13,817 matches
-
fie la o temperatură între 20 și 25°C înainte de a trece la determinare. Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuve cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic) sau cu apă ca standard. Se pun următoarele în cuve cu drum optic de 1 cm: Cuvă de referință (ml) Cuvă probă (ml) Soluția 2.1.1 1,00 1,00 Soluția 2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
bidistilată 1,00 0,80 Suspensia 2.1.3 0,02 0,02 Proba de măsurat - 0,20 Se amestecă folosind un agitator de sticlă sau o baghetă din material sintetic cu un capăt turtit; după cinci minute se măsoară absorbția soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A1). Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4 și 0,05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
referință și pentru probă (A1). Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4 și 0,05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
05 ml de soluție de la punctul 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se determină puterea de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
efectuate independent aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă 0,05 ml de soluție 2.1.5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
5, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 30 minute) și se măsoară absorbțiile în cuvele de referință și pentru probă (A3). Se calculează diferențele (A2 - A1) pentru acid L-lactic și (A3 - A2) pentru acid D-lactic între absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
lactic și acid lactic total) v = volumul probei în ml (aici, 0,2 ml) M = masa moleculară a substanței de determinat (aici, pentru acid DL-lactic, M = 90,08) d = drumul optic în cuvă în cm (aici, 1 cm) = coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm = 6,3 m mol-1 1 cm-1), 2.5.1.1. Acidul lactic total și acidul D-lactic C = 0,164 A Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, rezultatul se înmulțește cu factorul de diluare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
1. Coloană de sticlă cu diametrul interior de 10-11 mm și lungă de aproximativ 300 mm, echipată cu robinet de golire pentru reglarea curgerii. 3.2.2. Baie de apă termostatată la 65° C. 3.2.3. Spectrofotometru pentru determinarea absorbției la o lungime de undă de 570 nm, echipat cu cuve cu drum optic de 1 cm. 3.3. Metoda de lucru 3.3.1. Pregătirea coloanei de schimb ionic Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.3.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
soluție într-o cuvă de spectrofotometru. Colorația produsă variază de la verde la violet și este măsurată la 570 nm comparativ cu aerul (fără cuvă în drumul optic); ea se intensifică și apoi se decolorează rapid. Se urmărește variația corespunzătoare a absorbției și se alege valoarea maximă ca valoare definitivă. Dacă eluatul este prea bogat în acid lactic și absorbția prea ridicată, se diluează eluatul cu soluție de sulfat de sodiu 7,1% (punctul 3.1.1) și se efectuează măsurătoarea pe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
nm comparativ cu aerul (fără cuvă în drumul optic); ea se intensifică și apoi se decolorează rapid. Se urmărește variația corespunzătoare a absorbției și se alege valoarea maximă ca valoare definitivă. Dacă eluatul este prea bogat în acid lactic și absorbția prea ridicată, se diluează eluatul cu soluție de sulfat de sodiu 7,1% (punctul 3.1.1) și se efectuează măsurătoarea pe soluția diluată. 3.3.4. Trasarea curbei de etalonare Se pipetează 10 ml de soluție de acid lactic
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
această soluție și se introduc în flacoane cotate de 100 ml. Se aduce la semn cu soluție de sulfat de sodiu 7,1% (punctul 3.1.1). Se iau câte 10 ml din fiecare din soluțiile rezultate și se determină absorbția conform procedurii pentru eluat descrisă la punctul 3.3.3. Concentrațiile acestor soluții corespund unor eluați din vin conținând 0,45, 0,9, 1,35, 1,80 și 2,25 g/l acid lactic. Un grafic al absorbțiilor acestor soluții
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
se determină absorbția conform procedurii pentru eluat descrisă la punctul 3.3.3. Concentrațiile acestor soluții corespund unor eluați din vin conținând 0,45, 0,9, 1,35, 1,80 și 2,25 g/l acid lactic. Un grafic al absorbțiilor acestor soluții în funcție de concentrația lor în acid lactic este o linie dreaptă. 3.4. Exprimarea rezultatelor Absorbția măsurată pentru eluat se reperează pe grafic și se citește concentrația corespunzătoare a acidului lactic în vin în grame la litru. Rezultatul se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
unor eluați din vin conținând 0,45, 0,9, 1,35, 1,80 și 2,25 g/l acid lactic. Un grafic al absorbțiilor acestor soluții în funcție de concentrația lor în acid lactic este o linie dreaptă. 3.4. Exprimarea rezultatelor Absorbția măsurată pentru eluat se reperează pe grafic și se citește concentrația corespunzătoare a acidului lactic în vin în grame la litru. Rezultatul se redă cu o cifră zecimală. Notă: Vinurile cu un conținut mai mare de 250 mg/l bioxid
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ml cu apă distilată). Apoi, la fel ca la determinarea acidului lactic, se adaugă 5 ml de nitroprusiat de sodiu 2% (punctul 3.1.2.5) și 5 ml de piperidină 10% (punctul 3.1.16). După agitare, se măsoară absorbția în aceleași condiții ca cele descrise pentru măsurarea acidului lactic. Se localizează puterea de absorbție pe curba de calibrare pentru a obține valoarea aparentă B a concentrației acidului lactic în grame la litru, datorată acidului etanalsulfonic. Dacă L' este concentrația
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ml de nitroprusiat de sodiu 2% (punctul 3.1.2.5) și 5 ml de piperidină 10% (punctul 3.1.16). După agitare, se măsoară absorbția în aceleași condiții ca cele descrise pentru măsurarea acidului lactic. Se localizează puterea de absorbție pe curba de calibrare pentru a obține valoarea aparentă B a concentrației acidului lactic în grame la litru, datorată acidului etanalsulfonic. Dacă L' este concentrația aparentă a acidului lactic în vin în grame la litru, concentrația reală L a acidului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
malic. Îndepărtarea oxaloacetatului din amestecul reacției deplasează echilibrul spre formațiunea de oxaloacetat. În prezența L-glutamatului, oxaloacetatul este transformat în L- aspartat într-o reacție catalizată de glutamat oxaloacetat transaminază (OGT): (1) (2) Cantitatea de NADH formată, măsurată prin creșterea în absorbție la lungimea de undă de 340nm, este proporțională cu cantitatea de acid L- malic prezent inițial. 2. REACTIVI 2.1. Soluție- tampon pH 10 (glicilglicină 0,6M: L-glutamat 0,1M) se dizolvă 4,75 g de glicilglicină și 0,88
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
5 mg/ml. Această soluție rămâne stabilă cel puțin un an la 4șC. Notă: toți reactivii de mai sus sunt disponibili în comerț. 3. APARATURA 3.1. Un spectrofotometru care permite măsurători la 340 nm, lungimea de undă la care absorbția de NADH este maximă. În absența acestuia se poate folosi un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului, care permite măsurători la 334 sau 365 nm. Întrucât se efectuează măsurători absolute ale absorbției (de exemplu, nu se utilizează curbele de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
340 nm, lungimea de undă la care absorbția de NADH este maximă. În absența acestuia se poate folosi un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului, care permite măsurători la 334 sau 365 nm. Întrucât se efectuează măsurători absolute ale absorbției (de exemplu, nu se utilizează curbele de calibrare, dar standardizarea se obține prin considerarea coeficientului de extincție a NADH), trebuie verificate scalele lungimii de undă și absorbanța spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu drum optic de 1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
În acest caz, volumul de apă care se adăugă este redus în așa fel încât volumele totale în cele două cuve să fie egale. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
fel încât volumele totale în cele două cuve să fie egale. 5. METODA DE LUCRU Cu spectrofotometrul ajustat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuvele cu o lungime optică de 1 cm, cu aer pentru absorbția standard zero (de referință) sau cu apă, ca standard. În cuvele cu un drum optic de 1 cm se pun următoarele: Celula de referință (ml) Celula probei (ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
ml) Soluția 2.1 1,00 1,00 Soluția 2.2 0,20 0,20 Apă bidistilată 1,00 0,90 Suspensia 2.3 0,01 0,01 Proba de măsurat - 0,10 Se amestecă: după trei minute se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei de măsurat (A1). Se adaugă: Soluția 2.4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
4 0,01 ml 0,01 ml Se amestecă; se așteaptă ca reacție să fie încheiată (între cinci și zece minute) și se măsoară absorbția soluțiilor în cuvele de referință și a probei (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) în absorbțiile soluțiilor cuvei de referință și a probei ΔAR și ΔAS. La sfârșit, se calculează diferența acestora ΔA = ΔAs - ΔAR Notă: timpul necesar pentru realizarea activității enzimatice poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus are caracter orientativ
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
2,22 ml) v = volumul probei, în ml (aici, 0,1 ml) M = masă moleculară a substanței care este determinată (aici, pentru acid L-malic, M = 134,09) d = drumul optic al cuvei, în cm (aici, 1 cm( = coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm, є=6,3 m mol -1 1 cm-1) astfel încât, pentru L-malat: C = 0,473 ΔA g/l Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, se înmulțește rezultatul cu factorul de diluare. Notă: Determinări la 334
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]