7,100 matches
-
3 Tampoane pentru procedurile de testare GENERALITATE: tampoanele sterilizate care nu sunt deschise pot fi depozitate timp de maximum un an. 1. Tampoane pentru procedura de extragere 1.1. Tampon de extragere (tampon fosfatat la 50 mM, pH 7,0) Tamponul menționat este utilizat pentru extragerea, prin omogenizare sau agitare, a bacteriei prezente în țesuturile plantei. Na2HPO4 (anhidru) 4,26 g KH2PO4 2,72 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
0,5 g Antispumant cu DC silicon Agent antispumant* 1,0 ml Pirofosfat tetrasodic Antioxidant 1,0 g Polivinilpirolidonă -40 000 (PVP-40) Legătură de inhibitori de PCR 50 g *A se utiliza cu metoda de extragere prin omogenizare. 1.2. Tampon de extract concentrat (tampon fosfatat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru repunerea în suspensie și diluția extractelor de stoloni de tuberculi de cartofi concentrați prin centrifugare. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
cu DC silicon Agent antispumant* 1,0 ml Pirofosfat tetrasodic Antioxidant 1,0 g Polivinilpirolidonă -40 000 (PVP-40) Legătură de inhibitori de PCR 50 g *A se utiliza cu metoda de extragere prin omogenizare. 1.2. Tampon de extract concentrat (tampon fosfatat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru repunerea în suspensie și diluția extractelor de stoloni de tuberculi de cartofi concentrați prin centrifugare. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Pirofosfat tetrasodic Antioxidant 1,0 g Polivinilpirolidonă -40 000 (PVP-40) Legătură de inhibitori de PCR 50 g *A se utiliza cu metoda de extragere prin omogenizare. 1.2. Tampon de extract concentrat (tampon fosfatat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru repunerea în suspensie și diluția extractelor de stoloni de tuberculi de cartofi concentrați prin centrifugare. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de cartofi concentrați prin centrifugare. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2. Tampoane pentru testele de imunofluorescență 2.1. Tampon IF (tampon cu fosfat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru diluția anticorpilor. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2. Tampoane pentru testele de imunofluorescență 2.1. Tampon IF (tampon cu fosfat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru diluția anticorpilor. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele, se
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2. Tampoane pentru testele de imunofluorescență 2.1. Tampon IF (tampon cu fosfat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru diluția anticorpilor. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2. Tampoane pentru testele de imunofluorescență 2.1. Tampon IF (tampon cu fosfat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru diluția anticorpilor. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2.2. Tampon IF-Tween Tamponul menționat este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g NaCl 8,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2.2. Tampon IF-Tween Tamponul menționat este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a întări fluorescența
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1,0 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2.2. Tampon IF-Tween Tamponul menționat este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a întări fluorescența. Na2HPO4.12H2O 3,2 g NaH2PO4.2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2.2. Tampon IF-Tween Tamponul menționat este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a întări fluorescența. Na2HPO4.12H2O 3,2 g NaH2PO4.2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml Soluții suport antidecolorare sunt disponibile în comerț: de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
502 bp (în prezența primerului PSA). Dimensiunea prevăzută a amplimerului controlului PCR intern 18S rRNA = 377 bp (în prezența primerului NS). 1.2. Amestec reactiv destinat PCR Reactiv Cantitate pe reacție Concentrație finală Apă ultrapură sterilă 15,725 μl 10x tampon PCR1 (15 mM MgCl2) 2,5 μl 1 x (1,5 mM MgCl2) BSA (fracție V) (10 %) 0,25 μl 0,1 % Amestec d-nTP (20 mM) 0,125 μl 0,1 mM Primer PSA-1 (10 μΜ) 0,5 μl
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de restricție cu enzima Bgl II, după incubare la 37 °C timp de 30 de minute. Fragmentele de restricție obținute pe baza fragmentului specific de C. m. ssp. sepedonicus au o lungime de 282 bp și 220 bp. 2. Prepararea tamponului de încărcare 2.1. Bromofenol albastru (soluție concentrată la 10 %) Bromofenol albastru 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 2.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Bromofenol albastru (5,1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
fragmentului specific de C. m. ssp. sepedonicus au o lungime de 282 bp și 220 bp. 2. Prepararea tamponului de încărcare 2.1. Bromofenol albastru (soluție concentrată la 10 %) Bromofenol albastru 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 2.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Bromofenol albastru (5,1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2 ml 3. 10X tampon de EDTA (TAE) triacetat, pH 8,0 Tampon tri 48,4 g Acid acetic glacial 11,42 ml
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1. Bromofenol albastru (soluție concentrată la 10 %) Bromofenol albastru 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 2.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Bromofenol albastru (5,1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2 ml 3. 10X tampon de EDTA (TAE) triacetat, pH 8,0 Tampon tri 48,4 g Acid acetic glacial 11,42 ml EDTA (sare disodică) 3,72 g Apă distilată 1,00 l Înainte de utilizare se diluează până la 1x. Disponibil și în comerț (de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
albastru 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 2.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Bromofenol albastru (5,1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2 ml 3. 10X tampon de EDTA (TAE) triacetat, pH 8,0 Tampon tri 48,4 g Acid acetic glacial 11,42 ml EDTA (sare disodică) 3,72 g Apă distilată 1,00 l Înainte de utilizare se diluează până la 1x. Disponibil și în comerț (de exemplu, Invitrogen sau echivalent). Apendicele 7 Reactivi validați
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
și se adaugă 0,4 g de paraformaldehidă. Paraformaldehida se dizolvă după ce s-au adăugat 5 picături de 1N NaOH și se amestecă cu un agitator magnetic. (ii) Se ajustează pH-ul la 7,0 adăugându-se 1 ml de tampon fosfatat la 0,1 M (PB; pH 7,0) și 5 picături de 1N HCl. Se verifică pH-ul cu bandele indicatoare și se ajustează, în cazul în care este necesar, cu HCl sau NaOH. [ATENȚIE! NU SE UTILIZEAZĂ PH-METRU
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
90,0 360,0 Nota bene: Toate soluțiile care conțin oligosonde sensibile la lumină se depozitează la întuneric și la o temperatură de -20 °C. În timpul utilizării se protejează de lumina directă a soarelui sau de lumina electrică directă. 5. Tampon M fosfatat 0,1, pH 7,0 Na2HPO4 8,52 g KH2PO4 5,44 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. Apendicele
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
5 Portugalia stabilește zone în care este atestată absența nematodului lemnului de pin și delimitează zone (denumite în continuare "zone delimitate") constituite dintr-o parte în care prezența nematodului lemnului de pin este atestată și dintr-o parte considerată zonă tampon care înconjoară partea infestată pe o lungime de cel puțin 20 de kilometri, luând în considerare rezultatele anchetelor menționate la articolul 4. Comisia întocmește o listă a "zonelor" în care este atestată absența nematodului lemnului de pin și o transmite
32006D0133-ro () [Corola-website/Law/294714_a_296043]
-
se taie imediat, în cazul în care sunt identificate între 2 aprilie și 31 octombrie; ― se supun unor teste de depistare a nematodului lemnului de pin, în cazul în care se situează în partea zonei delimitate care servește ca zonă tampon în conformitate cu dispozițiile articolului 5. În cazul în care aceste teste sunt pozitive, traseul zonelor delimitate se modifică în consecință; (b) între 1 noiembrie și 1 aprilie, lemnul sensibil care se prezintă sub formă de lemn rotund sau de cherestea, cu
32006D0133-ro () [Corola-website/Law/294714_a_296043]
-
PCR C. Test de confirmare Apendicele 1 Laboratoarele care practică optimizarea și validarea protocoalelor Apendicele 2 Mediile de izolare și de cultură a R. solanacearum Apendicele 3 (A) Materialul de control standardizat disponibil în comerț (B) Pregătirea controalelor Apendicele 4 Tampoanele pentru procedurile de testare Apendicele 5 Stabilirea gradului de contaminare la testele IF și FISH Apendicele 6 Protocoalele PCR și reactivii validați Apendicele 7 Reactivi validați pentru testul FISH Apendicele 8 Condiții de cultură pentru tomate și vinete Bibliografie PRINCIPII
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
decolorat din inelul vascular al tuberculului de cartof sau din căile vasculare ale tulpinii plantei de cartof, de tomată sau de alte plante gazdă ofilite. Se pune în suspensie, într-un volum mic de apă distilată sterilă sau într-un tampon fosfat de 50 mM (apendicele 4). Se lasă cinci-zece minute pe masă. (b) Se prepară o serie de diluții zecimale ale suspensiei. (c) Se transferă 50-100 μl de suspensie și de diluții într-un mediu nutritiv general (NA, YPGA și
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
sigilate (în cazul în care recipientele sunt refolosite, ele trebuie spălate și dezinfectate cu compuși clorinați). Este preferabil ca taloanele să fie prelucrate de îndată. În cazul în care nu este posibil, acestea se depozitează în recipiente, fără adăugarea unui tampon, pentru cel mult 72 ore în frigider și cel mult 24 ore la temperatura ambiantă. Se prelucrează taloanele printr-una dintre următoarele proceduri: (a) Se acoperă taloanele cu un volum suficient (circa 40 ml) de tampon de extracție (apendicele 4
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
recipiente, fără adăugarea unui tampon, pentru cel mult 72 ore în frigider și cel mult 24 ore la temperatura ambiantă. Se prelucrează taloanele printr-una dintre următoarele proceduri: (a) Se acoperă taloanele cu un volum suficient (circa 40 ml) de tampon de extracție (apendicele 4) și se introduc într-un agitator rotativ (50-100 turații/minut) timp de 4 ore la o temperatură mai mică de 24 °C sau la o temperatură de refrigerare timp de 16-24 ore sau (b) Taloanele se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]