5,517 matches
-
de institutele oficiale enumerate în secțiunea A pct. 9. 8. Antigenul este furnizat într-o formă gata de utilizare. 9. Testul cu antigenul de Brucella tamponat trebuie realizată în modul următor: a) se pune o picătură (0,03 ml) de antigen și o picătură (0,03 ml) de ser pe o placă albă; b) cu ajutorul unui agitator, se amestecă mai întâi în linie dreaptă și apoi cu o mișcare circulară de un diametru aproximativ de 10-12 mm; c) se agită apoi
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
conservate timp de 12-24 de ore la temperatura de 37oC. b) Evaluarea Se transferă 0,2 ml din plasma stabilizată într-o eprubetă care conține 1 ml de lapte crud. După agitare, se adaugă o picătură (0,05 ml) de antigen ABR și se agită din nou. Antigenul se standardizează conform unui antigen standard pus la dispoziție de institutul menționat în pct. A 9.a). După ce a fost lăsat să se odihnească timp de 45 de minute la o temperatură de
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
temperatura de 37oC. b) Evaluarea Se transferă 0,2 ml din plasma stabilizată într-o eprubetă care conține 1 ml de lapte crud. După agitare, se adaugă o picătură (0,05 ml) de antigen ABR și se agită din nou. Antigenul se standardizează conform unui antigen standard pus la dispoziție de institutul menționat în pct. A 9.a). După ce a fost lăsat să se odihnească timp de 45 de minute la o temperatură de 37oC, se examinează rezultatul în maximum 15
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Se transferă 0,2 ml din plasma stabilizată într-o eprubetă care conține 1 ml de lapte crud. După agitare, se adaugă o picătură (0,05 ml) de antigen ABR și se agită din nou. Antigenul se standardizează conform unui antigen standard pus la dispoziție de institutul menționat în pct. A 9.a). După ce a fost lăsat să se odihnească timp de 45 de minute la o temperatură de 37oC, se examinează rezultatul în maximum 15 minute. Testul este considerat pozitiv
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
de lapte. F. Aglutinarea plasmei sanguine Plasma sanguină obținută conform metodei specificate în pct. E a) poate fi utilizată imediat după centrifugare fără să fie necesară o stabilizare termică. Se amestecă 0,05 ml de plasmă cu 1 ml de antigen pentru seroaglutinarea la 50%, ceea ce corespunde unui grad de diluție de 1:20 în cazul seroaglutinării. Se examinează rezultatul după ce s-a lăsat să se odihnească timp de optsprezece - douăzeci și patru ore la temperatura de 37oC. Testul este considerat pozitiv dacă
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
douăzeci și patru ore la temperatura de 37oC. Testul este considerat pozitiv dacă aglutinarea este egală sau mai mare de 50%. G. Testul de microaglutinare 1. Diluanții se compun dintr-o soluție salină fiziologică la 0,85%, fenolizată la 0,5%. 2. Antigenul se prepară conform indicațiilor de la pct. 6, 7 și 8 din pct. A, iar titrarea trebuie efectuată conform indicațiilor din pct. A 5. În momentul utilizării antigenului, se adaugă safranină 0:0,02% (diluție finală). 3. Serul standard este același
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
dintr-o soluție salină fiziologică la 0,85%, fenolizată la 0,5%. 2. Antigenul se prepară conform indicațiilor de la pct. 6, 7 și 8 din pct. A, iar titrarea trebuie efectuată conform indicațiilor din pct. A 5. În momentul utilizării antigenului, se adaugă safranină 0:0,02% (diluție finală). 3. Serul standard este același cu cel de la pct. A 1. 4. Aprovizionarea cu ser standard trebuie asigurată de Bundesgesundheitsamt, Berlin. 5. Proba de microaglutinare se efectuează pe plăci care conțin capsule
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
prelevă 0,025 ml din fiecare ser și se transferă pe o placă ce conține 0,025 ml de diluant. Astfel, prima diluție se aduce la valoarea de 1:5, iar diluțiile următoare se efectuează prin dublare; c) adăugare de antigen: se adaugă în fiecare capsulă ce conține diferitele diluții de ser supus examinării câte 0,025 ml de antigen. După agitare timp de 30 de secunde, fiecare placă este închisă cu capacul său și este ținută la 37oC timp de
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
diluant. Astfel, prima diluție se aduce la valoarea de 1:5, iar diluțiile următoare se efectuează prin dublare; c) adăugare de antigen: se adaugă în fiecare capsulă ce conține diferitele diluții de ser supus examinării câte 0,025 ml de antigen. După agitare timp de 30 de secunde, fiecare placă este închisă cu capacul său și este ținută la 37oC timp de douăzeci-douăzeci și patru de ore în atmosferă umedă; d) citirea rezultatelor: se evaluează aspectul depunerii de antigen prin examinarea
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
ml de antigen. După agitare timp de 30 de secunde, fiecare placă este închisă cu capacul său și este ținută la 37oC timp de douăzeci-douăzeci și patru de ore în atmosferă umedă; d) citirea rezultatelor: se evaluează aspectul depunerii de antigen prin examinarea fundului capsulei reflectat într-o oglindă concavă așezată deasupra acestuia. În caz de reacție negativă, antigenul formează depuneri în formă de nasture compact cu marginile clare și de culoare roșu intens. Dimpotrivă, în cazul reacției pozitive se formează
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
este ținută la 37oC timp de douăzeci-douăzeci și patru de ore în atmosferă umedă; d) citirea rezultatelor: se evaluează aspectul depunerii de antigen prin examinarea fundului capsulei reflectat într-o oglindă concavă așezată deasupra acestuia. În caz de reacție negativă, antigenul formează depuneri în formă de nasture compact cu marginile clare și de culoare roșu intens. Dimpotrivă, în cazul reacției pozitive se formează un voal difuz de culoare roz și repartizat uniform. Diferitele procente de aglutinare sunt determinate prin comparație cu
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
depuneri în formă de nasture compact cu marginile clare și de culoare roșu intens. Dimpotrivă, în cazul reacției pozitive se formează un voal difuz de culoare roz și repartizat uniform. Diferitele procente de aglutinare sunt determinate prin comparație cu controalele antigenului care indică 0, 25, 50, 75 și 100% aglutinare. Titrul fiecărui ser se exprimă în unități internaționale de aglutinare pe ml. Se recomandă includerea în test a controalelor cu ajutorul unui ser negativ și unui ser pozitiv diluat astfel încât să conțină
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
conțină 30 unități internaționale de aglutinare pe ml. H. Teste de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) pentru studiul brucelozei bovine 1. Se utilizează următoarele materiale și reactivi: a) micro-plăci pentru faza solidă, tăvițe sau orice altă fază solidă; b) antigenul se fixează pe faza solidă cu sau fără ajutorul anticorpilor de captaj policloni sau monocloni; c) lichidul biologic supus examinării; d) controalele pozitive și negative corespunzătoare; e) conjugatul; f) un substrat adaptat enzimei utilizate; g) o soluție de obturare, dacă
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
C. Metoda de imunodifuziune este rezervată testelor individuale. Dacă rezultatele testelor fac obiectul unei contestații motivate, se efectuează un control complementar cu ajutorul unei probe de imunodifuziune. A. Testul de imunodifuziune pe placă de geloză pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Antigenul utilizat în acest test trebuie să conțină glicoproteine ale virusului leucozei bovine. Antigenul trebuie standardizat în raport cu un ser etalon (ser EI) furnizat de Statens Veterinære Serum Laboratorium din Copenhaga. 2. Institutele din statele desemnate în continuare trebuie însărcinate să etaloneze
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
unei contestații motivate, se efectuează un control complementar cu ajutorul unei probe de imunodifuziune. A. Testul de imunodifuziune pe placă de geloză pentru studiul leucozei bovine enzootice 1. Antigenul utilizat în acest test trebuie să conțină glicoproteine ale virusului leucozei bovine. Antigenul trebuie standardizat în raport cu un ser etalon (ser EI) furnizat de Statens Veterinære Serum Laboratorium din Copenhaga. 2. Institutele din statele desemnate în continuare trebuie însărcinate să etaloneze antigenul standard de lucru în laborator în raport cu serul etalon oficial CEE (ser EI
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
utilizat în acest test trebuie să conțină glicoproteine ale virusului leucozei bovine. Antigenul trebuie standardizat în raport cu un ser etalon (ser EI) furnizat de Statens Veterinære Serum Laboratorium din Copenhaga. 2. Institutele din statele desemnate în continuare trebuie însărcinate să etaloneze antigenul standard de lucru în laborator în raport cu serul etalon oficial CEE (ser EI) furnizat de Statens Veterinære Serum Laboratorium din Copenhaga. a) Republica Federală Germania: Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere, Tübingen; b) Belgia: Institut national de recherches vétérinaires, Bruxelles; c) Franța
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Nacional de Investiçăo Veterinária, Lisabona; l) Grecia: Kέντςo Kτηvίατίxών lδςνμύτων Aθηνών, Nεωτόλεως 25. 15310 Aθήνα; m) Austria: Bundesanstalt für Tierseuchenbekämpfung, Mödling; n) Finlanda: Eläinlääkintä- ja elintarvikelaitos, Helsinki/anstalten för veterinärmedicin och livsmedel, Helsingfors; o) Suedia: Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala. 3. Antigenii etalon utilizați în laborator trebuie să fie prezenți cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala. 3. Antigenii etalon utilizați în laborator trebuie să fie prezenți cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
cel puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser de control pozitiv cunoscut; d) geloză; 0,8% agar, 8,5% NaCl, tampon Tris
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
puțin o dată pe an în laboratoarelor de referință CEE enumerate la pct. 2 pentru a fi testați în raport cu serul etalon CEE. Independent de această standardizare, antigenul utilizat poate fi etalonat conform pct. B. 4. Testul folosește următorii reactivi: a) antigen: antigenul trebuie să conțină glicoproteine specifice virusului leucozei bovine enzootice care a fost standardizat în raport cu serul oficial CEE; b) serul care trebuie testat; c) un ser de control pozitiv cunoscut; d) geloză; 0,8% agar, 8,5% NaCl, tampon Tris 0
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
constă într-o cavitate centrală în jurul căreia se ordonează 6 cavități periferice dispuse în cerc. Diametrul cavității centrale: 4 milimetri Diametrul cavităților periferice: 6 milimetri Distanța între cavitatea centrală și cele periferice: 3 milimetri. 6. Cavitatea centrală se umple cu antigenul etalon. Cavitățile periferice 1 și 4 (vezi schema de mai jos) sunt umplute cu serul pozitiv cunoscut, cavitățile 2, 3, 5 și 6 cu serurile care trebuie testate. Cavitățile trebuie umplute până la dispariția meniscului. 7. Cantitățile obținute sunt următoarele: antigen
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
antigenul etalon. Cavitățile periferice 1 și 4 (vezi schema de mai jos) sunt umplute cu serul pozitiv cunoscut, cavitățile 2, 3, 5 și 6 cu serurile care trebuie testate. Cavitățile trebuie umplute până la dispariția meniscului. 7. Cantitățile obținute sunt următoarele: antigen: 32 microlitri, ser de control: 73 microlitri, ser care trebuie testat: 73 microlitri. 8. Incubarea trebuie să dureze 72 de ore la temperatura ambiantă (20-27oC) într-o incintă umedă închisă. 9. Proba se citește după douăzeci și patru de ore, apoi după
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
douăzeci și patru de ore, apoi după patruzeci și opt de ore, dar nu se poate obține nici un rezultat final înainte de șaptezeci și două de ore: a) un ser care trebuie testat este pozitiv dacă formează o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă această curbă coincide cu cea a serului de control; b) un ser care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
dacă formează o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă această curbă coincide cu cea a serului de control; b) un ser care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba serului de control; c) reacția nu este concludentă dacă: i) înclină curba serului de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
care trebuie testat este negativ dacă nu dă o curbă de precipitare specifică cu antigenul virusului leucozei bovine și dacă nu înclină curba serului de control; c) reacția nu este concludentă dacă: i) înclină curba serului de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau ii) dacă nu este posibilă interpretarea pozitivă sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]