273 matches
-
frunze tinere, recoltate de pe lăstarii principali la începutul lunii iulie; mojararea și omogenizarea acestora cu Tris-glicină pH 8,3 în raport de ½, în funcție de turgescența probei; centrifugarea la 3000 rotații/minut, timp de 20 minute la temperatura de 4°C; obținerea supernatantelor, decantarea și păstrarea până la electroforeza efectivă la 4°C; separarea în câmp electroforetic a izoenzimelor prin disc-electroforeză în tuburi verticale sau plăci conținând gel de poliacrilamidă 5% și tampon de electrod 5 mM Tris - 38mMglicină, pH 8,3; prepararea gelurile
A M P E L O G R A F I E M E T O D E ? I M E T O D O L O G I I D E D E S C R I E R E ? I R E C U N O A ? T E R E A S O I U R I L O R D E V I ? ? D E V I E by Doina DAMIAN, Liliana ROTARU, Ancu?a NECHITA, Costic? SAVIN () [Corola-publishinghouse/Science/83089_a_84414]
-
digestiv sunt separate prin centrifugarea lichidului amniotic recoltat și puse în cultură pentru efectuarea cariotipului și a testelor ADN (PCR/ FISH); celulele sunt lăsate să se multiplice în incubator timp de 7-14 zile, pentru cariotip fiind necesare 16-20 celule; din supernatant se efectuează dozările biochimice, imunologice și hormonale (AFP, lecitina sfingomielina, fosfatidilglicerolul, celule orange, uree-creatinină, hormoni tiroidieni etc.). Acetilcolinesteraza din lichidul amniotic (LA) 1. Indicator al expunerii la tesut neural în uter; 2. Pozitivă în: a. defecte de tub neural; b
Asistenţa la naştere în prezentaţie craniană şi pelvină by Mihai Botez, Vasile Butnar, Adrian Juverdeanu () [Corola-publishinghouse/Science/305_a_1432]
-
în modul descris mai jos 3. Tampon de blocare: lapte praf deshidratat "Marvel" 5% "w/v", Tween-20 0,1% "v/v" "furnizat ca soluție de polioxietilena sorbiton monolaurat" în soluție salina tamponata - fosfat "PBS" 4. Anticorp monoclonal 3-17-A3 "furnizat că supernatant de cultură tisulara hibridoma" depozitat la temperatura de -20°C sau liofilizat, diluat 1/50, cu tampon de blocare înainte de utilizare, dirijat contra polipeptidei p7 specifică de grup 5. Conjugat: globulina de iepure antisoarece "absorbita și eluata", conjugata cu peroxidaza
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 11 martie 2002 cu privire la condiţiile de sănătate a animalelor şi certificarea veterinara pentru importul din tari terţe de material seminal provenit de la bovine. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/143681_a_145010]
-
procedurii descrise mai sus; 3. tampon de blocare: 5% (w/v) lapte praf deshidratat Marvel, 0,1% (v/v) de tween-20 furnizat sub formă de sirop de polioxietilena sorbiton monolaurat în PBS; 4. anticorp monoclonal: 3-17-A3 (furnizat sub formă de supernatant de cultură tisulara hybridoma), depozitat la temperatura de -20°C sau liofilizat, diluat 1/50 cu tampon de blocare înainte de folosire, dirijat contra polipeptidei p7 specifică grupului; 5. conjugat: globulina de iepure antisoarece (adsorbit și diluat), conjugata cu peroxidaza din
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
și se resuspenda celulele granulate rămase în 10-20 ml de tampon de distrugere a celulelor. 9. Se agită cu ajutorul unui aparat cu ultrasunete și se clarifica, se stochează supernatantul în fiecare stadiu, în total de 3 ori. 10. Se adună supernatanții și se centrifughează la 24.000 rpm timp de 120 de minute, la temperatura de +4°C peste un strat de 5 ml de 40% sucroza w/v în PBS, folosindu-se 30 ml tuburi de centrifugare Beckmann și un
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat ��n orice sistem de cultură celulară care suporta rapidă multiplicare a serotipului specific de virus BTV. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficace. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
va efectua conform următorului protocol: 1.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultură celulară compatibil cu rapidă multiplicare a serotipului specific virusului bolii epizootice hemoragice. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficient. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de 7 tipuri de virus ai febrei aftoase (FMDV) folosite la o concentrație optimă predeterminata într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigeni din tulpinile de virus selectate, cultivate pe celule monocelulare BHK-21. Se utilizează supernatanți nepurificați, pretitrati conform protocolului, dar fără ser pentru a da o diluție, care după adăugarea unui volum egal de PBST (lichid fiziologic tamponat cu fosfat, conținând 0,05% Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o intensitate optică între 1
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
se centrifughează. Acest procedeu evita pierderile de amoniac, în timpul distilării cu abur, de la anumite săruri de amoniu cum ar fi carbonatul și carbonații bazici precum și al acizilor grași, cu excepția acetatului de amoniu. Amoniacul se distilează cu abur din filtrat sau supernatant și se determina prin titrare potențiometrica sau alt gen de titrare. 4. REACTIVI Toți reactivii trebuie să fie de puritate analitică 4.1. Metanol 4.2. Clorura de bariu dihidrata, soluție 25% (m/v) 4.3. Acid ortoboric, soluție 4
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
3. Se amestecă și se lasă să stea peste noapte în frigider (5°C). 6.4. Apoi se filtrează sau se centrifughează soluția încă rece în eprubete închise pentru 10 minute, astfel încât să se obțină un strat de filtrat sau supernatant clar. 6.5. Se pun cu pipeta 40 ml din acestă soluție clară în aparatură de distilare cu abur (5.3), urmat de 0,5 ml de lichid antispumant (4.5), acolo unde este necesar. 6.6. Se distilează și
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
Se transferă imediat suspensia fierbinte cu apă într-un balon gradat de 50 ml. Se lasă să se răcească și se completează până la semn cu apă. Se centrifughează la cel putin 3000 rpm pentru 5 minute și se trece lichidul supernatant printr-un filtru. 6.2. Extracție 6.2.1. Se iau 30 ml filtrat și se extrage de trei ori cu 15 ml dietileter (4.4). Dacă este necesar se usucă fazele eterice și se colectează acestea într-un balon
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
Centrifuga 5. PROCEDEU 5.1. Într-o eprubeta pentru centrifuga se adaugă, la aproximativ 1 g de probă, soluție de acid clorhidric 2M (3.1), cu picătură, până la precipitarea completă; se amestecă și se centrifughează. 5.2. Se elimină lichidul supernatant și se spală precipitatul o singură dată cu cinci picături de apă rece. Se aruncă apele de spălare. 5.3. Se adaugă în eprubeta pentru centrifuga o cantitate de apă egală cu cantitatea de precipitat. Se încălzește până la fierbere și
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
de apă rece. Se aruncă apele de spălare. 5.3. Se adaugă în eprubeta pentru centrifuga o cantitate de apă egală cu cantitatea de precipitat. Se încălzește până la fierbere și se agită. 5.4. Se centrifughează fierbinte; se elimină lichidul supernatant. 5.5. Precipitatului i se adaugă câteva picături de soluție amoniacala (3.2); se amestecă și centrifughează. 5.6. Pe o lamela de sticlă la o picătură de lichid supernatant se adaugă câteva picături de soluție acid azotic 2M (3
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
se agită. 5.4. Se centrifughează fierbinte; se elimină lichidul supernatant. 5.5. Precipitatului i se adaugă câteva picături de soluție amoniacala (3.2); se amestecă și centrifughează. 5.6. Pe o lamela de sticlă la o picătură de lichid supernatant se adaugă câteva picături de soluție acid azotic 2M (3.3). 5.7. Un precipitat alb indică prezenta argintului. B. DETERMINARE 1. SCOP ȘI DOMENIU DE APLICARE Aceasta este metodă reglementată pentru determinarea azotatului de argint că argint în produsele
ANEXA din 28 noiembrie 2001 privind metodele de analiza a compoziţiei produselor cosmetice în vederea controlului calităţii acestora*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/145750_a_147079]
-
mediul de transport trebuie să fie de 1:10. Articolul 9 Centrifugarea omogenatului a) Omogenatul este centrifugat în centrifuga cu răcire, la o temperatură cuprinsă între 2-5°C la 2.000-4.000 x g, timp de 15 minute, iar lichidul supernatant este colectat și tratat, fie 4 ore la 15°C, fie peste noapte la 4°C, cu antibiotice; de exemplu, 1 mg gentamicina/ml poate fi foarte util în acest stadiu. Dacă proba a fost expediata în mediu de transport
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
4 ore la 15°C, fie peste noapte la 4°C, cu antibiotice; de exemplu, 1 mg gentamicina/ml poate fi foarte util în acest stadiu. Dacă proba a fost expediata în mediu de transport - adica sub antibiotic -, tratamentul lichidului supernatant nu mai este necesar. Tratamentul cu antibiotic vizează împiedicarea contaminării bacteriene a probei și face inutilă filtrarea prin filtru cu membrana. Dacă lichidul supernatant colectat este congelat la -80°C în curs de 48 de ore de la prelevarea probei, acesta
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
acest stadiu. Dacă proba a fost expediata în mediu de transport - adica sub antibiotic -, tratamentul lichidului supernatant nu mai este necesar. Tratamentul cu antibiotic vizează împiedicarea contaminării bacteriene a probei și face inutilă filtrarea prin filtru cu membrana. Dacă lichidul supernatant colectat este congelat la -80°C în curs de 48 de ore de la prelevarea probei, acesta poate fi utilizat o singură dată pentru examen virusologic. ... b) Dacă există dificultăți obiective - incubator defect, probleme cu mediile de cultură celulare - care împiedică
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
poate fi utilizat o singură dată pentru examen virusologic. ... b) Dacă există dificultăți obiective - incubator defect, probleme cu mediile de cultură celulare - care împiedică inocularea celulelor în primele 48 de ore de la prelevarea probelor de țesut, este admis că lichidul supernatant să fie congelat la -80°C, iar examenul virusologic să fie executat în maximum 14 zile. Înainte de a inocula celulele, se amestecă supernatantul cu părți egale cu un pool de antiser contra serotipurilor indigene de virus al necrozei pancreatice infecțioase
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
Subcultivarea a) Dacă nu se produce nici un efect citopatic în primă incubație de 7-10 zile, se procedează la o subcultivare pe culturi celulare proaspete, utilizându-se o suprafata celulară similară cu cea din cultura primară. ... b) Cantitatea de mediu - lichid supernatant - care provine din toate culturile/godeurile ce constituie cultură primară este adunată într-un pool pentru fiecare linie celulară, la 7-10 zile după inoculare. Eșantioanele - pool-urile - sunt apoi inoculate pe culturi celulare omoloage, nediluat și diluat 1/10, rezultând în
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
toate culturile/godeurile ce constituie cultură primară este adunată într-un pool pentru fiecare linie celulară, la 7-10 zile după inoculare. Eșantioanele - pool-urile - sunt apoi inoculate pe culturi celulare omoloage, nediluat și diluat 1/10, rezultând în final diluții ale supernatantului de 1:10 și 1:100, astfel cum este descris în art. 11. Părți de 10% din mediul ce constituie cultură primară sunt inoculate direct într-un godeu cu culturi celulare proaspete, subcultivare godeu la godeu. Inocularea poate fi precedată
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
incubație. ... e) Dacă se produce o contaminare bacteriană în ciuda tratamentului cu antibiotice, subcultivarea trebuie precedată de o centrifugare la 2.000-4.000 x g timp de 15-30 de minute, la temperatura de 2-5°C, si/sau de o filtrare a supernatantului cu un filtru - membrana cu procent scăzut de absorbție a proteinei - de 0,45 æm. În plus față de acest aspect, procedurile de subcultivare sunt aceleași ca și cele care se aplică în cazul apariției efectului citopatic toxic. ... Capitolul 4 Identificarea
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
000 x g sau filtrare prin membrana de 0,45 æm cu procent scăzut de absorbție a proteinelor, si se diluează supernatantul 1:100 și 1:10.000 în mediu de culturi celulare. ... b) Părți din cele două diluții ale supernatantului sunt amestecate separat și incubate pentru 60 de minute la 15°C cu părți egale din următorii reagenti: ... 1. ser ce conține anticorpi anti virusul SHV la diluție 1:50, vol:vol; 2. ser ce conține anticorpi anti virusul IHN
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
timp de 15 minute, iar supernatantul este colectat și tratat pentru 4 ore la 15°C cu antibiotice, de exemplu gentamicina 1mg/ml, sau filtrat prin membrana de 0,45 æm, cu procent scăzut de legare a proteinei. ... c) Tratarea supernatantului cu antiser: suspensia de organe tratată cu antibiotice sau filtrată este diluata 1:10 și 1:1000 în mediu de culturi celulare, iar părți din acestă se amestecă și se incubează 60 de minute la 15°C cu părți egale
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
împiedică apariția efectului citopatic, se procedează la identificarea virusului în conformitate cu cele prezentate în partea I cap. IV. e) Subcultivarea: dacă nu se produce nici un efect citopatic în 7-10 zile, se procedează la o subcultivare plecând de la culturi inoculate cu lichid supernatant și mediu în conformitate cu lit. B pct. 2 c) și partea I cap. III art. 14. ... C. Alte tehnici de diagnostic 1. Lichidul supernatant preparat astfel cum este indicat în partea I cap. ÎI art. 9 poate fi supus unor tehnici
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]
-
nici un efect citopatic în 7-10 zile, se procedează la o subcultivare plecând de la culturi inoculate cu lichid supernatant și mediu în conformitate cu lit. B pct. 2 c) și partea I cap. III art. 14. ... C. Alte tehnici de diagnostic 1. Lichidul supernatant preparat astfel cum este indicat în partea I cap. ÎI art. 9 poate fi supus unor tehnici de IFAT sau ELISA, în conformitate cu partea I cap. IV art. 17-18. 2. Aceste tehnici rapide trebuie să fie completate printr-un examen virusologic
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 octombrie 2002 privind planurile de prelevare, metodele de diagnostic, determinarea şi confirmarea prezentei septicemiei hemoragice virale - SHV - şi necrozei hematopoetice infectioase - NHI - la peşti. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/146168_a_147497]