1,361 matches
-
a se vedea site-ul web la adresa: http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Testul trebuie efectuat pe extracte de probă proaspăt preparate. După caz, acesta poate fi efectuat cu succes pe extracte conservate în soluție de glicerol, la o temperatură între -68 și -86 °C. Glicerolul poate fi separat de probă prin adăugarea unui ml de tampon de extract concentrat (a se vedea apendicele 4), centrifugare timp de 15 minute la 7 000 g și resuspendare în
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
europa.eu.int/Public/irc/sanco/Home/main). Testul trebuie efectuat pe extracte de probă proaspăt preparate. După caz, acesta poate fi efectuat cu succes pe extracte conservate în soluție de glicerol, la o temperatură între -68 și -86 °C. Glicerolul poate fi separat de probă prin adăugarea unui ml de tampon de extract concentrat (a se vedea apendicele 4), centrifugare timp de 15 minute la 7 000 g și resuspendare în aceeași cantitate de tampon de extract concentrat. Acest lucru
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de pe lamă picăturile de conjugat. Se clătește și se spală în conformitate cu indicațiile anterioare (punctul 4.3.3). Se elimină cu grijă excesul de umiditate; 4.3.7. în fiecare fereastră se depun cu pipeta 5-10 μl dintr-o soluție de glicerol tamponată cu fosfat la 0,1 M (a se vedea apendicele 3) sau un suport antidecolorare din comerț, apoi se acoperă cu o lamelă. 4.4. Citirea testului de imunofluorescență: 4.4.1. Se examinează lamele de test cu ajutorul unui
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
adăugate extractelor de probe care au dus anterior la rezultate negative. Este preferabil să se aplice procedura descrisă în continuare pentru extractele de probă proaspăt preparate, dar procedura poate funcționa, de asemenea, cu extracte de probă conservate în soluție de glicerol la temperaturi între -16 °C și -24 °C sau între -68 °C și -86 °C. Ca martori negativi se folosesc alicote de extract de probă care au dus în prealabil la un rezultat negativ, cu ocazia testelor de depistare a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
2). Pentru a obține o sensibilitate maximă a detecției este preferabil să se utilizeze un extract de probă proaspăt preparat în condiții optime de creștere. Cu toate acestea, metoda poate fi aplicată cu succes pentru extracte conservate în soluție de glicerol la temperaturi între -68 °C și -86 °C. Anumite varietăți de pătlăgea vânătă constituie un mediu excelent de îmbogățire selectivă pentru cultura de C. m. ssp. sepedonicus, chiar și în absența simptomelor și permit, de asemenea, realizarea unui excelent test
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
slab oxidant Oxidază - Creștere la 37 °C - Activitate ureazică - Hidroliza esculinei + Hidroliza amidonului - sau slab Toleranța unei soluții de NaCl la 7 % - Producție de indol - Activitatea catalazei + Producție de H2S - Utilizare citrat - Lichefierea gelatinei - Producție de acid pe bază de glicerol - Producție de acid pe bază de lactoză - sau slab Producție de acid pe bază de ramnoză - Producție de acid pe bază de salicină - Colorare Gram (a se vedea apendicele 9) + 9.2. Test de imunofluorescență (IF) (a) Se prepară o
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează cu autoclavă timp de 15 minute la 121 °C. 2.2. Tampon IF-Tween Tamponul menționat este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a întări fluorescența. Na2HPO4.12H2O 3,2 g NaH2PO4.2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml Soluții
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat cu fosfat, pH 7,6 Tamponul menționat este utilizat ca lichid de suport pe ferestrele lamelor IF pentru a întări fluorescența. Na2HPO4.12H2O 3,2 g NaH2PO4.2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml Soluții suport antidecolorare sunt disponibile în comerț: de exemplu, Vectashield(r) (Vector Laboratories) sau Citifluor(r) (Leica). Apendicele 4 Determinarea gradului de contaminare în momentul testelor IF și FISH 1. Se numără numărul mediu
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
C. m. ssp. sepedonicus au o lungime de 282 bp și 220 bp. 2. Prepararea tamponului de încărcare 2.1. Bromofenol albastru (soluție concentrată la 10 %) Bromofenol albastru 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 2.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Bromofenol albastru (5,1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2 ml 3. 10X tampon de EDTA (TAE) triacetat, pH 8,0 Tampon tri 48,4 g Acid acetic glacial 11,42 ml EDTA (sare disodică
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
5. Se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1,5 ml tampon concentrat (apendicele 4). Se folosesc 500 μl pentru a testa R. solanacearum, 500 μl pentru Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus și 500 μl pentru referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (volum) la 500 μl de alicote de referință și la alicota de testare rămasă, se omogenizează în vortex și se depozitează la o temperatură situată între - 16 și - 24 °C (săptămâni) sau între - 68
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
III.1.1.3-1.1.5. 2.1.5. Se împarte extractul eșantionului inițial sau concentrat în două părți egale. Se păstrează jumătate la o temperatură de 4-10 °C pe parcursul testului și se conservă cealaltă jumătate cu 10-25 % (volum) de glicerol steril la o temperatură situată între - 16 și - 24 °C (săptămâni) sau între - 68 și - 86 °C (luni) în cazul în care este necesar un test suplimentar. 2.2. Teste A se vedea diagrama și descrierea testelor și protocoalelor optimizate
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
metodă de testare diferită. Cea mai mare sensibilitate de detectare, în cadrul acestei metode, poate fi atinsă în cazul în care se folosesc extracte de eșantioane proaspăt preparate. Cu toate acestea, metoda se aplică, de asemenea, utilizărilor de extracte păstrate sub glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68 și - 86 °C. Se prepară, pentru control pozitiv, diluții zecimale de suspensie de 106 ufc/ml dintr-o sușă virulentă biovar 2 de R. solanacearum (de exemplu, NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857). Pentru
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
000. La efectuarea testului, diluțiile de lucru ale anticorpilor trebuie să fie aproximativ egale sau egale cu cele ale titrului. Testul trebuie efectuat cu extracte de eșantion proaspăt preparate. După caz, se pot folosi și extracte conservate în soluție de glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68 °C și - 86 °C. Glicerolul poate fi separat de eșantion prin adăugarea a 1 ml de tampon concentrat (a se vedea apendicele 4), recentrifugarea timp de cincisprezece minute la 7 000 g și resuspendarea
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
fie aproximativ egale sau egale cu cele ale titrului. Testul trebuie efectuat cu extracte de eșantion proaspăt preparate. După caz, se pot folosi și extracte conservate în soluție de glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68 °C și - 86 °C. Glicerolul poate fi separat de eșantion prin adăugarea a 1 ml de tampon concentrat (a se vedea apendicele 4), recentrifugarea timp de cincisprezece minute la 7 000 g și resuspendarea în același volum de tampon concentrat. Acest lucru este rareori necesar
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
temperatura ambiantă (18-25 °C). 5.3.6. Se scutură picăturile de conjugat de pe lamă. Se clătesc și se spală în conformitate cu cele indicate anterior (5.3.3). Se îndepărtează cu grijă excesul de umezeală. 5.3.7. Se pipetează 5-10 μl glicerol tamponat fosfatic 0,1 M (apendicele 4) sau un suport antidecolorare comercial în fiecare fereastră și se acoperă cu o lamă. 5.4. Citirea testului de imunofluorescență 5.4.1. Se examinează lamele de test la un microscop cu sursă
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
R. solanacearum adăugate la extractele de eșantioane care au dat anterior rezultate negative. Este de preferat să se aplice procedura descrisă în continuare extractelor de eșantioane proaspăt preparate, dar se pot folosi și extracte de eșantion conservate în soluție de glicerol la temperaturi cuprinse între - 16 °C și - 24 °C sau între - 68 °C și - 86 °C. Drept eșantioane de control negativ, se folosesc alicote de extracte de eșantion care au dat anterior rezultate negative la testele de identificare a R.
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
a se vedea apendicele 3). Poate fi atins gradul de sensibilitate cel mai mare atunci când se folosesc extracte de eșantioane proaspăt preparate și în condiții optime de creștere. Cu toate acestea, metoda se poate aplica cu succes extractelor păstrate sub glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68 și - 86 °C. Următorul protocol se bazează pe protocolul Janse (1988): 9.1. Se utilizează zece plante de test ale unui cultivar de tomată sensibil (de exemplu, Moneymaker sau un cultivar cu o sensibilitate
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Sigma) pentru obținerea concentrației finale de 50 mg la litru. (b) Medii de creștere selective validate Mediu SMSA (Englebrecht, 1994, modificat de Elphinstone et al., 1996) Mediu de bază Acizi casaminici (Difco) 1,0 g Bacto-peptonă (Difco) 10,0 g Glicerol 5,0 ml Bacto-agar (Difco) (a se vedea nota 2) 15,0 g Apă distilată 1,0 l Se dizolvă ingredientele și se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute. Se răcește la 50 °C și se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
dizolvă ingredientele, se verifică pH-ul și se sterilizează în autoclavă la 121 °C timp de 15 minute. 2.2. Tampon IF-Tween Acest tampon este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat fosfatic, pH 7,6 Acest tampon este utilizat ca fluid de suport la ferestrele lamei IF pentru mărirea fluorescenței. Na2HPO4.·12H2O 3,2 g NaH2PO4·2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml În comerț sunt
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
0,1 % Tween 20 la tamponul IF. 2.3. Glicerol tamponat fosfatic, pH 7,6 Acest tampon este utilizat ca fluid de suport la ferestrele lamei IF pentru mărirea fluorescenței. Na2HPO4.·12H2O 3,2 g NaH2PO4·2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml În comerț sunt disponibile soluții suport antidecolorare, de exemplu, Vectashield(r) (Vector Laboratories) sau Citifluor(r) (Leica). 3. Tampoane pentru testul ELISA indirect 3.1. Tampon de acoperire dublu concentrat, pH 9,6 Na2CO3
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
solanacearum utilizând primerii Rs-1-F și Rs-3-R nu au puncte de restricție. 5. Prepararea tamponului de încărcare 5.1. Albastru de bromfenol (soluție concentrată de 10 %) Albastru de bromfenol 5 g Apă distilată (bidest) 50 ml 5.2. Tampon de încărcare Glicerol (86 %) 3,5 ml Albastru de bromfenol (5.1) 300 μl Apă distilată (bidest) 6,2 ml 6. Tampon triacetat EDTA (TAE) 10 x, pH 8,0 Tampon TRIS 48,40 g Acid acetic glacial 11,42 ml EDTA (sare
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în domeniul vamal ANEXA 1 Lista de produse agricole și de produse agricole prelucrate încadrate la capitolele 25-97 din SA menționate la articolele 7 și 12 Cod SA 2905 43 (manitol) Cod SA 2905 44 (sorbitol) Cod SA 2905 45 (glicerol) Secțiune SA 3301 (uleiuri esențiale) Cod SA 3302 10 (substanțe odoriferante) Secțiuni SA 3501-3505 (substanțe albuminoide, produse pe bază de amidon sau de fecule modificate, cleiuri) Cod SA 3809 10 (agenți de apretare sau de finisare) Secțiune SA 3823 (acizi
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]
-
inerte sau altfel modificate chimic, cu excepția celor de la poziția 1516 0% - - Altele 1518 00 95 - - - Amestecuri sau preparate necomestibile din grăsimi și uleiuri animale sau animale și vegetale și fracțiunile acestora 0% 1518 00 99 - - - Altele 0% 1520 00 00 Glicerol brut; ape și leșii de glicerină 0% 1521 Ceruri vegetale (altele decât trigliceridele), ceruri de albine sau de alte insecte și spermanțet, eventual rafinate sau colorate: 1521 10 00 - Ceruri vegetale 0% 1521 90 - Altele: 1521 90 10 - - Spermanțet, eventual
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]
-
net de maximum 500 g 0% 2403 10 90 - - Altele 0% 2403 91 00 - - Tutun "omogenizat" sau "reconstituit" 0% 2403 99 - - Altele: 2403 99 10 - - - Tutun pentru mestecat și pentru prizat 0% 2403 99 90 - - - Altele 0% 2905 45 00 - - Glicerol 0% 3301 Uleiuri esențiale (deterpenizate sau nu), inclusiv cele "concrete" sau "absolute"; oleorășini de extracție; soluții concentrate de uleiuri esențiale în grăsimi, în uleiuri stabilizate, în ceară sau în substanțe similare, obținute prin impregnare sau macerare; subproduse terpenice reziduale de la
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]
-
sau preparate nealimentare de grăsimi sau de uleiuri animale sau vegetale sau din fracțiunile diferitelor grăsimi sau uleiuri din prezentul capitol, nedescrise și neîncadrate în altă parte: 1518 00 10 - - - Uleiuri epoxidice 1518 00 90 - - - Altele 5% 100% 1520 00 Glicerol brut; ape și leșii de glicerină 0% Deja la 0% 1521 Ceruri vegetale (altele decât trigliceridele), ceruri de albine sau de alte insecte și spermanțet, eventual rafinate sau colorate: 1521 10 - Ceruri vegetale 5% 100% 1521 90 - Altele 5% 100
22006A0530_01-ro () [Corola-website/Law/294531_a_295860]