75 matches
-
3) măsurat cu precizie în aparatul HPLC (6.10) funcționând la un debit de 1,0 ml de soluție eluantă (5.2) pe minut. Observații: 1. Soluția eluantă (5.2) se menține la 85˚C pe parcursul întregii analize cromatorafice pentru ca eluantul să se mențină degazat și pentru a împiedica dezvoltarea bacteriilor. Se poate recurge la orice măsură de precauție cu efect similar. 2. Coloanele se clătesc cu apă la fiecare întrerupere. Soluția nu se lasă niciodată în coloane (5.2). Înainte de
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
procedură sunt descriși în anexa XVIII la prezentul regulament. Reactivi pentru HPLC în fază inversată. 5.1. Soluție de acid tricloroacetic Se dizolvă în apă 240 g acid tricloroacetic (CCl3CCOOH) și se completează cu apă până la 1000 ml. 5.2. Eluanții A și B Eluantul A: Se introduc într-un balon cotat de 1 000 ml 150 ml acetonitril (CH3CN), 20 ml izopropanol (CH3CHOHCH3) și 1,00 ml de acid trifloroacetic (TFA, CF3COOH). Se completează cu apă până la 1 000 ml
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
anexa XVIII la prezentul regulament. Reactivi pentru HPLC în fază inversată. 5.1. Soluție de acid tricloroacetic Se dizolvă în apă 240 g acid tricloroacetic (CCl3CCOOH) și se completează cu apă până la 1000 ml. 5.2. Eluanții A și B Eluantul A: Se introduc într-un balon cotat de 1 000 ml 150 ml acetonitril (CH3CN), 20 ml izopropanol (CH3CHOHCH3) și 1,00 ml de acid trifloroacetic (TFA, CF3COOH). Se completează cu apă până la 1 000 ml. Eluantul B: Se introduc
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
A și B Eluantul A: Se introduc într-un balon cotat de 1 000 ml 150 ml acetonitril (CH3CN), 20 ml izopropanol (CH3CHOHCH3) și 1,00 ml de acid trifloroacetic (TFA, CF3COOH). Se completează cu apă până la 1 000 ml. Eluantul B: Se introduc într-un balon cotat de 1 000 ml 550 ml acetonitril, 20 ml izopropanol și 1,00 ml TFA. Se completează cu apă până la 1 000 ml. Soluția eluantă se filtrează înainte de folosire printr-o membrană filtrantă
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
1,00 ml TFA. Se completează cu apă până la 1 000 ml. Soluția eluantă se filtrează înainte de folosire printr-o membrană filtrantă cu pori cu diametrul de 0,45 μm. 5.3. Conservarea coloanei După analize, coloana se clătește cu eluantul B (cu un gradient) iar apoi se clătește cu acetonitril (cu un gradient timp de 30 de minute). Coloana se păstrează în acetonitril. 5.4. Probele etalon 5.4.1. Lapte praf degresat care îndeplinește cerințele pentru depozitare publică (adică
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
4.3. Prelevarea soluțiilor din probele analizate Se injectează 100 μl de supernatant sau filtrat (8.3.3) măsurat cu precizie în aparatul HPLC funcționând la un debit de 1,0 ml de soluție eluantă (5.2) pe minut. Compoziția eluantului la începutul analizei se obține ca la pct. 8.4.2. În mod normal este de aproximativ A:B = 76:24 (5.2). Imediat după injectare se pornește un gradient liniar, rezultatul fiind un procent al B cu 5% mai
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
aproximativ A:B = 76:24 (5.2). Imediat după injectare se pornește un gradient liniar, rezultatul fiind un procent al B cu 5% mai mare peste 27 minute. Apoi se pornește un gradient liniar, datorită căruia, după cinci minute, compoziția eluantului este de 90% B. Compoziția se menține timp de cinci minute, după care compoziția se modifică în cinci minute, via un gradient liniar, ajungând la compoziția inițială. În funcție de volumul intern al sistemului de pompare, următoare injectare se poate face la
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
să fie de 26 + două minute. Acesta se poate obține prin modificarea condițiilor inițiale și finale ale primului gradient. Totuși, diferența la nivelul %B în condițiile inițiale și finale ale primului gradient trebuie să se mențină la 5 % B. 2. Eluanții trebuie degazați suficient și trebuie de asemenea să se mențină degazați. Acest lucru este esențial pentru buna funcționare a sistemului de pompare reglabil. Deviația standard a timpului de retenție al vârfului GMP trebuie să fie sub 0,1 minute (n
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
se adaugă încet în cantități mici, iar solventul drenat se colectează într-un balon de 50 ml cu fundul rotund care a fost uscat până la obținerea unei mase constante cunoscute. După extracție, coloana se scurge până se golește. Solvenții din eluant se distilează într-un evaporator rotativ într-o baie de apă cu temperatura între 40 și 50°C. Se usucă balonul și se determină grăsimea rezultată prin cântărire. Observație: Extracția grăsimilor prin metodele Gerber, Weibull-Berntrop, Schmid-Bondzynski-Ratzlaff sau izolarea grăsimii din
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]
-
2. Se pune paharul în baia ultrasonică (5.4) timp 20 de minute pentru a se obține o suspensie. Se transferă cantitativ suspensia astfel obținută într-un balon cotat de 100 ml cu nu mai mult de 75 ml de eluant (4.10). Se adăugă succesiv 1 ml soluție Carrez I (4.15) și 1 ml soluție Carrez II (4.16) și se amestecă după fiecare adăugare. Se aduce la semn cu eluant (4.10), se amestecă din nou și se
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
cu nu mai mult de 75 ml de eluant (4.10). Se adăugă succesiv 1 ml soluție Carrez I (4.15) și 1 ml soluție Carrez II (4.16) și se amestecă după fiecare adăugare. Se aduce la semn cu eluant (4.10), se amestecă din nou și se filtrează printr-o hârtie de filtru cutată. 6.1.3. Se transferă cu o pipetă 3,0 ml din filtratul obținut la 6.1.2. și 5,0 ml soluție de standard
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
6.1.3. Se transferă cu o pipetă 3,0 ml din filtratul obținut la 6.1.2. și 5,0 ml soluție de standard intern (4.13) într-un balon cotat de 50 ml. Se aduce la semn cu eluant (4.10) și se amestecă. Soluția astfel obținută se folosește pentru realizarea analizei cromatografice descrisă la 6.2. 6.2. Cromatografie 6.2.1. Se reglează debitul fazei mobile (4.10) la 1,2 ml/min și se reglează temperatura
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
4.2) și se dizolvă în 1 000 ml apă într-un balon cotat. 4.9. Soluție de bromură de tetrametilamoniu: se dizolvă 15,40 g bromură de tetrametilamoniu în 1 000 ml apă într-un balon cotat. 4.10. Eluant: acid ortofosforic (4.7) / fosfat diacid de potasiu (4.8) / bromură de tetrametilamoniu (4.9) / apă / acetonitril (4.1) 10/50/100/340/90 (v/v/v/v/v) Compoziția acestei faze mobile poate fi schimbată cu scopul de a
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
strat subțire tratată în prealabil (4.23). 6.1.1.2 10 și 30 (l soluție standard (4.15.2) se picură pe încă două puncte de pe linia de start, după care placa se developează într-unul dintre cei doi eluenți (4.17). 6.1.1.3 Când frontul de solvent a avansat 150 mm, placa se usucă la 110°C (timp de 15 minute). La lumina unei lămpi UV (366 nm), petele de 8-chinolinol prezintă fluorescență galbenă. 6.1.1
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
de eluare sau eluent. Componenții separați sunt colectați la baza coloanei în fracțiuni de eluat și analizați prin diverse metode (fig. I.22). CAPITOLUL I Repartizarea componenților pe coloana cromatografică se numește developare, iar solventul care antrenează substanța de analizat, eluant. Prin developare rezultă o separare completă dacă zonele componenților sunt distincte, despărțite prin spații de sorbent libere de substanță. Rezultatul distribuției zonelor de-alungul coloanei se numește cromatogramă (fig. I.23). Când proba părăsește coloana, procesul se numește eluție și fiecare
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Efectele sunt arătate în figura I.30. Eluția izocratică este necorespunzătoare pentru separarea probelor care conțin mulți componenți cu coeficienți de distribuție cu valori încadrate pe un interval larg. Pentru realizarea unei separări bune în aceste condiții trebuie ales un eluant cu putere de eluție corespunzătoare pentru toți componenții. Redăm în fig. I.31, câteva probleme legate de eluție. F Când se folosește un solvent cu putere de eluție slabă (E1) se separă bine componenții 1 și 2, cu un volum
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de eluție medie se obțin separări intermediare bune dar nu se separă componenții 1 și 2 și se eluează componenții 5 și 6 într-un volum prea mare. Rezolvarea se face prin așa-numita “eluție în etape“ când se adaugă eluenți diferiți în mod discontinuu cu o putere de eluție crescătoare (E1 urmat de E1 + E2 și apoi E2). Se recomandă aplicarea acestei metode numai în cazul probelor cu izoterme liniare și de compoziție cunoscută pentru a decide ușor când trebuie
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
mijloace foarte simple de punere în contact a solutului cu adsorbantul și solventul. După cum se știe, distribuția solutului între cele două faze conduce procesul cromatografic și se va putea prevedea retenția, plecând de la valoarea lui Kads. Migrarea prin capilaritate a eluantului cu traversarea adsorbantului antrenează selectiv acești soluți, de fapt, în funcție de natura lor chimică compușii care au o mare energie de adsorbție sunt puternic fixați, coeficientul de distribuție fiind scăzut, ei sunt puțin antrenați de către eluant și migrează puțin. Fenomenul invers
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Kads. Migrarea prin capilaritate a eluantului cu traversarea adsorbantului antrenează selectiv acești soluți, de fapt, în funcție de natura lor chimică compușii care au o mare energie de adsorbție sunt puternic fixați, coeficientul de distribuție fiind scăzut, ei sunt puțin antrenați de către eluant și migrează puțin. Fenomenul invers are loc pentru soluții cu energie mică de adsorbție. Probele sunt separate prin migrarea eluantului prin adsorbant; acesta fiind principiul din CSS. Dacă adsorbantul rămâne același, migrarea unui compus depinde exclusiv de natura eluantului, caracterizat
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
care au o mare energie de adsorbție sunt puternic fixați, coeficientul de distribuție fiind scăzut, ei sunt puțin antrenați de către eluant și migrează puțin. Fenomenul invers are loc pentru soluții cu energie mică de adsorbție. Probele sunt separate prin migrarea eluantului prin adsorbant; acesta fiind principiul din CSS. Dacă adsorbantul rămâne același, migrarea unui compus depinde exclusiv de natura eluantului, caracterizat prin forța sa eluantă ε, ceea ce induce posibilitatea unei reproductibilități a rezultatelor pentru un eluant dat. Faza staționară sau adsorbantul
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de către eluant și migrează puțin. Fenomenul invers are loc pentru soluții cu energie mică de adsorbție. Probele sunt separate prin migrarea eluantului prin adsorbant; acesta fiind principiul din CSS. Dacă adsorbantul rămâne același, migrarea unui compus depinde exclusiv de natura eluantului, caracterizat prin forța sa eluantă ε, ceea ce induce posibilitatea unei reproductibilități a rezultatelor pentru un eluant dat. Faza staționară sau adsorbantul este în general ales un gel de siliciu. Legăturile care se stabilesc se datorează grupărilor silanol libere. Aluminiul, celuloza
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Probele sunt separate prin migrarea eluantului prin adsorbant; acesta fiind principiul din CSS. Dacă adsorbantul rămâne același, migrarea unui compus depinde exclusiv de natura eluantului, caracterizat prin forța sa eluantă ε, ceea ce induce posibilitatea unei reproductibilități a rezultatelor pentru un eluant dat. Faza staționară sau adsorbantul este în general ales un gel de siliciu. Legăturile care se stabilesc se datorează grupărilor silanol libere. Aluminiul, celuloza, cărbunele activ sunt de asemenea, utilizați ca adsorbanți. De obicei faza mobilă sau eluantul este un
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
pentru un eluant dat. Faza staționară sau adsorbantul este în general ales un gel de siliciu. Legăturile care se stabilesc se datorează grupărilor silanol libere. Aluminiul, celuloza, cărbunele activ sunt de asemenea, utilizați ca adsorbanți. De obicei faza mobilă sau eluantul este un solvent uzual (sau un amestec de solvenți), caracterizat prin forța eluantă εo. Mărimi fundamentale Fenomenul de adsorbție în strat subțire poate fi considerat ca o tehnică de separare a compușilor dintr-un amestec. Pentru a putea evalua calitatea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de separare a unui amestec, caracterizată prin selectivitate; - lățimea picurilor caracterizată prin eficacitate; - rezoluția; - Rf-ul. Trebuie să ținem cont în mod egal de timp care este un factor decisiv în alegerea metodei cromatografice. Fiecare cromatogramă obținută cu același adsorbant, același eluant și în condiții experimentale identice prezintă același aspect: fiecare compus migrează în același mod. Astfel, este posibil pentru un sistem cromatografic dat, să se caracterizeze un solut (substanța dizolvată) prin distanța pe care o parcurge în raport cu frontul de solvent. Desfășurarea
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de linie poate fi obținută utilizând plăci cu zonă de concentrare. Un strat de kieselgur este suprapus peste stratul de fază staționară pe care s-a efectuat spotarea. Acest strat de kieselgur nu reține solutul, el va fi antrenat de eluant din zona în care a fost depus. Volumele foarte diferite (0,5-500 μl) pot fi spotate cu seringa sau cu aparatul linomat. Tabelul următor prezintă caracteristicile spotării în CP. Spotarea probelor - caracteristici Natura solventului de spotare: - utilizarea unui solvent de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]