724 matches
-
spoturile cromatografice. Intensitatea acestora se înregistrează sub formă de curbă care se manifestă sub formă de picuri a căror arie se folosește pentru calcularea concentrației. V. 1. 2. CROMATOGRAFIA PE STRAT SUBȚIRE THIN LAYER CHROMATOGRAPHY (TLC) Principii generale În procesul cromatografic intervin legături intermoleculare de slabă energie care sunt de trei tipuri: forțele van der Waals; legăturile de hidrogen; complexele de transfer de sarcină. Doar fizisorbția este implicată în fenomenele cromatografice. O moleculă fizisorbită nu-și pierde identitatea. Forțele van der
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
STRAT SUBȚIRE THIN LAYER CHROMATOGRAPHY (TLC) Principii generale În procesul cromatografic intervin legături intermoleculare de slabă energie care sunt de trei tipuri: forțele van der Waals; legăturile de hidrogen; complexele de transfer de sarcină. Doar fizisorbția este implicată în fenomenele cromatografice. O moleculă fizisorbită nu-și pierde identitatea. Forțele van der Waals Energia lor corespunde căldurii de vaporizare a unui lichid sau căldurii de sublimare a unui solid; ele sunt responsabile de existența lichidelor și cristalelor moleculare. Acestea sunt forțe atractive
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
kads a solutului pe adsorbant, în prezența aceluiași solvent. Constanta de adsorbție este determinată experimental prin mijloace foarte simple de punere în contact a solutului cu adsorbantul și solventul. După cum se știe, distribuția solutului între cele două faze conduce procesul cromatografic și se va putea prevedea retenția, plecând de la valoarea lui Kads. Migrarea prin capilaritate a eluantului cu traversarea adsorbantului antrenează selectiv acești soluți, de fapt, în funcție de natura lor chimică compușii care au o mare energie de adsorbție sunt puternic fixați
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
sau un amestec de solvenți), caracterizat prin forța eluantă εo. Mărimi fundamentale Fenomenul de adsorbție în strat subțire poate fi considerat ca o tehnică de separare a compușilor dintr-un amestec. Pentru a putea evalua calitatea separării prin diferite sisteme cromatografice, pe de o parte și prin diferite metode cromatografice, pe de altă parte, este necesară cuantificarea separării urmărind anumiți parametrii, care pot fi modificați astfel încât să se obțină cea mai bună separare. Evaluarea calității unei cromatograme se face comparând: - capacitatea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
εo. Mărimi fundamentale Fenomenul de adsorbție în strat subțire poate fi considerat ca o tehnică de separare a compușilor dintr-un amestec. Pentru a putea evalua calitatea separării prin diferite sisteme cromatografice, pe de o parte și prin diferite metode cromatografice, pe de altă parte, este necesară cuantificarea separării urmărind anumiți parametrii, care pot fi modificați astfel încât să se obțină cea mai bună separare. Evaluarea calității unei cromatograme se face comparând: - capacitatea de separare a unui amestec, caracterizată prin selectivitate; - lățimea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Evaluarea calității unei cromatograme se face comparând: - capacitatea de separare a unui amestec, caracterizată prin selectivitate; - lățimea picurilor caracterizată prin eficacitate; - rezoluția; - Rf-ul. Trebuie să ținem cont în mod egal de timp care este un factor decisiv în alegerea metodei cromatografice. Fiecare cromatogramă obținută cu același adsorbant, același eluant și în condiții experimentale identice prezintă același aspect: fiecare compus migrează în același mod. Astfel, este posibil pentru un sistem cromatografic dat, să se caracterizeze un solut (substanța dizolvată) prin distanța pe
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
egal de timp care este un factor decisiv în alegerea metodei cromatografice. Fiecare cromatogramă obținută cu același adsorbant, același eluant și în condiții experimentale identice prezintă același aspect: fiecare compus migrează în același mod. Astfel, este posibil pentru un sistem cromatografic dat, să se caracterizeze un solut (substanța dizolvată) prin distanța pe care o parcurge în raport cu frontul de solvent. Desfășurarea procesului cromatografic Se va distinge cazul de mișcare al fazei mobile prin capilaritate și mișcare prin flux forțat. Placa, faza staționară
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
în condiții experimentale identice prezintă același aspect: fiecare compus migrează în același mod. Astfel, este posibil pentru un sistem cromatografic dat, să se caracterizeze un solut (substanța dizolvată) prin distanța pe care o parcurge în raport cu frontul de solvent. Desfășurarea procesului cromatografic Se va distinge cazul de mișcare al fazei mobile prin capilaritate și mișcare prin flux forțat. Placa, faza staționară În CSS, plăcile folosite sunt constituite dintr-un suport inert rigid sau flexibil (placă de sticlă, foiță de aluminiu sau de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
foiță de aluminiu sau de poliamidă, etc.), pe care faza staționară este depusă sub forma unui strat subțire (grosimea între 200 și 250 μm). Stratul subțire depus se amestecă cu lianți minerali sau organici pentru a asigura adeziunea pe placa cromatografică. Dimensiunile obișnuite ale suprafeței stratului sunt: - 10 x 5 cm; - 10 x 10 cm; - 10 x 20 cm; - 20 x 20 cm. In afara plăcilor clasice ale cromatografiei pe strat subțire se folosesc așa numitele HPTLC (High Performance Thin Layer
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
gurul Acesta reprezintă pământul de infuzorii ce se găsește în natură sub formă de zăcăminte provenind din scoici microscopice de diatomee. Este constituit din dioxid de siliciu cristalizat (kieselsaϋre) Structura sa poroasă îi oferă posibilități adsorbante. Este folosit în separările cromatografice de repartiție când este impregnat cu substanțe hidrofile sau lipofile. Este un adsorbant inactiv deoarece are o suprafață specifică foarte mică (aproximativ 1 m2/g) și pH neutru. Kieselgurul folosit în cromatografia pe strat subțire este de o calitate specială
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Detectorii Sunt celule fotoelectrice sau fotomultiplicatoare. Radiațiile incidente lovesc o placă metalică încărcată negativ care emite atunci electroni. Lungimea de undă a luminii incidente trebuie să fie inferioară lungimii de undă limită, provocând emisia. Formarea de derivați pre sau post cromatografic Când solutul nu posedă nici o grupare cromoforă susceptibilă de a permite o detecție spectrofotometrică, trebuie să se transforme solutul printr-o reacție cu un reactiv specific. Această etapă poate fi realizată înaintea cromatografierii. Formarea derivaților după cromatografiere este foarte răspândită
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
și proteine. Reactivul poate fi prezent în faza staționară. Nu trebuie confundat cu indicatorul de fluorescență al plăcilor. Astfel, utilizarea unei sări de zirconiu permite detectarea unor estrogeni. Măsurări densitometrice În scop cantitativ evaluarea conținutului în substanța activă de pe placa cromatografică se face cu ajutorul densitometrelor prin două moduri: - măsurarea prin transmisie; - măsurarea prin reflexie. V. 1. 2. 1. CROMATOGRAFIA PE STRAT SUPRAPRESURIZAT OVERPRESSURED LAYER CHROMATOGRAPHY( OPLC) Metoda constă în introducerea unei plăci cromatografice într-o incintă închisă sub presiune. Placa este
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
cantitativ evaluarea conținutului în substanța activă de pe placa cromatografică se face cu ajutorul densitometrelor prin două moduri: - măsurarea prin transmisie; - măsurarea prin reflexie. V. 1. 2. 1. CROMATOGRAFIA PE STRAT SUPRAPRESURIZAT OVERPRESSURED LAYER CHROMATOGRAPHY( OPLC) Metoda constă în introducerea unei plăci cromatografice într-o incintă închisă sub presiune. Placa este acoperită de o membrană flexibilă. Odată închis capacul aparatului, se aplică o presiune asupra membranei de 1,2 Mpa-2,5 MPa. Faza mobilă este apoi forțată să traverseze stratul subțire. Omogenitatea și
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
mai multe tehnici de lucru. Eșantioanele pot fi depuse pe o placă uscată, placa poziționată în aparat, developarea și cromatografierea se opresc atunci când se consideră necesar. În sfârșit, o nouă versiune de OPLC, utilizează 2, 3, sau mai multe plăci cromatografice în cursul unei singure developări. Această tehnică denumită Overpressured Multi Layer Cromatography (OPMLC) este foarte atractivă datorită numărului foarte important de eșantioane (50-100) ce pot fi separate într-o singură migrare, reproductibilitatea fiind identică pentru ansamblul plăcilor cromatografice. APLICAȚIILE CROMATOGRAFIEI
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
multe plăci cromatografice în cursul unei singure developări. Această tehnică denumită Overpressured Multi Layer Cromatography (OPMLC) este foarte atractivă datorită numărului foarte important de eșantioane (50-100) ce pot fi separate într-o singură migrare, reproductibilitatea fiind identică pentru ansamblul plăcilor cromatografice. APLICAȚIILE CROMATOGRAFIEI PE STRAT SUPRAPRESURIZAT urmărirea interacției dintre microbi și unele substanțe medicamentoase; determinarea trans-veratrolului; determinarea aflatoxinelor B1, B2, G1, G2 prin măsurări densitometrice; analiza carotenoidelor din piperul roșu; analiza glicozidelor digitalice. V.1. 2. 2. CROMATOGRAFIA PLANARĂ MULTIDIMENSIONALĂ MULTIDIMENSIONAL
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
țintă se delimitează o nouă fracțiune e) cromatograma după a treia separare utilizând un al treilea sistem de solvenți 2D CP modulată (nPC) Ilustrarea schematică a 2D-CP modulată (nCP) bazată pe micșorarea gradientului de tărie a solventului și refocalizarea zonei cromatografice a) aplicarea probei înainte de începerea separării b) frontul de solvent cu primul sistem ( n=1) pentru refocalizarea zonei de start c) frontul de solvent pentru al doilea sistem (n=2) când compușii din zona de start migrează (ST2<ST1) d
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
cuplate CP (CP-CP) ce asigură o separare multidimensională pe faze staționare prin descreșterea polarității Combinare MD-PC Ilustrarea cuplării de straturi OPLC (OPLC-OPLC) pentru a asigura separarea MD cu trei faze staționare cu polaritate descrescătoare. a) principiul utilizării a trei plăci cromatografice b) OPLC-OPLC în flux continuu (canal îngust, faza mobilă de intrare și ieșire, canal gros, fante pentru a asigura transferul fazei mobile între două plăci) APLICAȚIILE CROMATOGRAFIEI PLANARE Identificarea substanțelor medicamentoase; Separarea și identificarea medicamentelor din forme farmaceutice; Controlul impurităților
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
5-30 cm, diametrul interior 1-9 mm) 2. FAZE STATIONARE De obicei, faza staționară este formată din particule uniforme, de dimensiuni mici (5-10 mm), împachetate într-o coloană cilindrică. Sistemele utilizate sunt cele care definesc mecanismul de separare. CAPITOLUL V Metode cromatografice de analiză a medicamentelor 165 Absorbția cromatografică rezultă din interacțiunea solventului și cu suprafața fazei staționare solide. In general, eluenții utilizați pentru absorbția cromatografică sunt mai puțin polari decât fazele staționare și aceste sisteme sunt descrise ca faze normale. Cromatografia
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
FAZE STATIONARE De obicei, faza staționară este formată din particule uniforme, de dimensiuni mici (5-10 mm), împachetate într-o coloană cilindrică. Sistemele utilizate sunt cele care definesc mecanismul de separare. CAPITOLUL V Metode cromatografice de analiză a medicamentelor 165 Absorbția cromatografică rezultă din interacțiunea solventului și cu suprafața fazei staționare solide. In general, eluenții utilizați pentru absorbția cromatografică sunt mai puțin polari decât fazele staționare și aceste sisteme sunt descrise ca faze normale. Cromatografia de partiție implică o fază staționară lichidă
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
într-o coloană cilindrică. Sistemele utilizate sunt cele care definesc mecanismul de separare. CAPITOLUL V Metode cromatografice de analiză a medicamentelor 165 Absorbția cromatografică rezultă din interacțiunea solventului și cu suprafața fazei staționare solide. In general, eluenții utilizați pentru absorbția cromatografică sunt mai puțin polari decât fazele staționare și aceste sisteme sunt descrise ca faze normale. Cromatografia de partiție implică o fază staționară lichidă nemiscibilă cu dizolvantul și care îmbracă un suport inert. Sistemele de analiză pot fi: cu faze normale
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
gradient (de solvent, de temperatură, de debit etc.). Eluția normală (izocratică) utilizează un eluent a cărui compoziție și viteză sunt constante. În eluția izocratică, separarea poate fi descrisă cu ajutorul ecuațiilor date de unii parametrii, prezentați la aspectele teoretice ale procesului cromatografic. Timp de reținere. Eluția cu gradient de solvent constă în modificarea continuă a compoziției eluantului în timpul separării, astfel încât puterea de eluție să fie gradat mărită. Este cunoscut faptul că, migrarea diferențiată a componentelor dintr-un amestec depinde de retenția preferențială
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
ionic. Dacă > 1 ⇒ B+ din soluție are o afinitate mai mare decât A+ pentru schimbul ionic, cu deplasarea reacției spre dreapta. ABK Dacă < 1 ⇒ A+ are afinitate mai mare decât B+, procesul fiind deplasat spre stânga. ABK CAPITOLUL V Metode cromatografice de analiză a medicamentelor 181 Dacă = 1 ⇒ afinitatea lui A+ și B+ pentru schimbul ionic e asemănătoare. ABK Când sarcina (Z) a ionului e diferită de 1, ionii prezintă un plus de afinitate față de ioni monovalenți. Pentru caracterizarea schimbului se
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fixat inițial A+. Dacă izoterma e concavă (3) ⇒ [B]m > [B]S, ionul B+ are o afinitate mai mică decât ionul A+ fixat inițial. Mărimile ce caracterizează schimbul ionic sunt: VR si TR. Volumul de retentie VR al unei analize cromatografice . În cromatografie, deplasarea ionului se va realiza de către un ion eluent E, eluent constitutiv al fazei mobile, de concentrație CE. Dacă ionul E are aceeași încărcare ca ionul de determinat, X, și vom nota cu R schimbatorul (rășina) și prin
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fluorocarbon) și acest strat cuprinde gruparea funcțională. Acest grup de schimbători de ioni sunt produși prin legarea chimică a aminelor cuaternare pentru a forma schimbători puternici de anioni sau de alchilsulfonați pentru a forma schimbători puternici de cationi. Avantaje : - eficiență cromatografică bună; - stabilitate și rezistență la presiuni mari. Dezavantaje : - pH limitat; 2 > pH < 7; - afinitatea grupelor silanol libere de la suprafață și a silicei expuse la ionii metalici cu densitate mare (metale tranziționale), ce sunt ireversibil adsorbiți la suprafață, interferând analizele. Polimerii
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
vor elua sau penetra prin faza staționară cu viteze diferite. Acest lucru se datorează porilor fazei staționare care permit intrarea în ei numai a moleculelor de o mărime mai mică decât lărgimea lor, iar moleculele mari vor părăsi primele coloana cromatografică. În cazul unei analize de proteine de diferite mărimi, procesul cromatografic poate fi reprezentat astfel: Vt = volumul total; Vo = volumul de lichid dintre particulele de gel (volumul spațiului gol sau volumul 1); Vi = volumul intern (volumul 2); Vg = volumul matricei
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]