (de la light = ușor, în limba engleză) și două catene polipeptidice de 446 aminoacizi, numite catene „grele” și notate cu H (de la
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
genică. 76 Cap. 3. Informația genetică pentru imunoglobuline Experiențele de hibridizare moleculară au dovedit că în celulele embrionare, segmentele genice pentru regiunea variabilă sunt localizate la distanță mare față de segmentele genice pentru regiunea constantă a catenei imunoglobulinice. Dimpotrivă, în limfocitele mature, segmentul genic VK este localizat în același fragment de restricție cu segmentul genic CK, ceea ce înseamnă că aceste segmente genice au venit în vecinătate, printr-un rearanjament de segmente genice imunoglobulinice. Sectorul din ADN în care sunt dispuse segmentele genice
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
reprezintă gena imunoglobulinică funcțională în dirijarea sintezei unei catene imunoglobulinice. O asemenea combinație succesivă de segmente genice distincte, cu realizarea unui cistron imunoglobulinic, a fost numită recombinare somatică. Această suită de evenimente se desfășoară în cursul determinării și diferențierii limfocitului matur, în prezența unui anumit antigen. Acest mecanism recombinațional este unul nelegitim, deoarece implică participarea unor structuri genetice neomoloage, localizate într-unul și același cromozom, dar la distanțe mari, violând regulile „clasice” ale recombinării genetice propriu-zise, care implică schimb reciproc de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
are rol de semnal funcțional care asigură transportul catenei imunoglobulinice Lλ prin membrana reticulului endoplasmic. Ea va fi clivată, în acest proces de tranzit, ca un fel de „taxă de trecere a unei granițe ”, ieșind în afară o catenă Lλ matură, pregătită să participe în procesul posttranslațional de asamblare a tetramerului imunoglobulinic. În organizarea segmentelor genice Vλ se constată existența unui exon lider Le, separat printr-un intron de următorul segment genic Vλ. Segmentul genic CLλ conține un exon și este
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
adiția câtorva perechi de nucleotide la punctul de joncțiune (articulare) VK - JK. Ulterior experimentului clasic al lui Hozumi și Tonegawa (1976), rearanjamentul de segmente genice imunoglobulinice a putut fi studiat prin compararea structurii genelor imunoglobulinice clonate, izolate din limfocite B mature (diferențiate), funcționale în dirijarea sintezei catenelor imunoglobulinice, din celule pre-B sau embrionare, în care genele imunoglobulinice nu sunt încă funcționale, precum și din alte tipuri de celule somatice în care, în condiții normale, asemenea gene nu sunt niciodată funcționale (silențiere genică
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
la capătul 3’-OH o prelungire poli(A), cu rol în stabilizarea sa. Acest pre -ARNm astfel stabilizat este supus prelucrării posttranscripționale prin splicing , în cadrul căruia are loc buclarea și excizia intronilor, urmată de sudarea exonilor, rezultând astfel un ARNm matur, purtător al mesajului genetic pentru sinteza catenei LK a imunoglobulinei. Acest ARNm este tradus într-un polipeptid complet, codificat de cele patru componente sudate ale genei funcționale pentru sinteza catenei LK. Dintr-un asemenea polipeptid va fi excizat sectorul lider
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de segmente genice imunoglobulinice să fie inclus un segment genic JK suplimentar acesta va fi transcris odată cu transcrierea secvenței intronice dintre JK și CK, dar sectorul respectiv va fi eliminat din transcriptul primar, în cadrul prelucrărilor post-transcriționale (splicing), astfel că ARNm matur va conține un mesaj genetic corect, funcțional, pentru cele trei regiuni ale catenei imunoglobulinice ușoare VJC, care va fi tradus într-o secvență normală de aminoacizi a catenei LK. Segmentul genic J codifică aproximativ 15 aminoacizi de la terminalul carboxil al
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Catena H este codificată integral de primii patru exoni. Ultimii doi exoni codifică pentru un segment polipeptidic care ancorează catenele H ale IgMm în membrana limfocitului B. Pentru forma legată de membrană a IgM, Cµ se notează µm, iar imunoglobulina matură este desemnată IgMm. Legarea antigenului declanșează trecerea de la sinteza IgMm la sinteza IgMs, adică a formei solubile a IgM, secretată, indusă de prezența antigenului specific. Concomitent cu proliferarea celulelor B se produce o clonă de celule B plasmatice care secretă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
rearanjamente abortive nu ar declașa spontan mecanismele celular-moleculare de reglaj genetic care direcționează limfocitele B incapabile de a realiza rearanjamentele corecte de segmente genice imunoglobulinice spre un program de apoptoză. Constatându -se că în timpul realizării răspunsului imun, în citoplasma limfocitelor mature primele care apar sunt catenele H, s-a dedus că mai întâi sunt rearanjate segmentele genice H, după care are loc rearanjarea de segmente genice L. Asamblarea catenelor ușoare și grele în dimeri și tetrameri este un proces complex, realizat
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
pentru receptorii de antigen din celulele T, desemnați TCR, prezintă elemente reglatoare cis activatoare, larg separate în genomul liniei germinale, asemenea elemente fiind readuse într-o configurație propice funcționării în anumite stadii din cursul dezvoltării celulelor limfoide spre stadiul lor matur, când sunt funcționale în sinteza Ig și, respectiv, TCR. Expresia genică pentru Ig și TCR este reglată prin două mecanisme. Unul dintre acestea devine operațional prin determinarea momentului și tipului de celulă în care apar rearanjamentele de segmente genice imunoglobulinice
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
genic inclus în suprasegmentul genic V-D-J vine mult mai aproape de enhancer, cade sub influența acestuia și astfel transcripția genei imunoglobulinice asamblate este realizată cu o rată mai mare. Dacă enhancer-ul este deletat în cadrul rearanjamentului de segmente genice imunoglobulinice în limfocitele mature, transcripția genei imunoglobulinice este dramatic diminuată. Mai multe motive de secvență distinctive definesc promotorul bazal al unei gene imuno-globulinice și anume o secvență asemănătoare TATA, situată în sectorul de 20-30 perechi de nucleotide față de situsul start al transcripției. Această secvență
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
catenele IgL(κ) în celulele B. În citosol, NF-kB apare asociat cu o proteină inhibitoare labilă (l-kB). Cu toate aceste date experimentale, nu se cunoaște mecanismul natural care activează NF-kB și inițiază expresia genelor IgL(κ) în celulele B mature (Singer și Berg, 1991). Indiferent de tipul celular în care apare proteina NF-kB, aceasta se leagă în mod similar la secvența consens 5’-GGGR TYY C-3’ în care R reprezintă purina, iar Y reprezintă pirimidina. Nucleotidtrifosfații stimulează legarea proteinei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Ig și TCR sunt specificate de două sau trei tipuri de segmente genice V, J și D. În linia germinală, fiecare dintre aceste segmente genice este prezent în multiple exemplare. Dar, în genele funcționale pentru Ig și TCR din celulele mature în care are loc combinarea cu specificitate celulară a acestor segmente genice se realizează reunirea a câte unui singur exemplar de segment genic, rezultând un exon sau un exon VDJ, respectiv, un exon VJ. Prin hipermutație somatică pot apare mutații
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
asamblate. Sudarea joncțiunilor codificatoare se face în toate celulele în care are loc recombinarea V(D)J, inclusiv în fibroblastele care au fost induse să realizeze această recombinare, prin exprimarea genelor de rearanjare RAG1 și RAG2, funcționale în asamblarea genelor mature pentru imunoglobuline. Deși se presupune că pentru o asemenea rearanjare este necesară o exonuclează, trebuie să fie realizată mai întâi o incizie endonucleazică, la o oarecare distanță, în interiorul capătului segmentului codificator. Unilateralitatea informației secvențiale, operantă în rearanjarea V(D)J
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
bursă între a 15-a și a 18-a zi de embriogeneză, exact în același timp când are loc conversia genică. Șoarecii transgenici, cu gena RAG2 nefuncțională, nu prezintă rearanjarea V(D)J și nu au celule B sau T mature, dar alte deficiențe funcționale, în afara sistemului limfoid, nu se produc. 5.3. FACTORUL SCID Un alt factor implicat în rearanjarea genică V( D)J este definit de mutația scid (de la Severe Combined Immune Deficiency). Șoarecii cu imunodeficiență severă a imunității
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
fi pierdută informație genetică esențială pentru edificarea unei gene funcționale Ig sau TCR. Două evenimente succesive de recombinare somatică asigură mai întâi reunirea de segmente genice D și J, la care se adaugă un segment genic V, rezultând un exon matur VDJ. În figura 5.1, cel de al doilea segment (V2) dintre cele 129 segmente V, este fuzionat cu segmentul genic D3 al sectorului cu segmente D și cu segmentul genic J2 din sectorul cu segmente genice J, rezultând un
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
Cγ. După realizarea acestui nou rearanjament genic toată secvența dintre suprasegmentul VHDJH și localizarea finală este eliminată prin deleție. Excepție de la acest mecanism este sinteza simultană a receptorilor membranari de antigen IgM și IgD desemnați IgMm, respectiv IgDm, în celulele mature. Acest mecanism de macaz nu modifică cu nimic segmentele genice sudate VH-D-JH pentru regiunea variabilă a catenei H, astfel că izotipul nou rezultat în urma comutării va recunoaște epitopul aceluiași antigen. Dar, diferitele regiuni C ale catenei H au căi diferite
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
genică complementară uneia dintre cele două catene ale dublului helix ADN deținător de informație genetică pentru sinteza catenei grele. Acest pre-ARNm este supus prelucrărilor posttranscripționale de tip splicing, în cadrul cărora sunt buclați și excizați intronii cu sudarea exonilor, rezultând ARNm matur purtător de mesaj genetic pentru sinteza în ribozomi a catenei polipeptidice ce va deveni catenă grea imunoglobulinică. În cadrul acestor prelucrări posttranscripționale se poate realiza și mecanismul de comutare a clasei catenei grele. Clasa inițială de catenă grea este µ, deoarece
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
catenă grea pentru exonul VDJ, astfel că, fie prin rearanjament de segmente genice la nivel de ADN, fie prin splicing alternativ, acest segment Cµ va fi adus în contiguitatea exonului, rezultând gena funcțională VDJCµ sau pre-ARNm ce va deveni ARN matur deținător de masaj genetic pentru sinteza catenei grele imunoglobulinice, astfel că IgM este prima clasă de imunoglobulină sintetizată de limfocitele B naive. Dar, pe măsură ce acestea se maturează, aceleași mecanisme de rearanjament de segmente genice și de splicing alternativ pot aduce
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de imunoglobulină sintetizată de limfocitele B naive. Dar, pe măsură ce acestea se maturează, aceleași mecanisme de rearanjament de segmente genice și de splicing alternativ pot aduce Cδ, în contiguitatea nemijlocită exonului VDJ ceea ce va determina sinteză de IgD. ADN în celule mature producătoare de IgG Transcripte primare în celula B matură Sudare spre a genera ARNm γ purtător de mesaj genetic pentru IgG A. Comutarea timpurie (parțială) de la IgM la IgD; B. Comutarea târzie a clasei catenei grele conduce la sinteză de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
rezultă gene active pentru catena grea a IgA, IgG și respectiv IgE, transcrise în pre-ARNm-uri purtătoare de mesaj genetic pentru catena grea a IgA, IgG sau IgE, în funcție de necesitățile de moment ale organismului. Splicing-ul alternativ poate asigura formarea de ARNm matur dintr-un pre-ARNm în care sectorul VDJ este urmat de un sector pentru catena grea din care, aparatul enzimatic al splicing-ului poate să selecteze succesiv exoni individuali pentru diferite clase imunoglobulinice. În figura 6.4 sunt prezentate două evenimente succesive
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
cu asamblarea de gene funcționale TCR și geneza unui exon contiguu V-(D)-J care este transcris. În cursul splicing-ului acestui transcript se realizează și sudarea unui transcript al unui segment genic C, printr-un asemenea transsplicing, rezultând un ARNm matur ce este tradus într-o catenă polipeptidică integrală TCR. Multiplicitatea segmentelor genice V, (D) și J la care se adaogă natura stohastică a recombinării V-(D)-J precum și variația joncțională produsă de enzima N-terminal transferază, cu realizarea unei regiuni
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
pentru regiunea de diversitate. În linia germinală, în regiunea care deține informația genetică pentru Ig și, respectiv, pentru TCR, aceste segmente genice sunt prezente în multiple exemplare, pe când la asamblarea unei gene funcționale în celulele B sau în celulelor T mature, participă doar câte un singur exemplar al acestor segmente, generându-se astfel, un exon VDJ sau un exon VJ. Hipermutația somatică reprezintă un mecanism major al asigurării diversității Ig și TCR la specia umană, ca și la speciile de murine
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de tip V(D)J, catalizat de RAG. În cadrul ambelor acestor mecanisme are loc o reunire randomică de segmente genice prezente în stare silențiată în linia germinală și în precursorii limfocitelor, în locusul genic pentru TCR, cu asamblarea unei gene mature, funcțională în dirijarea sintezei catenei TCR. Tot astfel, geneza genei pentru catena γ a TCR implică recombinarea VJ, pe când geneza genei funcționale pentru catena δ implică recombinarea de tip V(D)J. Intersectarea acestor regiuni specifice (V și J pentru
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]