37 matches
-
după sterilizare) 4.2 Etanol 20% (v/v): se diluează 200 ml de etanol cu 800 ml de apă. 4.3 Acid clorhidric, d: 1,18 până la 1,19. 4.4 Hidroxid de sodiu, soluție 2 M. 4.5 Soluție-tampon fosfată, 0,1 M: Fosfat diacid de potasiu, KH2PO4: 13,6 g. Apă până la 1 000 ml. Se ajustează pH-ul la 4,5. 4.6 Amestec de acetonă/apă/acid clorhidric (4.3): 65/32,5/2,5 (v/v
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
3): 65/32,5/2,5 (v/v/v). 4.7 Substanță standard: sulfat de avoparcină cu activitate cunoscută. 5 SOLUȚII STANDARD Se dizolvă o cantitate cântărită cu precizie de aproximativ 10 mg din substanța standard (4.7) în soluție-tampon fosfată (4.5) și se diluează cu această soluție-tampon pentru a obține o soluție-mamă ce conține 100 μg de avoparcină pe mililitru. Păstrată într-un balon închis la 4°C, această soluție este stabilă până la maxim 7 zile. 5.1 Pentru
jrc686as1981 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85824_a_86611]
-
ocazia testelor de depistare a C. m. ssp. sepedonicus. Ca martori pozitivi se prepară suspensii care conțin între 105 și 106 celule/ml de C. m. ssp. sepedonicus (sușe NCPPB 4053 sau PD 406, de exemplu) într-o soluție tampon fosfatată la 0,01 M, pe baza unei culturi de trei până la cinci zile (a se vedea apendicele 2 pentru preparare). Se prepară lame martori pozitivi distincte ale sușei omoloage sau ale oricărei alte sușe de referință de C. m. ssp
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se lasă la incubat toată noaptea la 4 °C. Se mai poate utiliza ca fixativ etanol la 96 %. În acest caz, extractul concentrat menționat la punctul 5.1.2 se dizolvă într-un amestec format din 50 μl de tampon fosfatat la 0,01 M și din 50 μl etanol la 96 %. Se amestecă la vortex și se lasă la incubat la 4 °C timp de 30-60 minute. 5.1.4. Se pune la centrifugat timp de 8 minute la 7
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
la incubat la 4 °C timp de 30-60 minute. 5.1.4. Se pune la centrifugat timp de 8 minute la 7 000 g, se elimină lichidul supernatant și se repune în suspensie extractul concentrat în 75 μl de tampon fosfatat la 0,01 M. 5.1.5. Se depun 16 μl de suspensii fixate pe o lamă multitest, astfel cum se indică în figura 3. Pe fiecare lamă se aplică două probe diferite, nediluate, și din acestea se diluează 10
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Se depun 16 μl de suspensii fixate pe o lamă multitest, astfel cum se indică în figura 3. Pe fiecare lamă se aplică două probe diferite, nediluate, și din acestea se diluează 10 μl la 1:100 (într-un tampon fosfatat de 0,01 M). Restul soluției de probă (49 μl) poate fi conservată la -20 °C, după ce s-a adăugat o cantitate de etanol la 96 %. În cazul în care este necesară repetarea testului FISH, se elimină etanolul prin centrifugare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
μl) poate fi conservată la -20 °C, după ce s-a adăugat o cantitate de etanol la 96 %. În cazul în care este necesară repetarea testului FISH, se elimină etanolul prin centrifugare și se înlocuiește cu o cantitate echivalentă de tampon fosfatat la 0,01 M (se omogenizează prin agitare). Figura 3. Dispunerea unei lame pentru testul FISH ***[PLEASE INSERT FIGURE AND THE FOLLOWING TEXT IN RO LANGUAGE]*** échantillon 1 = eșantion 1 témoin = martor témoin = martor témoin = martor échantillon 2 = eșantion 2
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
4. Se asigură izolarea față de plantele simptomatice, prelevând o secțiune de tulpină la o înălțime de 2 cm deasupra punctului de inoculare. Se reduce și se pune în suspensie într-o cantitate mică de apă distilată sterilă sau de tampon fosfatat la 50 mM (a se vedea apendicele 3). Se izolează de suspensie, diluând prin însămânțare simplă sau în striuri pe MTNA și YPGA (a se vedea apendicele 5), se lasă la incubat timp de trei-cinci zile la o temperatură cuprinsă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
PCR/IF și FISH Se pune în cultură timp de 72 de ore o sușă virulentă de C. m. ssp. sepedonicus [NCPPB 4053 sau PD 406] pe un mediu de bază MTNA și se pune în suspensie într-un tampon fosfatat la 10 mM, astfel încât să se obțină o densitate celulară de aproximativ 1-2 x 108 UFC pe mililitru. Aceasta corespunde, în general, unei suspensii ușor turbide care prezintă o densitate optică de 0,20-600 nm. Se prelevează un con de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
să lipsească complet la martorii negativi. Apendicele 3 Tampoane pentru procedurile de testare GENERALITATE: tampoanele sterilizate care nu sunt deschise pot fi depozitate timp de maximum un an. 1. Tampoane pentru procedura de extragere 1.1. Tampon de extragere (tampon fosfatat la 50 mM, pH 7,0) Tamponul menționat este utilizat pentru extragerea, prin omogenizare sau agitare, a bacteriei prezente în țesuturile plantei. Na2HPO4 (anhidru) 4,26 g KH2PO4 2,72 g Apă distilată 1,00 l Se dizolvă ingredientele, se
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
DC silicon Agent antispumant* 1,0 ml Pirofosfat tetrasodic Antioxidant 1,0 g Polivinilpirolidonă -40 000 (PVP-40) Legătură de inhibitori de PCR 50 g *A se utiliza cu metoda de extragere prin omogenizare. 1.2. Tampon de extract concentrat (tampon fosfatat la 10 mM, pH 7,2) Tamponul menționat este utilizat pentru repunerea în suspensie și diluția extractelor de stoloni de tuberculi de cartofi concentrați prin centrifugare. Na2HPO4.12H2O 2,7 g NaH2PO4.2H2O 0,4 g Apă distilată 1,00
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se adaugă 0,4 g de paraformaldehidă. Paraformaldehida se dizolvă după ce s-au adăugat 5 picături de 1N NaOH și se amestecă cu un agitator magnetic. (ii) Se ajustează pH-ul la 7,0 adăugându-se 1 ml de tampon fosfatat la 0,1 M (PB; pH 7,0) și 5 picături de 1N HCl. Se verifică pH-ul cu bandele indicatoare și se ajustează, în cazul în care este necesar, cu HCl sau NaOH. [ATENȚIE! NU SE UTILIZEAZĂ PH-METRU ÎN
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]