646 matches
-
reacției în venele complicate indică, în mod cert, că activarea endotelială care se reflectă în proliferare vasculară se instalează în paralel cu progresia celorlaltor leziuni morfologice care caracterizează etapele evolutive ale bolii varicoase. Modificările morfologice semnificative ale microcirculației în venele varicoase, inclusiv cele trombozate, aduc în discuție implicarea lor în patogeneza bolii varicoase. Rezultatele evaluării nivelelor plasmatice VEGF și NOS vene normale versus vene varicoase, după inducerea experimentală a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
se reflectă în proliferare vasculară se instalează în paralel cu progresia celorlaltor leziuni morfologice care caracterizează etapele evolutive ale bolii varicoase. Modificările morfologice semnificative ale microcirculației în venele varicoase, inclusiv cele trombozate, aduc în discuție implicarea lor în patogeneza bolii varicoase. Rezultatele evaluării nivelelor plasmatice VEGF și NOS vene normale versus vene varicoase, după inducerea experimentală a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și scăderea producției de NOS, determinate de staza venoasă, pot constitui secvențe în
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
leziuni morfologice care caracterizează etapele evolutive ale bolii varicoase. Modificările morfologice semnificative ale microcirculației în venele varicoase, inclusiv cele trombozate, aduc în discuție implicarea lor în patogeneza bolii varicoase. Rezultatele evaluării nivelelor plasmatice VEGF și NOS vene normale versus vene varicoase, după inducerea experimentală a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și scăderea producției de NOS, determinate de staza venoasă, pot constitui secvențe în mecanismul patogenic al bolii varicoase primare (Hollingsworth et al., 2001). Din această
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
VEGF și NOS vene normale versus vene varicoase, după inducerea experimentală a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și scăderea producției de NOS, determinate de staza venoasă, pot constitui secvențe în mecanismul patogenic al bolii varicoase primare (Hollingsworth et al., 2001). Din această perspectivă, rezultatele noastre relevă, prin caracteristicile NOS, un status funcționabil al endoteliului vascular și, consecutiv, al microvascularizației. Considerăm că pozitivitatea redusă a reacției imunohistochimice pentru NOS în vasa vasorum și, respectiv, intensă la
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
status funcționabil al endoteliului vascular și, consecutiv, al microvascularizației. Considerăm că pozitivitatea redusă a reacției imunohistochimice pentru NOS în vasa vasorum și, respectiv, intensă la nivel capilar sunt argumente în favoarea ideei că reactivitatea vasa vasorum se datorează hipoxiei specifice bolii varicoase, fiind un efect, și nu o cauză patogenică. 7.5. EVALUAREA METALOPROTEINAZELOR ȘI A INHIBITORILOR SPECIFICI 7.5.1. REPERE FUNDAMENTALE La nivelul venelor varicoase apare un dezechilibru major în sinteza și degradarea componentelor structurale ale matricei extracelulare a țesutului
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
nivel capilar sunt argumente în favoarea ideei că reactivitatea vasa vasorum se datorează hipoxiei specifice bolii varicoase, fiind un efect, și nu o cauză patogenică. 7.5. EVALUAREA METALOPROTEINAZELOR ȘI A INHIBITORILOR SPECIFICI 7.5.1. REPERE FUNDAMENTALE La nivelul venelor varicoase apare un dezechilibru major în sinteza și degradarea componentelor structurale ale matricei extracelulare a țesutului conjunctiv prezent la acest nivel, în cele trei tunici. Pierderea tonusului venos, urmată de dilatare și elongare venoasă, poate fi cauzată de acest dezechilibru. În
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
un rol important (Travers et al., 1996, Venturi et al., 1996, Kockx et al., 1997, Michiels et al., 1997, Verbeuren et al., 1998, Badier-Commander et al., 2000, Gillespie et al., 2002). Studii recente indică asocierea transformărilor matricei extracelulare din venele varicoase cu alterări în activitatea MMPs (Hanemaaijer et al., 1993, Vaalmo et al., 1997, Li et al., 2000). MMPs și TIMPs sunt produse temporar ca răspuns la semnale externe ca: diverse proteaze, citokine sau factori de creștere, interacțiunile celulă matrice extracelulară
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al., 2000). MMPs și TIMPs sunt produse temporar ca răspuns la semnale externe ca: diverse proteaze, citokine sau factori de creștere, interacțiunile celulă matrice extracelulară și celulă-celulă. Trecerea în revistă a literaturii relevă scăderea MMP-2 și creșterea TIMP-1 în venele varicoase, comparativ cu venele normale (Porto et al., 1995), nivele scăzure de MMP-1 și MMP-13 în venele localizate inferior, comparativ cu cele localizate superior (Gillespie et al., 2002), rezultate contradictorii referitoare la prezența și nivelul TIMP-1, TIMP-2 (Johnson et al., 2001
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
elastină, fibronectină, laminină) sintetizate de celulele musculare netede și de fibroblaste este extrem de variabilă (Borden, Heller, 1997), astfel încât nu este stabilit încă un pattern. În acest context, obiectivul urmărit a fost reprezentat de investigarea expresiei MMPs și TIMPs în venele varicoase corespondente stadiilor CEAP 2-3 (varice simple) și CEAP 4-6 (varice complicate), urmărindu-se profilul distribuției markerilor, în raport cu morfologia asociată stadiului clinic. 7.5.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Pentru evaluarea expresiei MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 am utilizat un scor semicantitativ bazat
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
intensitate scăzută, ++ pentru intensitate moderată, +++ pentru intensitate crescută. Cazurile pentru care reacția imunohistochimică a fost absentă (în condițiile existenței unui control pozitiv) au fost considerate negative. 7.5.3. REZULTATE 7.5.3.1. EXPRESIA MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2-3 Reacțiile pentru MMP-2 (tabel 50) au fost negative în 6 din cele 8 cazuri investigate, la nivelul tuturor segmentelor recoltate. Pozitivitate de intensitate scăzută a fost prezentă doar în două cazuri, în manieră discontinuă la
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
au fost identificate la nivelul endoteliului și țesutului subendotelial, în jurul celulelor musculare din tunica medie și adventiceal, în vasa vasorum și celulele conjunctive adiacente. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. 7.5.3.2. EXPRESIA MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ÎN BOALA VARICOASĂ - VARICE COMPLICATE -STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile pentru MMP-2 au fost negative în 3 din cele 5 cazuri investigate, la nivelul tuturor segmentelor recoltate (tabel 51
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și adventiceal, în vasa vasorum și celulele conjunctive adiacente. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. 7.5.3.2. EXPRESIA MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ÎN BOALA VARICOASĂ - VARICE COMPLICATE -STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile pentru MMP-2 au fost negative în 3 din cele 5 cazuri investigate, la nivelul tuturor segmentelor recoltate (tabel 51). Pozitivitate de intensitate scăzută și medie a fost prezentă în celelalte două cazuri, în capilarele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fiind medie. TIMP-1 a fost absent la nivel endotelial și prezent, cu intensitate crescută, în capilarele de neoformație intramurale, vasa vasorum și celulele adventiceale. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. Imaginile din figurile 160-167 ilustrează profilul MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 pentru sublotul 2. 7.5.4. DISCUȚII Perturbarea echilibrului între activitatea MMPs și TIMPs a fost propusă ca mecanism pentru acumularea matricei extracelulare, în venele varicoase
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
varicos gambier și venele perforante. Imaginile din figurile 160-167 ilustrează profilul MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 pentru sublotul 2. 7.5.4. DISCUȚII Perturbarea echilibrului între activitatea MMPs și TIMPs a fost propusă ca mecanism pentru acumularea matricei extracelulare, în venele varicoase (Woodside et al., 2003). Familia MMPs include până în prezent 26 de enzime, fiind identificate 24 din genele lor codificante (Li et al., 2000, Visse, Nagase, 2003). Pe baza specificității substratului, a similarității de secvențe și a organizării domeniilor, MMP sunt
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
TIMP-2 inhibă activitatea MMP, cu excepția MMP-9 (Folgueras et al., 2004) și a pro-MMP-2. TIMP-2 este co-exprimat constitutiv cu MMP-2 (Richards, Agro, 1994, Borden, Heller, 1997). Trecerea în revistă a literaturii de specialitate, axată pe studiul MMPs și TIMPs în boala varicoasă, a permis o evaluare a rezultatelor obținute de grupuri de cercetători interesați de acest subiect. Trebuie menționat faptul că există foarte puține studii axate pe investigații imunohistochimice, iar rezultatele sunt controversate. Sunt raportate nivele MMP-1 și TIMP-1 crescute, precum și nivele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
MMP-1 și TIMP-1 crescute, precum și nivele MMP-2 scăzute la nivelul joncțiunii safeno-femurale în comparație cu venele control (Parra et al, 1998). Sunt demonstrate diferențe regionale în componentele matricei extracelulare și în activitatea MMP1 și MMP-13, între segmentele proximale și distale ale venelor varicoase (Shireman et al., 1996, Gillespie et al., 2002). Alte diferențe au fost obținute între distribuția MMP-1 și MMP-9 (Woodside et al, 2003), venele normale și cele varicoase exprimând ambele MMPs la nivelul celulelor endoteliale, celulelor musculare netede și fibroblastelor, dar
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și în activitatea MMP1 și MMP-13, între segmentele proximale și distale ale venelor varicoase (Shireman et al., 1996, Gillespie et al., 2002). Alte diferențe au fost obținute între distribuția MMP-1 și MMP-9 (Woodside et al, 2003), venele normale și cele varicoase exprimând ambele MMPs la nivelul celulelor endoteliale, celulelor musculare netede și fibroblastelor, dar reacția endotelială la nivelul microvaselor adventiceale, în venele normale, fiind mai puternică, sub raport calitativ și cantitativ. Activatorii plasminogenului par a juca un rol important în activarea
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
dar reacția endotelială la nivelul microvaselor adventiceale, în venele normale, fiind mai puternică, sub raport calitativ și cantitativ. Activatorii plasminogenului par a juca un rol important în activarea MMPs, ceea ce duce la fibroză la nivelul peretelui venos și formarea dilataților varicoase; aceste date necesită însă studii suplimentare pentru confirmare (Shireman et al., 1996, Badier Commander et al., 2000, Kosugi et al., 2003). Studii asupra stadiilor avansate ale bolii varicoase, complicate cu ulcer, relevă că MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 au avut nivele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
MMPs, ceea ce duce la fibroză la nivelul peretelui venos și formarea dilataților varicoase; aceste date necesită însă studii suplimentare pentru confirmare (Shireman et al., 1996, Badier Commander et al., 2000, Kosugi et al., 2003). Studii asupra stadiilor avansate ale bolii varicoase, complicate cu ulcer, relevă că MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 au avut nivele crescute în exudatul pacienților cu ulcer venos activ față de cei cu plăgi traumatice (Wysocki et al, 1993, Bullen et al 1995, Weckroth et al, 1996). Analiza biopsiilor de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
et al., 1996), cu rezultate care raportează nivele scăzute ale MMPs în regiunea inferioară (proximală), față de regiunea superioară (distală). Spre deosebire de aceste rezultate, datele noastre susțin absența unor diferențe majore în profilului MMPs și TIMPs între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. Modificările similare în profilul MMPs și TIMPs, în diferite segmente, indică afectarea completă a sistemului venos, care poate fi corelată cu predispoziția genetică. În pofida diferențelor existente între diferitele studii, este cert că alterările în producția MMPs
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
2000, Bennett, 1999, Intengan, Schiffrin, 2001), dar și patologice - fiind o trăsătură a remodelării peretelui vascular în ateroscleroză, boli inflamatorii sau anevrisme (Lopez-Candel et al., 1997, Walsh et al., 2000, Bennett, 1999). Dovezi recente sugerează că defectele peretelui în venele varicoase, prin înlocuirea treptată a componentelor normale, este asociată cu dezechibrul procesului apoptotic (Ascher et al., 2000, Ascher et al., 2001, Bujan et al., 2000, Urbanek et al., 2004, Ducasse et al., 2005). Apoptoza a fost analizată la nivelul populațiilor celulare
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
indicând că modificările celulelor musculare netede, în context apoptotic, sunt importante pentru arhitectura și tonusul venos. Trecerea în revistă a literaturii dedicate acestui subiect relevă însă faptul că sunt puține date despre rolul morții celulare programate în leziunile peretelui venei varicoase. Pornind de la datele existente în literatură, obiectivul urmărit a fost reprezentat de investigarea activității apoptotice la nivelul celulelor musculare netede din tunica medie a peretelui venos. Trebuie menționat faptul că am considerat relevantă exclusiv analiza profilului pro apoptotic, în condițiile
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
musculare netede din tunica medie a peretelui venos. Trebuie menționat faptul că am considerat relevantă exclusiv analiza profilului pro apoptotic, în condițiile în care fluxul principal de publicații nu raportează diferențe între profilul anti-apoptotic al venelor normale și al celor varicoase. 7.6.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Pentru evaluarea expresiei Bax am utilizat un scor semicantitativ, adaptat după scoruri operaționale în literatura dedicată patologiei tumorale, pentru analiza valorii prognostice a unor biomarkeri (Zlobec et al., 2007b). În raport de intensitatea de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în 3 clase: intensitate slabă (+), intensitate moderată (++) și intensitate puternică (+++). Cazurile pentru care reacția imunohistochimică a fost absentă (în condițiile existenței unui control pozitiv) au fost considerate negative. 7.6.3. REZULTATE 7.6.3.1. EXPRESIA BAX ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2-3 Reacțiile imunohistochimice pentru Bax (tabelul 52) au fost pozitive, la nivelul tuturor segmentelor recoltate, în 7 din cele 8 cazuri investigate. Un caz a prezentat reacție imunohistochimice Bax negativă. Intensitatea reacției, apreciată pentru celulele musculare
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
cele 8 cazuri investigate. Un caz a prezentat reacție imunohistochimice Bax negativă. Intensitatea reacției, apreciată pentru celulele musculare din tunica medie, a fost crescută în 3 cazuri, și moderată în 4 cazuri. 7.6.3.2. EXPRESIA BAX ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile imunohistochimice pentru Bax (tabelul 53) au fost negative, la nivelul tuturor segmentelor recoltate, în 4 din cele 5 cazuri investigate. Un singur caz a prezentat reacție imunohistochimică pozitivă, de intensitate scăzută, la nivelul celulelor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]