941 matches
-
hemaglutinante/0,025 ml; ... c) eritrocite 1% de pui; ... d) ser de pui martor negativ; e) ser martor pozitiv. ... 2. Metodă de lucru: a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au baza în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
ser martor pozitiv. ... 2. Metodă de lucru: a) se distribuie 0,025 ml tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au baza în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând 4 sau 8 unități hemaglutinante; ... e) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus placă
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
tampon fosfat salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au baza în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând 4 sau 8 unități hemaglutinante; ... e) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus placă la temperatura de 4°C, cel putin 60 de minute sau la temperatura
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
salin în toate godeurile unei microplaci din material plastic; godeurile au baza în formă de V; ... b) se adaugă 0,025 ml ser în primul godeu al plăcii; ... c) se utilizează un microdilutor pentru realizarea diluțiilor duble din godeu în godeu; ... d) se adaugă 0,025 ml lichid alantoidian conținând 4 sau 8 unități hemaglutinante; ... e) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus placă la temperatura de 4°C, cel putin 60 de minute sau la temperatura ambianța, cel
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
agitând ușor și se lasă în repaus placă la temperatura de 4°C, cel putin 60 de minute sau la temperatura ambianța, cel putin 30 de minute; ... f) se adaugă 0,025 ml din suspensia de eritrocite 1% în toate godeurile; ... g) se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la temperatura de 4°C; ... h) se citește placă după 30 - 40 de minute, la sedimentarea hematiilor martor; se face citirea prin inclinarea plăcii pentru a se observă prezența sau
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
h) se citește placă după 30 - 40 de minute, la sedimentarea hematiilor martor; se face citirea prin inclinarea plăcii pentru a se observă prezența sau absența unui flux în formă de lacrima, care se înclină în același mod că și godeurile martor care conțin numai hematii - 0,025 ml și tampon fosfat salin -0,025 ml; ... i) titrul inhibohemaglutinant corespunde celei mai mari diluții de antiser care a determinat o inhibare completă a 4 sau 8 unități de virus; pentru fiecare
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 13 aprilie 2006 privind diagnosticul, profilaxia, supravegherea şi combaterea influentei aviare. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176932_a_178261]
-
într-un mediu de L-15, care conține 5% ser de fetus bovin, 2% (v/v) 200 mM de L-glutamina și 0,08% (v/v) de 2-mercaptoetanol la 50 mM, pe lame de cultură cu 12 sau 24 de godeuri. Celelalte tulpini celulare ale căror eficacitate și sensibilitate sunt dovedite pentru izolarea virusului AIS pot fi folosite, luându-se în considerare variațiile și abilitatea acestor linii de a se reproduce în diferite tulpini celulare. Suspensia de organe tratată cu antiser
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
cultură celulară tânără aflată în faza de creștere activă, pentru a da o diluție finală de material tisular într-un mediu de cultură la 1:1.000. Pentru fiecare suspensie de organe se vor adăuga 40 f2æI inoculat într-un godeu ce conține 2 ml de mediu de cultură. Pentru a reduce riscul contaminării încrucișate este recomandat să se folosească lame separate de 12 sau 24 de godeuri pentru probele provenite de la diferite locații de ferme piscicole. III.2.2. O
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
Pentru fiecare suspensie de organe se vor adăuga 40 f2æI inoculat într-un godeu ce conține 2 ml de mediu de cultură. Pentru a reduce riscul contaminării încrucișate este recomandat să se folosească lame separate de 12 sau 24 de godeuri pentru probele provenite de la diferite locații de ferme piscicole. III.2.2. O lamă trebuie lăsată neinoculată pentru a servi drept martor negativ. O altă lama va fi inoculata cu un izolat de referință al virusului AIS ca martor pozitiv
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
negativ. O altă lama va fi inoculata cu un izolat de referință al virusului AIS ca martor pozitiv, după cum urmează: se vor inocula 100 f2æI de preparat al virusului AIS (titrat minim 10^7 TCID 50 ml^-1) în primul godeu și se amestecă bine. Un volum din acest material va fi transferat din primul godeu pe cel de-al doilea pentru a se obține o diluție de 1:10 bine amestecata. Această operație se va repeta pe toate plăcile pentru
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
ca martor pozitiv, după cum urmează: se vor inocula 100 f2æI de preparat al virusului AIS (titrat minim 10^7 TCID 50 ml^-1) în primul godeu și se amestecă bine. Un volum din acest material va fi transferat din primul godeu pe cel de-al doilea pentru a se obține o diluție de 1:10 bine amestecata. Această operație se va repeta pe toate plăcile pentru a se obține 6 diluții 1:10. Stocul (preparația mama) de virus AIS poate fi
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
nici o urmă de ECP în a 14-a zi, se va executa un test de hemabsorbtie menționat la pct. III.4. III.4. Hemabsorbtia Reproducerea virusului AIS în culturi celulare nu are întotdeauna ca rezultat apariția ECP. De aceea, fiecare godeu va face obiectul testului hemabsorbtiei descris mai jos sau, alternativ, fiecare godeu va face subiectul unui test I.F descris, menționat la pct. III.6.1. III.4.1. Mediul de cultură celulară va fi prelevat din fiecare godeu, inclusiv
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
un test de hemabsorbtie menționat la pct. III.4. III.4. Hemabsorbtia Reproducerea virusului AIS în culturi celulare nu are întotdeauna ca rezultat apariția ECP. De aceea, fiecare godeu va face obiectul testului hemabsorbtiei descris mai jos sau, alternativ, fiecare godeu va face subiectul unui test I.F descris, menționat la pct. III.6.1. III.4.1. Mediul de cultură celulară va fi prelevat din fiecare godeu, inclusiv martorii pozitivi și negativi, și fiecare prelevare va fi pusă într-un
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
fiecare godeu va face obiectul testului hemabsorbtiei descris mai jos sau, alternativ, fiecare godeu va face subiectul unui test I.F descris, menționat la pct. III.6.1. III.4.1. Mediul de cultură celulară va fi prelevat din fiecare godeu, inclusiv martorii pozitivi și negativi, și fiecare prelevare va fi pusă într-un tub steril etichetat. Se vor adăuga în fiecare godeu 500 f2æl 0,2% (v/v) suspensie de globule roșii spălate din sânge de iepure sau cal ori
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
menționat la pct. III.6.1. III.4.1. Mediul de cultură celulară va fi prelevat din fiecare godeu, inclusiv martorii pozitivi și negativi, și fiecare prelevare va fi pusă într-un tub steril etichetat. Se vor adăuga în fiecare godeu 500 f2æl 0,2% (v/v) suspensie de globule roșii spălate din sânge de iepure sau cal ori o suspensie de 0,05% (v/v) de globule roșii spălate din sânge de pastrav-curcubeu sau de somon de Atlantic și se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
o suspensie de 0,05% (v/v) de globule roșii spălate din sânge de pastrav-curcubeu sau de somon de Atlantic și se lasă la incubat la temperatura camerei timp de 45 de minute. Celulele roșii vor fi îndepărtate și fiecare godeu va fi spălat de câte două ori cu mediul L-15. Fiecare godeu va fi examinat la microscop. III.4.2. Prezenta ciorchinelui de globule roșii aderând la suprafață celulelor de SHK-1 sau TO va indica prezenta probabilă a infecției
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
de pastrav-curcubeu sau de somon de Atlantic și se lasă la incubat la temperatura camerei timp de 45 de minute. Celulele roșii vor fi îndepărtate și fiecare godeu va fi spălat de câte două ori cu mediul L-15. Fiecare godeu va fi examinat la microscop. III.4.2. Prezenta ciorchinelui de globule roșii aderând la suprafață celulelor de SHK-1 sau TO va indica prezenta probabilă a infecției cu ortomyxovirus. Dacă testul hemabsorbtiei este pozitiv, se va executa imediat un test
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
identificare cu virus, după cum este menționat la pct. III.6. III.5. Subcultivare sau reînsămânțare III.5.1. Subcultivarea se va efectua între a 13-a și a 15-a zi. Se vor adăuga 225 f2æl supernatant de cultură în godeurile care conțin celule proaspete de SHK-1 în faza activă de creștere, pe lame de 12 godeuri, apoi se lasă la incubat, la temperatura de 14 ± 2°C cel mult 18 zile. Folosindu-se un microscop, culturile celulare se vor examina
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
5.1. Subcultivarea se va efectua între a 13-a și a 15-a zi. Se vor adăuga 225 f2æl supernatant de cultură în godeurile care conțin celule proaspete de SHK-1 în faza activă de creștere, pe lame de 12 godeuri, apoi se lasă la incubat, la temperatura de 14 ± 2°C cel mult 18 zile. Folosindu-se un microscop, culturile celulare se vor examina de două ori pentru ECP, între cea de-a 5-a și cea de-a 7
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
de TO vor fi cultivate într-un mediu L-15 care conține: 5% ser de fetus bovin, 2% (v/v) de L-glutamina la 200 mM și 0,08% (v/v) de 2-mercaptoetanol la 50 mM în 24 sau 96 godeuri, cu o densitate care să producă o confluenta mai mare de 50%. Pot fi, de asemenea, folosite alte linii celulare sau medii de creștere cu eficacitate dovedită. Se vor adăuga 225 f2æl de supernatant de cultură ce se presupune a
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
mare de 50%. Pot fi, de asemenea, folosite alte linii celulare sau medii de creștere cu eficacitate dovedită. Se vor adăuga 225 f2æl de supernatant de cultură ce se presupune a fi infectată cu virus în fiecare din cele două godeuri, se amestecă și se transferă 225 f2æl pe următoarele două godeuri la o diluție de 1:5. Două godeuri suplimentare vor fi lăsate neinoculate pentru a servi drept martor. Probele de la fiecare fermă piscicola vor fi lucrate pe lame separate
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
sau medii de creștere cu eficacitate dovedită. Se vor adăuga 225 f2æl de supernatant de cultură ce se presupune a fi infectată cu virus în fiecare din cele două godeuri, se amestecă și se transferă 225 f2æl pe următoarele două godeuri la o diluție de 1:5. Două godeuri suplimentare vor fi lăsate neinoculate pentru a servi drept martor. Probele de la fiecare fermă piscicola vor fi lucrate pe lame separate, la fel și cele care servesc drept martori. Virusul se controlează
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
vor adăuga 225 f2æl de supernatant de cultură ce se presupune a fi infectată cu virus în fiecare din cele două godeuri, se amestecă și se transferă 225 f2æl pe următoarele două godeuri la o diluție de 1:5. Două godeuri suplimentare vor fi lăsate neinoculate pentru a servi drept martor. Probele de la fiecare fermă piscicola vor fi lucrate pe lame separate, la fel și cele care servesc drept martori. Virusul se controlează folosindu-se un izolat de referință al virusului
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
incubate la 14±2°C și examinate microscopic în timp de cel mult 7 zile. Dacă se observă ECP într-un stadiu incipient sau dacă acest lucru nu apare în timpul celor 7 zile, următoarea etapă va fi fixarea. Pentru aceasta, godeurile vor fi spălate cu PBS și fixate prin incubare cu acetona 80% timp de 20 de minute la temperatura camerei. Lamelele vor fi uscate la aer și colorate imediat sau stocate la o temperatură cuprinsă între 0 și 6°C
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]
-
timp de 20 de minute la temperatura camerei. Lamelele vor fi uscate la aer și colorate imediat sau stocate la o temperatură cuprinsă între 0 și 6°C pentru maximum 24 de ore înainte de colorare. III.6.1.3. Duplicatele godeurilor vor fi colorate cu anticorpi monoclonali 3H6F8 de virusul AIS sau orice alt anticorp monoclonal ale cărui eficacitate și specificitate au fost dovedite, diluate în PBS și incubate la temperatura de 37 ± 4��C timp de 30 de minute. Anticorpii
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 21 martie 2006 ce stabileşte criterii pentru zonare şi supraveghere oficială ca urmare a suspiciunii sau confirmării anemiei infectioase a somonului. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/176411_a_177740]