13,817 matches
-
0,20 ml Se amestecă și, după aproximativ 3 minute, se citește absorbția soluției (A1). Reacția se începe prin adăugarea: soluției 4 (punctul 4.4) 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă și se așteaptă 15 minute; se citește absorbția și se verifică dacă reacția s-a oprit în următoarele două minute (A2). Se adaugă imediat: soluția 5 (punctul 4.5) 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă, se citește absorbția după 10 minute și se verifică dacă reacția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
amestecă și se așteaptă 15 minute; se citește absorbția și se verifică dacă reacția s-a oprit în următoarele două minute (A2). Se adaugă imediat: soluția 5 (punctul 4.5) 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă, se citește absorbția după 10 minute și se verifică dacă reacția s-a oprit după două minute (A3). Se calculează diferențele de absorbții: A2 - A1 corespunzătoare glucozei, A3 - A2 corespunzătoare fructozei, pentru cuvele de referință și probe. Se calculează diferențele de absorbție pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
minute (A2). Se adaugă imediat: soluția 5 (punctul 4.5) 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă, se citește absorbția după 10 minute și se verifică dacă reacția s-a oprit după două minute (A3). Se calculează diferențele de absorbții: A2 - A1 corespunzătoare glucozei, A3 - A2 corespunzătoare fructozei, pentru cuvele de referință și probe. Se calculează diferențele de absorbție pentru cuva de referință (ΔAR) și cuva probă (ΔAS) și se obține: pentru glucoză: ΔAG = ΔAS - ΔAR pentru fructoză: ΔAF = ΔAS
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
citește absorbția după 10 minute și se verifică dacă reacția s-a oprit după două minute (A3). Se calculează diferențele de absorbții: A2 - A1 corespunzătoare glucozei, A3 - A2 corespunzătoare fructozei, pentru cuvele de referință și probe. Se calculează diferențele de absorbție pentru cuva de referință (ΔAR) și cuva probă (ΔAS) și se obține: pentru glucoză: ΔAG = ΔAS - ΔAR pentru fructoză: ΔAF = ΔAS - ΔAR Notă: Timpul necesar pentru completarea reacției enzimatice poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
lot. 5.3. Exprimarea rezultatelor 5.3.1. Calculare Formula generală pentru calcularea concentrației este: unde: V = volumul soluției testate (ml) v = volumul probei M= masa moleculară a substanței de determinat d = drumul optic a cuvei (cm) ε = coeficientul de absorbție al AFDNH la 340 nm (=6,3 Nm-1 1 cm-1) și V = 2,92 ml pentru măsurarea glucozei V = 2,94 ml pentru măsurarea fructozei v = 0,20 ml M 180 = d = 1 astfel încât: pentru glucoză: C (g/l) = 0
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de hidroxid de sodiu (NaOH) 1 M. 3.2. Aparatura 3.2.1. Coloană de sticlă cu diametrul interior de 10 - 11 mm și lungimea de aproximativ 300 mm, echipată cu robinet de golire. 3.2.2. Spectrofotometru pentru determinarea absorbției la o lungime de undă de 490 nm, cu cuve gradate cu cale optică de 10 mm. 3.3. Metoda de lucru 3.3.1. Pregătirea coloanei de schimb ionic Se introduce un dop din vată de sticlă în coloana
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
1.2.2), mai întâi în flaconul b și imediat după aceea în flaconul a. Se pornește imediat un cronometru și se toarnă conținutul flacoanelor a și b în cuvele spectrofotometrului. După 90 de secunde se înregistrează la 490 nm absorbția lichidului din flaconul a (determinare) comparativ cu lichidul b (martor). Soluțiile cu niveluri ridicate de acid tartric, care dau absorbții mai mari comparativ cu standardul maxim, se diluează cu sulfat de sodiu 7,1% și se determină ca mai înainte
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
și se toarnă conținutul flacoanelor a și b în cuvele spectrofotometrului. După 90 de secunde se înregistrează la 490 nm absorbția lichidului din flaconul a (determinare) comparativ cu lichidul b (martor). Soluțiile cu niveluri ridicate de acid tartric, care dau absorbții mai mari comparativ cu standardul maxim, se diluează cu sulfat de sodiu 7,1% și se determină ca mai înainte. 3.3.3.2. Vinuri cu adaos de acid mezotartric Când se analizează vinuri la care s-a adăugat sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
conținând 1, 2, 3, 4 și 5 g/l acid tartric. Se introduc în două flacoane conice a și b 20 ml din aceste soluții și se continuă cum s-a descris anterior pentru eluatul de vin. Un grafic al absorbțiilor acestor soluții în funcție de concentrația lor în acid tartric este o linie dreaptă, ușor curbată spre interior către origine. Dacă este necesar, se trasează această parte a curbei cu mai multă grijă utilizând determinări pe soluții cu concentrații precis cunoscute, mai
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
dreaptă, ușor curbată spre interior către origine. Dacă este necesar, se trasează această parte a curbei cu mai multă grijă utilizând determinări pe soluții cu concentrații precis cunoscute, mai mici de 1,0 g/l. 3.3.5. Exprimarea rezultatelor Absorbția măsurată pentru eluat se găsește pe curba de calibrare și se citește concentrația acidului tartric în vin, în grame pe litru. Rezultatul se exprimă cu o cifră zecimală. 17. ACIDUL CITRIC 1. PRINCIPUL METODEI Acidul citric este convertit în oxaloacetat
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
redusă (NADH): oxaloacetat + NADH + H+ L-maleat + NAD+ piruvat + NADH + H+ L-lactat + NAD+ Cantitatea de NADH oxidată la NAD+ în aceste reacții este proporțională cu cantitatea de citrat prezent. Oxidarea NADH este măsurată de descreșterea rezultantă a puterii de absorbție la o lungime de undă de 340 nm. 2. REACTIVI 2.1. Soluție tampon pH 7,8 (0,51 M glicilglicină: pH 7,8; Zn2+ (0,6x10-3M): Se dizolvă 7,13 g glicilglicină în aproximativ 70 ml de apă bidistilată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
Se recomandă ca înainte de determinare să fie verificată activitatea enzimei. 2.5. Polivinilpolipirolidonă (PVPP) Notă: Toți reactivii de mai sus sunt disponibili în comerț. 3. APARATURA 3.1. Un spectrofotometru pentru determinări la 340 nm, lungimea de undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil se poate utiliza un spectrofotometru cu o sursă spectrală discontinuă, pentru determinări la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse determinări ale absorbției absolute (nu sunt folosite curbe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
lungimea de undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil se poate utiliza un spectrofotometru cu o sursă spectrală discontinuă, pentru determinări la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse determinări ale absorbției absolute (nu sunt folosite curbe de calibrare, dar standardizarea se face prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele de lungime de undă și absorbția spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu lungimea drumului optic de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
pentru determinări la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse determinări ale absorbției absolute (nu sunt folosite curbe de calibrare, dar standardizarea se face prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele de lungime de undă și absorbția spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu lungimea drumului optic de 1 cm sau cuve de folosință unică. 3.3. Micropipete pentru pipetarea de volume în intervalul 0,02 la 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Determinarea citratului se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
într-un flacon conic de 50 ml, se adaugă PVPP umed luat de pe filtru cu o spatulă. Se agită 2-3 minute. Se filtrează. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la o lungime de undă de 340 nm se determină absorbția folosind cuve de 1 cm, utilizând aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic). Se adaugă următoarele în cuve de 1 cm: Cuvă de referință (ml) Cuvă probă (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
luat de pe filtru cu o spatulă. Se agită 2-3 minute. Se filtrează. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la o lungime de undă de 340 nm se determină absorbția folosind cuve de 1 cm, utilizând aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic). Se adaugă următoarele în cuve de 1 cm: Cuvă de referință (ml) Cuvă probă (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,10 0,10 Proba de măsurat - 0
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,10 0,10 Proba de măsurat - 0,20 Apă bidistilată 2,00 1,80 Soluția 2.3 0,02 0,02 Se amestecă și după aproximativ 5 minute se citește absorbția soluțiilor din cuvele de referință și probă (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă; se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ cinci minute) și se citesc absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și probă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
și după aproximativ 5 minute se citește absorbția soluțiilor din cuvele de referință și probă (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă; se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ cinci minute) și se citesc absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și probă (A2). Se calculează diferența absorbțiilor (A2-A1) pentru cuvele de referință și probă, Ar și As. La final, se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
referință și probă (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,02 ml 0,02 ml Se amestecă; se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ cinci minute) și se citesc absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și probă (A2). Se calculează diferența absorbțiilor (A2-A1) pentru cuvele de referință și probă, Ar și As. La final, se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
aici, 3,14 ml) v = volumul probei în ml (aici, 0,2 ml) M = masa moleculară a substanței de determinat (aici, pentru acid citric anhidru, M = 192,1) d = drumul optic în cuvă în cm (aici, 1 cm) = coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm = 6,3 m mol-1 1 cm-1), astfel că C = 479 x A Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, rezultatul se înmulțește cu factorul de diluare. Notă: La 334 nm: C = 488 A (=6,2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
transformă în L-alanină printr-o reacție catalizată de glutamat piruvat transaminază (GPT): (1) L-lactat + NAD+ piruvat + NADH + H+ (2) D-lactat + NAD+ piruvat + NADH + H+ (3) Piruvat + L-glutamat L-alanină + -ketoglutarat Cantitatea de NADH formată, măsurată de creșterea absorbției la lungimea de undă de 340 nm, este proporțională cu cantitatea de lactat prezentă inițial. Notă: Acidul L-lactic poate fi determinat independent utilizând reacțiile (1) și (3), iar acidul D-lactic poate fi determinat în mod similar utilizând reacțiile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
stabilă cel puțin un an la 4° C. Se recomandă înainte de determinare verificarea activității enzimei. Notă: Toți reactivii sunt disponibili în comerț. 2.2. Aparatură 2.2.1. Un spectrofotometru pentru determinări la 340 nm., lungimea de undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil se poate utiliza un spectrofotometru cu o sursă spectrală discontinuă, care să permită măsurători la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse măsurători ale absorbției absolute (adică nu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil se poate utiliza un spectrofotometru cu o sursă spectrală discontinuă, care să permită măsurători la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse măsurători ale absorbției absolute (adică nu sunt folosite curbe de calibrare, dar standardizarea se face prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele de lungime de undă și absorbția spectrală a aparatului. 2.2.2. Cuve de sticlă cu lungimea căii
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
măsurători la 334 nm sau 365 nm. Deoarece sunt incluse măsurători ale absorbției absolute (adică nu sunt folosite curbe de calibrare, dar standardizarea se face prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele de lungime de undă și absorbția spectrală a aparatului. 2.2.2. Cuve de sticlă cu lungimea căii optice de 1 cm sau cuve de folosință unică. 2.2.3. Micropipete pentru pipetarea de volume în intervalul 0,02 la 2 ml. 2.3. Pregătirea probei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
Metoda de lucru 2.4.1. Determinarea acidului lactic total Soluția tampon trebuie să fie la o temperatură între 20 și 25°C înainte de a trece la determinare. Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuve cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic) sau cu apă ca standard. Se pun următoarele în cuve cu drum optic de 1 cm: Cuvă de referință
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]