3,542 matches
-
la tuberculii de cartof și la plantele gazdă de cartof și tomată sau la alte plante gazdă care prezintă simptome de ofilire bacteriană Protocolul de testare este destinat tuberculilor de cartof și plantelor cu simptome tipice sau suspecte de ofilire bacteriană. Presupune un test de selecție rapidă, izolarea agentului patogen din țesutul vascular infectat pe un mediu (selectiv) și, în cazul unui rezultat pozitiv, identificarea culturii ca fiind Ralstonia solanacearum. ***[PLEASE INSERT FIGURE AND REPLACE TEXT WITH THE ROMANIAN CORRESPONDENT]*** Tubercule
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
s) de pommes de terre, de tomates ou d'autres hôtes présentant des symptômes suspects de flétrissement bactérien = Tubercul(i) de cartof(i) sau plantă (plante) gazdă de cartofi, tomate sau alte plante gazdă care prezintă simptome suspecte de ofilire bacteriană 1 Tests rapides de dépistage = TESTE DE SELECȚIE RAPIDĂ 2 Réaliser au moins l'un des tests suivants pour un diagnostic supposé = A se efectua cel puțin unul dintre următoarele teste pentru un diagnostic prezumtiv: Test de purulence pour l
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
nu sunt esențiale. Un rezultat negativ nu garantează întotdeauna absența agentului patogen. 3 Testul de eliminare a exsudatului din țesutul vascular al tulpinii este descris în secțiunea VI.A.1. 4 Testul de detectare a granulelor de poli-β-hidroxibutirat în celulele bacteriene este descris în secțiunea VI.A.2. 5 Testele de seroaglutinare asupra exsudatului bacterian sau a extraselor din țesuturile simptomatice sunt descrise în secțiunea VI.A.3. 6 Testul IF asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de eliminare a exsudatului din țesutul vascular al tulpinii este descris în secțiunea VI.A.1. 4 Testul de detectare a granulelor de poli-β-hidroxibutirat în celulele bacteriene este descris în secțiunea VI.A.2. 5 Testele de seroaglutinare asupra exsudatului bacterian sau a extraselor din țesuturile simptomatice sunt descrise în secțiunea VI.A.3. 6 Testul IF asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.5. 7 Testul FISH asupra
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
detectare a granulelor de poli-β-hidroxibutirat în celulele bacteriene este descris în secțiunea VI.A.2. 5 Testele de seroaglutinare asupra exsudatului bacterian sau a extraselor din țesuturile simptomatice sunt descrise în secțiunea VI.A.3. 6 Testul IF asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.5. 7 Testul FISH asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.7
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
a extraselor din țesuturile simptomatice sunt descrise în secțiunea VI.A.3. 6 Testul IF asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.5. 7 Testul FISH asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.7. 8 Testul ELISA asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.8
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.5. 7 Testul FISH asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.7. 8 Testul ELISA asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.8. 9 Testul PCR asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.6
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.7. 8 Testul ELISA asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.8. 9 Testul PCR asupra exsudatului bacterian în suspensie în apă sau asupra extraselor din țesuturi simptomatice este descris în secțiunea VI.A.6. 10 În general, agentul patogen se izolează ușor din materialul vegetal simptomatic prin diluare sau însămânțare pe mediul nutritiv (secțiunea II.3). 11
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
13 Testul de patogenitate este descris în secțiunea VI.C. Secțiunea II Metode detaliate pentru detectarea Ralstonia Solanacearum la tuberculii de cartof și la plantele gazdă de cartof și de tomată sau la alte plante gazdă cu simptome de ofilire bacteriană 1. Simptome (a se vedea website-ul http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main) 1.1. Simptome la cartof Planta de cartof. Stadiul incipient al infecției în câmp este reprezentat de ofilirea frunzelor înspre vârful plantei în timpul temperaturilor
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
mod spontan după câteva minute. Ulterior, decolorarea vasculară devine de un brun mai distinct, iar necroza se poate extinde la țesutul parenchimatos. În stadii avansate, infecția izbucnește în exterior de la talon și de la ochi și se poate observa un lichid bacterian care provoacă aderarea particulelor de sol. Coaja tuberculilor poate prezenta leziuni de culoare brun-roșcat ușor adâncite provocate de colapsul intern al țesutului vascular. În stadiile avansate ale bolii apar deseori evoluții secundare de putregaiuri fungice și bacteriene. 1.2. Simptome
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
observa un lichid bacterian care provoacă aderarea particulelor de sol. Coaja tuberculilor poate prezenta leziuni de culoare brun-roșcat ușor adâncite provocate de colapsul intern al țesutului vascular. În stadiile avansate ale bolii apar deseori evoluții secundare de putregaiuri fungice și bacteriene. 1.2. Simptome la tomate Planta de tomată. Primul simptom vizibil este aspectul slăbit al frunzelor tinere. În condiții favorabile pentru agentul patogen (temperatura solului circa 25 °C, umiditate saturată), epinastia și ofilirea unei părți sau a întregii plante se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
tulpină. Este posibilă observarea unui cordon gras de-a lungul tulpinii, plecând de la baza acesteia, care este dovada necrozei sistemului vascular. În cazul în care tulpina este tăiată transversal, țesuturile vasculare brune decolorate ale tulpinii elimină picături dintr-un exsudat bacterian alb sau gălbui. 1.3. Simptome la alte plante gazdă Solanum dulcamara și S. nigrum. În condiții naturale se observă rareori simptome de ofilire la aceste buruieni gazdă, cu excepția cazurilor în care temperatura solului este mai mare de 25 °C
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
prezenta o ușoară decolorare brună a țesutului vascular pe partea transversală a tulpinii sau pe părțile tulpinii aflate sub apă. În cazul în care se pune o tulpină tăiată în poziție verticală în apă, se pot observa fire de exsudat bacterian sau fire din țesutul vascular tăiat chiar în absența simptomelor de ofilire. 2. Teste de selecție rapidă Testele de selecție rapidă ușurează diagnosticul prezumtiv, dar nu sunt esențiale. A se folosi unul sau mai multe dintre următoarele teste validate: 2
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
vascular tăiat chiar în absența simptomelor de ofilire. 2. Teste de selecție rapidă Testele de selecție rapidă ușurează diagnosticul prezumtiv, dar nu sunt esențiale. A se folosi unul sau mai multe dintre următoarele teste validate: 2.1. Testul eliminării exsudatului bacterian din tulpină (a se vedea secțiunea VI.A.1). 2.2. Detectarea granulelor de poli-β-hidroxibutirat (PHB) Granulele tipice de PHB din celulele de R. solanacearum pot fi vizualizate prin colorarea cu albastru de Nil A sau cu negru de Sudan
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
granulelor de poli-β-hidroxibutirat (PHB) Granulele tipice de PHB din celulele de R. solanacearum pot fi vizualizate prin colorarea cu albastru de Nil A sau cu negru de Sudan B (a se vedea secțiunea VI.A.2) a frotiurilor de exsudat bacterian din țesutul infectat fixate la căldură pe o lamă de microscop. 2.3. Testul de seroaglutinare (a se vedea secțiunea VI.A.3). 2.4. Alte teste Alte teste de selecție rapidă sunt testul IF (a se vedea secțiunea VI
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de tuberculi. - Validarea tuturor metodelor de detectare descrise în continuare se bazează pe efectuarea unor teste pe eșantioane de două sute de tuberculi. - Extractul de cartof descris în continuare poate fi, de asemenea, utilizat pentru detectarea prezenței bacteriei responsabile de ofilirea bacteriană a cartofului, Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus. Operațiuni de pretratare care pot fi efectuate înainte de pregătirea eșantionului: (a) Se incubează eșantioanele la 25-30 °C pe parcursul unei perioade de până la două săptămâni înainte de efectuarea testelor pentru a încuraja multiplicarea eventualelor populații de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
website-ul http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Notă: Se separă tuberculii (în putrefacție) cu simptome de "putregai brun" și se testează separat. În cazul în care, la îndepărtarea miezului de talon, se observă simptome de ofilire bacteriană, trebuie să se întreprindă o examinare vizuală a tuberculului respectiv și acesta trebuie tăiat lângă talon. Orice tubercul tăiat care prezintă simptome suspecte trebuie păstrat timp de cel puțin două zile la temperatura ambiantă pentru a permite formarea unui strat
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
hastata, Bidens pilosa, Cerastium glomeratum, Chenopodium album, Eupatorium cannabinum, Galinsoga parviflora, Ranunculus scleratus, Rorippa spp., Silene alba, S. nutans, Tussilago farfarra și Urtica dioica. Notă: În această etapă se poate efectua examinarea vizuală a simptomelor interne (colorație vasculară sau exsudat bacterian). Se separă orice bucată de tulpină cu simptome și se testează în mod separat (a se vedea secțiunea II). 2.1.2. Se efectuează o dezinfectare scurtă a bucăților cu etanol de 70 % și se usucă de îndată cu ajutorul hârtiei
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
și se asigură prelevarea, de asemenea, din afluenții cursului de apă. 2.1.2. Se transportă eșantioanele în condiții de întuneric și la temperatură joasă (4-10 °C) și se testează pe parcursul a 24 ore. 2.1.3. La nevoie, fragmentul bacterian poate fi concentrat prin una dintre următoarele metode: (a) Se centrifughează 30-50 ml de subeșantioane la 10 000 g timp de zece minute (sau la 7 000 g timp de 15 minute), preferabil la o temperatură de 4-10 °C, se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
se păstrează, în timpul testului, la 4 °C. 2.2. Teste A se vedea diagrama și descrierea testelor în apendicele corespunzătoare. Secțiunea VI Protocoale optimizate pentru detectarea și identificarea R. Solanacearum A. DIAGNOSTIC ȘI TESTE DE DETECTARE 1. Testul eliminării exsudatului bacterian din tulpină Prezența R. solanacearum în tulpini ofilite de cartof, de tomate sau de alte plante gazdă poate fi evaluată prin următorul test simplu prezumtiv: se secționează tulpina chiar deasupra nivelului solului. Se pune extremitatea tăiată într-un tub cu
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
plante gazdă poate fi evaluată prin următorul test simplu prezumtiv: se secționează tulpina chiar deasupra nivelului solului. Se pune extremitatea tăiată într-un tub cu apă curată. După câteva minute, se observă scurgeri spontane și caracteristice de fire de exsudat bacterian din fasciculele vasculare tăiate. 2. Detectarea granulelor de poli-β-hidroxibutirat 1. Se prepară un frotiu din exsudatul bacterian scurs din țesutul infectat pe o lamelă de microscop sau se prepară un frotiu dintr-o cultură de 48 ore pe bază de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se pune extremitatea tăiată într-un tub cu apă curată. După câteva minute, se observă scurgeri spontane și caracteristice de fire de exsudat bacterian din fasciculele vasculare tăiate. 2. Detectarea granulelor de poli-β-hidroxibutirat 1. Se prepară un frotiu din exsudatul bacterian scurs din țesutul infectat pe o lamelă de microscop sau se prepară un frotiu dintr-o cultură de 48 ore pe bază de YPGA sau SPA (apendicele 2). 2. Se prepară frotiuri de control pozitiv din sușa biovar 2 de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
ulei la un grosisment de 1 000. (g) Se observă granulele de PHB din celulele de R. solanacearum care se colorează în albastru-negru. Membrana celulară se colorează în roz. 3. Teste de seroaglutinare Aglutinarea celulelor de R. solanacearum în exsudatul bacterian sau în extractele de țesuturi simptomatice se observă cel mai bine folosind anticorpi validați (a se vedea apendicele 3) etichetați cu marcatori colorați corespunzători, precum celulele de Staphylococcus aureus roșu sau particule de latex colorate. În caz de utilizare a
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
colorate. În caz de utilizare a unui material disponibil în comerț (a se vedea apendicele 3), se urmează instrucțiunile producătorului. În caz contrar, se urmează procedura descrisă în continuare: (a) Se amestecă picăturile unei suspensii de anticorpi și de exsudat bacterian marcate (circa 5 μl în fiecare caz) pe ferestrele lamelor de testare cu multe godeuri. (b) Se prepară frotiuri de control pozitiv și negativ din suspensii biovar 2 de R. solanacearum și dintr-o sușă heterologă. (c) Se observă aglutinarea
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
identifică culturile prezumtive (a se vedea secțiunea VI.B) și se efectuează un test de patogenitate (a se vedea secțiunea VI.C). Interpretarea rezultatelor testului de diluare-însămânțare Testul de diluare-însămânțare este negativ atunci când după șase zile nu sunt izolate colonii bacteriene sau atunci când nu sunt izolate colonii caracteristice R. solanacearum, cu condiția să nu fie suspectată o inhibiție din cauza coloniilor unei alte bacterii și să fie găsite în controalele pozitive colonii caracteristice de R. solanacearum. Testul de diluare-însămânțare este pozitiv atunci când
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]