256 matches
-
se centrifughează. Acest procedeu evita pierderile de amoniac, în timpul distilării cu abur, de la anumite săruri de amoniu cum ar fi carbonatul și carbonații bazici precum și al acizilor grași, cu excepția acetatului de amoniu. Amoniacul se distilează cu abur din filtrat sau supernatant și se determina prin titrare potențiometrica sau alt gen de titrare. 4. REACTIVI Toți reactivii trebuie să fie de puritate analitică 4.1. Metanol 4.2. Clorura de bariu dihidrata, soluție 25% (m/v) 4.3. Acid ortoboric, soluție 4
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
3. Se amestecă și se lasă să stea peste noapte în frigider (5°C). 6.4. Apoi se filtrează sau se centrifughează soluția încă rece în eprubete închise pentru 10 minute, astfel încât să se obțină un strat de filtrat sau supernatant clar. 6.5. Se pun cu pipeta 40 ml din acestă soluție clară în aparatură de distilare cu abur (5.3), urmat de 0,5 ml de lichid antispumant (4.5), acolo unde este necesar. 6.6. Se distilează și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
Se transferă imediat suspensia fierbinte cu apă într-un balon gradat de 50 ml. Se lasă să se răcească și se completează până la semn cu apă. Se centrifughează la cel putin 3000 rpm pentru 5 minute și se trece lichidul supernatant printr-un filtru. 6.2. Extracție 6.2.1. Se iau 30 ml filtrat și se extrage de trei ori cu 15 ml dietileter (4.4). Dacă este necesar se usucă fazele eterice și se colectează acestea într-un balon
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
Centrifuga 5. PROCEDEU 5.1. Într-o eprubeta pentru centrifuga se adaugă, la aproximativ 1 g de probă, soluție de acid clorhidric 2M (3.1), cu picătură, până la precipitarea completă; se amestecă și se centrifughează. 5.2. Se elimină lichidul supernatant și se spală precipitatul o singură dată cu cinci picături de apă rece. Se aruncă apele de spălare. 5.3. Se adaugă în eprubeta pentru centrifuga o cantitate de apă egală cu cantitatea de precipitat. Se încălzește până la fierbere și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
de apă rece. Se aruncă apele de spălare. 5.3. Se adaugă în eprubeta pentru centrifuga o cantitate de apă egală cu cantitatea de precipitat. Se încălzește până la fierbere și se agită. 5.4. Se centrifughează fierbinte; se elimină lichidul supernatant. 5.5. Precipitatului i se adaugă câteva picături de soluție amoniacala (3.2); se amestecă și centrifughează. 5.6. Pe o lamela de sticlă la o picătură de lichid supernatant se adaugă câteva picături de soluție acid azotic 2M (3
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
se agită. 5.4. Se centrifughează fierbinte; se elimină lichidul supernatant. 5.5. Precipitatului i se adaugă câteva picături de soluție amoniacala (3.2); se amestecă și centrifughează. 5.6. Pe o lamela de sticlă la o picătură de lichid supernatant se adaugă câteva picături de soluție acid azotic 2M (3.3). 5.7. Un precipitat alb indică prezenta argintului. B. DETERMINARE 1. SCOP ȘI DOMENIU DE APLICARE Aceasta este metodă reglementată pentru determinarea azotatului de argint că argint în produsele
EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
orice transport de ADN în recipientele sau în dispozitivele de zdrobire. În cazul în care se recurge la testul PCR, se recomandă zdrobirea în pungi de unică folosință și utilizarea tuburilor de unică folosință. 3.1.4. Se decantează lichidul supernatant. În cazul în care lichidul este prea tulbure, se limpezește prin centrifugare la viteză redusă (la maximum 180 g timp de 10 minute, la o temperatură de 4-10 °C) sau prin filtrare în vid (40-100 μm), spălând filtrul cu un
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
1.5. Se concentrează fracțiunea bacteriană prin centrifugare la viteza de 7 000 g timp de 15 minute (sau de 10 000 g timp de 10 minute) la o temperatură cuprinsă între 4 și 10 °C, apoi se elimină lichidul supernatant fără a agita depozitul. 3.1.6. Se readuce depozitul în suspensie într-un tampon de 1,5 ml (a se vedea apendicele 3). Se utilizează 500 μl pentru testele de C. m. ssp. sepedonicus, 500 μl pentru testele de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
trebuie să fie refrigerate (pentru o perioadă mai scurtă de 72 de ore), fie conservate la temperatura mediului ambiant (pentru o perioadă mai scurtă de 24 de ore). 3.2.3. După o sedimentare de 15 minute, se decantează lichidul supernatant. 3.2.4. De obicei, nu este necesar să se efectueze o nouă limpezire a extractului sau a concentrației fracțiunii bacteriene; cu toate acestea, limpezirea se poate efectua prin filtrare și/sau centrifugare, în conformitate cu metoda descrisă de secțiunile 3.1
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de fixare (a se vedea apendicele 7). 5.1.2. Se introduc cu pipeta 100 μl din fiecare extract într-un tub Eppendorf și sunt centrifugați timp de 8 minute la 7 000 g. 5.1.3. Se elimină lichidul supernatant și se dizolvă extractul concentrat în 500 μl de fixativ preparat cu mai puțin de 24 de ore înainte. Se agită și se lasă la incubat toată noaptea la 4 °C. Se mai poate utiliza ca fixativ etanol la 96
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
din 50 μl etanol la 96 %. Se amestecă la vortex și se lasă la incubat la 4 °C timp de 30-60 minute. 5.1.4. Se pune la centrifugat timp de 8 minute la 7 000 g, se elimină lichidul supernatant și se repune în suspensie extractul concentrat în 75 μl de tampon fosfatat la 0,01 M. 5.1.5. Se depun 16 μl de suspensii fixate pe o lamă multitest, astfel cum se indică în figura 3. Pe fiecare
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se lasă la temperatura mediului înconjurător timp de cel puțin 20 de minute. 16. Se conservă la -20 °C până atunci când se utilizează pentru PCR. 17. Se izolează orice precipitat alb prin centrifugare și se utilizează 5 μl din lichidul supernatant ce conține ADN pentru PCR. 6.1. (b) Alte metode Se pot aplica și alte metode de extragere a ADN-ului (Qiagen DNeasy Plant Kit, de exemplu), cu condiția ca metodele respective să aibă o eficacitate recunoscută ca fiind echivalentă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
ca atunci când se creează mediul să se controleze pH-ul după fiecare adăugare de antibiotice și ca acesta să fie readus la pH 7,0-7,4. CAPITOLUL 2 Izolarea virusului Izolarea virusului în ouăle embrionate ale păsărilor de curte Fluidul supernatant clarificat se inoculează în cantități de 0,1-0,2 ml în cavitatea alantoidă a minimum 4 embrioni A din ouă care au fost incubate timp de 8 - 10 zile. Ideal, aceste ouă ar trebui obținute dintr-un anumit efectiv indemn
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
bogate în mucilagii sau în substanțe coloidale (de exemplu, amidon dextrinat) Se prepară soluția așa cum s-a descris la pct. 5.1.2, dar nu se filtrează. Se decantează (dacă este necesar, se centrifughează), se rețin 100 ml din lichidul supernatant și se transferă într-un balon cotat de 200 ml. Se amestecă cu acetona prevăzută la pct. 3.6 și se aduce la volum cu acest solvent, se omogenizează și se filtrează. 5.2. Titrare Utilizându-se o pipeta, se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185715_a_187044]
-
dopul și interiorul gâtului aparatului cu cativa mililitri de solvent amestecat (pct. 4.5) și se lasă soluția cu care s-a clătit să curgă în interiorul aparatului. Se transferă cu foarte multă atenție un volum cât mai mare din stratul supernatant, prin decantare sau cu ajutorul unui sifon (pct. 5.6), ��n balonul pregătit (pct. 6.2.1). Notă: Daca transferul nu se efectuează cu ajutorul unui sifon, poate fi necesar să se adauge puțină apă pentru ridicarea interfeței dintre cele două straturi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152324_a_153653]
-
mililitri de solvent amestecat (pct. 4.5) și se lasă soluția cu care s-a clătit să curgă în interiorul aparatului. Se transferă cu foarte multă atenție în balonul pregătit (pct. 6.2.1) un volum cât mai mare din stratul supernatant, prin decantare sau cu ajutorul unui sifon (pct. 5.7). Notă: Daca transferul nu se efectuează cu ajutorul unui sifon, poate fi necesar să se adauge puțină apă pentru ridicarea interfeței dintre cele două straturi, astfel sustinandu-se decantarea. 6.2.9
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152324_a_153653]
-
tampon fosfat salin(PBS) ce conține 0,3 % ser bovin negativ în raport cu virusul bolii limbii albastre, 0,1 % (v/v) Tween-20 (furnizat sub formă de sirop de polioxietilenă sorbiton monolaurat) în PBS. 4. Anticorp monoclonal: 3-17-A3 (furnizat sub formă de supernatant din cultură tisulară hibridom) îndreptat împotriva polipeptidei VP7 specifice, păstrat la -20 °C sau liofilizat și diluat la 1/100 cu tampon de blocare înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulină de iepure antișoarece (adsorbită și eluată) conjugată cu peroxidază din hrean
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
și se repune în suspensie fragmentul de celulă rămas în 10-20 ml de tampon de liză. 9. Se agită cu ajutorul unui aparat cu ultrasunete și se clarifică, de trei ori în total, stocând supernatantul în fiecare stadiu. 10. Se reunesc supernatanții și se centrifughează la 24 000 rpm (100 000 g) pentru 120 de minute la + 4 °C peste o perniță de 5ml de sucroză la 40 % (m/v în PBS) cu ajutorul unor tuburi de centrifugare Beckmann de 30 ml și
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
efectuează în conformitate cu protocolul următor: Antigen: Se prepară antigen precipitant în orice sistem de cultură celulară compatibil cu o multiplicare rapidă a serotipului de referință al virusului bolii limbii albastre. Se recomandă celule BHK sau Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la sfârșitul creșterii virale, dar necesită o concentrare de la 50 la 100 de ori mai mare pentru a fi eficient. Acest lucru se poate realiza prin orice procedură de concentrare proteică standard; antigenul viral poate fi inactivat prin adăugarea a
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
agar se efectuează în conformitate cu protocolul următor: Antigen: Se prepară antigen precipitant în orice sistem de cultură celulară compatibil cu o multiplicare rapidă a serotipului (serotipurilor) virusului bolii hemoragice epizootice. Se recomandă celule BHK sau Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la sfârșitul creșterii virale, dar trebuie să aibă o concentrație de la 50 la 100 de ori mai mare pentru a fi eficient. Acest lucru se poate realiza prin orice procedură de concentrare proteică standard; antigenul viral poate fi inactivat prin
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
de antigenul 146S al virusului febrei aftoase (FMDV) folosite la o concentrație optimă predeterminată într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigene din tulpinile de virus selectate, cultivate pe monostraturi de celule BHK-21. Se utilizează supernatanți nepurificați și se pretitrează conform protocolului, dar fără ser, pentru a da o diluție care, după adăugarea unui volum egal de PBST (tampon fosfat salin, conținând 0,05 % Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o densitate optică între 1
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
de rotație de 500 - 600 rot/min-1 (pct. 5.2). Dacă nu se folosește centrifuga (vezi nota de la pct. 5.2) se lasă să se odihnească pe stativ (pct. 5.7), timp de cel puțin 30 de minute, până ce stratul supernatant se limpezește și se separă vizibil de stratul apos. Dacă e nevoie, se poate răci balonul cu apă curentă. 6.5.6. Se îndepărtează cu grijă dopul de plută sau dispozitivul de închidere și se clătește, ca și interiorul gâtului
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
la bază turnând apă, cu grijă, de-a lungul pereților balonului, astfel încât să se faciliteze decantarea solventului. 6.5.7. Ținând balonul de extracție de bulbul îngust, se decantează, cu foarte mare grijă, cât se poate de mult din stratul supernatant, în recipientul pregătit, destinat recuperării substanțelor grase (pct. 6.4), care conține câțiva regulatori de fierbere (pct. 5.10), în cazul baloanelor (facultativ în cazul capsulelor mecanice), evitându-se decantarea unei părți cât de mici a stratului apos. 6.5
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
cu o viteză de rotație de 500 -600 rot /min-1 (pct. 5.2). În lipsa unei centrifugi (vezi nota de la pct. 5.2), tubul astupat se lasă să se odihnească pe stativ, timp de cel puțin 30 de minute, până ce stratul supernatant se limpezește și se separă în mod vizibil de stratul apos. Dacă este necesar, tubul se răcește cu apă curentă. A.1.5.6. Se îndepărtează cu grijă dopul din plută (sau alt material) și se clătește, ca și gâtul
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]
-
în tub și se scufundă tubulura lungă în interior, până ce orificiul se află la aproximativ 3 mm deasupra suprafeței de contact dintre straturi. Tubulura din interior trebuie să fie paralelă cu axa tubului de extracție. Se transvazează cu grijă stratul supernatant din tub în recipientul pregătit pentru recuperarea substanțelor grase (pct. 6.4), evitându-se transvazarea unei părți cât de mici a stratului apos; dacă recipientul e un balon, trebuie să conțină câțiva regulatori de fierbere (pct. 5.10) - facultativi în
jrc1895as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87045_a_87832]