80 matches
-
situsului antigenic. Menționată anterior, activitatea peroxidazei în prezența unui donor de electroni rezultă în formarea inițială a unui complex enzimă -substrat și apoi în oxidarea donorului. În tehnicile imunohistochimice, produșii finali de reacție trebuie să precipite la locul formării lor. Cromogenii care formează produși finali solubili, nu pot fi folosiți în aceste aplicații. Pentru peroxidază, cei mai folosiți cromogeni sunt: tetra clorhidratul de 3,3’-diaminobenzidină (DAB), 3 amino-9-etilcarba-zol (AEC), 4-cloro-1-naftol, diclorhidrat de p-fenilendiamină (pirocate-chol sau reactivul Hanker-Yates). Soluția substrat DAB
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
complex enzimă -substrat și apoi în oxidarea donorului. În tehnicile imunohistochimice, produșii finali de reacție trebuie să precipite la locul formării lor. Cromogenii care formează produși finali solubili, nu pot fi folosiți în aceste aplicații. Pentru peroxidază, cei mai folosiți cromogeni sunt: tetra clorhidratul de 3,3’-diaminobenzidină (DAB), 3 amino-9-etilcarba-zol (AEC), 4-cloro-1-naftol, diclorhidrat de p-fenilendiamină (pirocate-chol sau reactivul Hanker-Yates). Soluția substrat DAB se prepară înaintea utilizării, prin dizolvarea unei tablete DAB în 10 ml tampon PBS, pH-7. 4 și activarea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpii murini primari. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu substratul cromogen al peroxidazei, DAB, activat extemporaneu cu H 2 O 2 , pentru 10-12 minute, la temperatura camerei, etapă urmată de contracolorare cu hematoxilină. Colorarea pentru receptorii estrogenici și cel progesteronic se relevă prin apariția unui precipitat de culoare brună la nivelul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
la temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpul primar. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu substratul cromogen al peroxidazei, DAB, activat extemporaneu cu H 2 O 2 , pentru 10-12 minute, la temperatura camerei, etapă urmată de contracolorare cu hematoxilină. Colorarea pentru pS2 se relevă prin apariția unui precipitat de culoare brună la nivelul citoplasmei din celulele epiteliale
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
gluconat, în prezența enzimei și a oxigenului molecular, cu formare de apă oxigenată. Intensitatea reacției poate fi apreciată fie prin măsurarea directă a oxigenului consumat (analizorul Beckman) sau a peroxidului de hidrogen format (analizorul Yellow-Spring), fie prin metodele utilizând un cromogen. Proba de dozare Determinarea glicemiei în plasmă dă o valoare cu cca. 15% (nu cu 15 mg/dl) mai mare decât în sângele integral. Diferența se datorează faptului că aproximativ 40% din volumul sângelui este ocupat de hematii (egal cu
Tratat de diabet Paulescu by Constantin Ionescu-Tîrgovişte, Cornelia Pencea, Olivia Georgescu () [Corola-publishinghouse/Science/92245_a_92740]
-
ADN-ul biotinilat generat de AgHBs este hibridizat cu oligonucleotide specifice care tapetează stripurile sub forma unor linii paralele. După hibridizarea ADN-ului se adaugă streptavidina marcată cu fosfatază alcalină care se leagă de hibridul biotinilat format anterior. Se adaugă cromogenul BCIP/NBT (5-bromo-4-cloro-3-indolilfosfat / 4-nitro-blue tetrazolium în soluție dimetilformamidă) rezultând un precipitat roșu-maroniu. Stripurile de genotipare INNOLiPA VHB conțin o linie marker roșie, două linii de control și 14 linii paralele la nivelul cărora sunt fixate probele oligonucleotidice. Linia de control
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
blocare, în fiecare godeu. 1.1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05% (v/v) (1/2.000
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
în SFT + 5 % lapte + 0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50 f2æl H(2)SO(4) 3N după aproximativ 5-10 minute (înainte ca testul negativ de control să înceapă să se coloreze). Alți cromogeni, ca ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic]), TMB (tetrametil benzidină), sau OFD (orto-fenildiamină) pot fi de asemenea utilizate. 2.1.4.2. Plăcile se citesc la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Valoarea finală
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
se amestecă ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2) 0,03 %] și se
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/175417_a_176746]
-
marcat cu peroxidază, care se leagă de antigenul E^(rns) care formează un complex cu anticorpii cu care a fost căptușită suprafața microplăcii. Conjugatul care nu s-a legat se îndepărtează prin spălare și se adaugă un substrat ce conține cromogen. Intensitatea culorii care se dezvoltă, este invers proporțională cu cantitatea de anticorpi specifici pentru E^(rns) prezenți în probă. Dacă proba nu conține anticorpi (probă negativă) mare parte din cantitatea definită de antigen E^(rns) adăugat se poate lega de
ORDIN nr. 66 din 12 iulie 2005 privind aprobarea Normei sanitare veterinare care aprobă un manual de diagnostic stabilind proceduri de diagnostic, metode de prelevare a probelor şi criterii pentru evaluarea testelor de laborator pentru confirmarea pestei porcine clasice. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/169685_a_171014]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
blocare, în fiecare godeu. 1.1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05% (v/v) (1/2.000
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
în SFT + 5 % lapte + 0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50 f2æl H(2)SO(4) 3N după aproximativ 5-10 minute (înainte ca testul negativ de control să înceapă să se coloreze). Alți cromogeni, ca ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic]), TMB (tetrametil benzidină), sau OFD (orto-fenildiamină) pot fi de asemenea utilizate. 2.1.4.2. Plăcile se citesc la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Valoarea finală
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
se amestecă ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2) 0,03 %] și se
NORMĂ din 15 februarie 2006(*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220362_a_221691]
-
blocare, în fiecare godeu. 1.1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]