1,487 matches
-
revaporizat. De fiecare dată rezultă vapori din ce în ce mai concentrați în componentul mai volatil. Lungimea coloanei de fracționare și materialul component influențează numărul de recondensări, numărul de talere teoretice, implicit separarea. De asemenea, coloana de fracționare este utilizată pentru a furniza un gradient de temperatură peste cel necesar distilării. În situații ideale. • temperatura în flaconul de distilare trebuie să fie egală cu punctul de fierbere al amestecului de lichide • temperatura de la capătul coloanei de fracționare trebuie să fie egală cu cel mai scăzut
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
4σ. Se obișnuiește să se evalueze concentrația solutului din aria triunghiului format de cele două tangente și linia de bază. Fig. I. 28. Curba de distribuție Gauss Când curba este gaussiană (simetrică) aria triunghiului este . Difuzia are loc liber datorită gradientului de concentrație din regiunea corespunzătoare unei concentrații mari (centrul zonei) către regiunile de concentrații mici (zone periferice) conform legii lui Fick. Alt tip de difuzie în faza mobilă este așa numita difuzie turbulentă generată de neregularitățile canalelor străbătute de solut
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
din partea frontală a picului intră în mod continuu din faza staționară în faza mobilă pentru a se restabili echilibrul. În partea finală a picului se desfășoară procesul invers. Separările cromatografice se pot realiza prin: 1. Eluție izocratică; 2. Eluție în gradient; 3. Procedeul frontal; 4. Procedeul deplasării. 1. Eluția izocratică În eluția izocratică, condițiile cromatografice se mențin constante pe parcursul experimentului. Această tehnică este posibilă numai în cazul unui amestec cu număr redus de componenți. Fiecare component al probei trece prin coloană
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
o putere de eluție crescătoare (E1 urmat de E1 + E2 și apoi E2). Se recomandă aplicarea acestei metode numai în cazul probelor cu izoterme liniare și de compoziție cunoscută pentru a decide ușor când trebuie schimbat solventul. 2. Eluția în gradient În această separare, puterea de eluție a solventului care intră în coloană se schimbă mereu. Eluția în gradient se realizează cu doi solvenți, unul slab și altul puternic. Aceștia sunt amestecați în proporții treptate astfel încât primul solvent care părăsește dispozitivul
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
numai în cazul probelor cu izoterme liniare și de compoziție cunoscută pentru a decide ușor când trebuie schimbat solventul. 2. Eluția în gradient În această separare, puterea de eluție a solventului care intră în coloană se schimbă mereu. Eluția în gradient se realizează cu doi solvenți, unul slab și altul puternic. Aceștia sunt amestecați în proporții treptate astfel încât primul solvent care părăsește dispozitivul să fie cel slab E1, în timpul separării eluentul devine în mod progresiv mai bogat în E2, iar la
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
dispozitivul să fie numai E2 pur. Metoda are următoarele avantaje: este posibil să se separe componenții cu proprietăți sorbtive foarte diferite într-o singură operație; se obțin picuri de eluție strâmte și înalte datorită linearizării izotermelor de distribuție sub efectul gradientului; picurile de eluție sunt mai apropiate datorită aplatizării izotermelor de distribuție; se evită pierderea vreunui component; diagrama de eluție este ușor interpretabilă deoarece un component apare într-un singur pic. Eluție izocratică Eluție în gradient Se utilizează și alte procedee
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
izotermelor de distribuție sub efectul gradientului; picurile de eluție sunt mai apropiate datorită aplatizării izotermelor de distribuție; se evită pierderea vreunui component; diagrama de eluție este ușor interpretabilă deoarece un component apare într-un singur pic. Eluție izocratică Eluție în gradient Se utilizează și alte procedee de eluție: - eluția cu debit programat (se modifică debitul în timpul separării); - eluția cu temperatură programată; - eluția în gradient de fază staționară sau având coloane umplute cu faze staționare cu polarități diferite. 3. Procedeul frontal Acest
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
de eluție este ușor interpretabilă deoarece un component apare într-un singur pic. Eluție izocratică Eluție în gradient Se utilizează și alte procedee de eluție: - eluția cu debit programat (se modifică debitul în timpul separării); - eluția cu temperatură programată; - eluția în gradient de fază staționară sau având coloane umplute cu faze staționare cu polarități diferite. 3. Procedeul frontal Acest procedeu constă în trecerea soluției de analizat prin coloana cromatografică, nefiind necesar un solvent de developare (fig. I.32) Se determină concentrația de
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
elementară care le separă și cu dv diferența de viteză a celor două straturi, forța de frecare care ia naștere este dată de relația lui Newton: fsdvdx=⋅⋅η ABSv + dvvdx unde: η = coeficient de vâscozitate specific lichidului dat; dv/dx = gradientul vitezei (acesta caracterizează variația vitezei pe direcția perpendiculară celei de deplasare a straturilor). Lichidele pentru care factorul η este în funcție de temperatura și presiunea dată, constant în raport cu dv/dx, se numesc lichide normale, spre deosebire de lichidele la care acest coeficient variază în raport cu
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
vitezei (acesta caracterizează variația vitezei pe direcția perpendiculară celei de deplasare a straturilor). Lichidele pentru care factorul η este în funcție de temperatura și presiunea dată, constant în raport cu dv/dx, se numesc lichide normale, spre deosebire de lichidele la care acest coeficient variază în raport cu gradientul de viteză, lichide care se consideră anormale. Coeficientul η din relația lui Newton, constant față de raportul dv/dx, se numește vâscozitate dinamică sau vâscozitate absolută, η; reprezintă rezistența care se opune la deplasarea în sens invers cu viteza de 1
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
solvenți d) pentru separarea unei a doua fracțiuni țintă se delimitează o nouă fracțiune e) cromatograma după a treia separare utilizând un al treilea sistem de solvenți 2D CP modulată (nPC) Ilustrarea schematică a 2D-CP modulată (nCP) bazată pe micșorarea gradientului de tărie a solventului și refocalizarea zonei cromatografice a) aplicarea probei înainte de începerea separării b) frontul de solvent cu primul sistem ( n=1) pentru refocalizarea zonei de start c) frontul de solvent pentru al doilea sistem (n=2) când compușii
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
2) când compușii din zona de start migrează (ST2<ST1) d) frontul de solvent pentru al treilea sistem ce constituie etapa a treia (n=3), când o parte din compuși se separă în benzi înguste (ST3<ST2) Utilizarea universală a gradientului de solvent în analiza multidimensională (AMD) a) modificarea combinată în sistemul de solvenți b) modificarea totală a solventului puternic (ST) în sistemul combinat c) modificarea totală a selectivității (valoare, SV) solventului din sistem CP cuplare-straturi (PC-PC) Diagrama selecționării “în cros
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
în condițiile unor astfel de determinări (să nu adsoarbă și să nu emită în domeniul de undă ales. De asemenea, pH-ul poate fi important deoarece unele medicamente arată fluorescență în forma ionică. TEHNICI DE ELUARE Eluarea normală și în gradient Pentru realizarea unei separări eficiente în astfel de situații, se pot aplica mai multe procedee care înlocuiesc eluția normală cu eluția cu gradient (de solvent, de temperatură, de debit etc.). Eluția normală (izocratică) utilizează un eluent a cărui compoziție și
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fi important deoarece unele medicamente arată fluorescență în forma ionică. TEHNICI DE ELUARE Eluarea normală și în gradient Pentru realizarea unei separări eficiente în astfel de situații, se pot aplica mai multe procedee care înlocuiesc eluția normală cu eluția cu gradient (de solvent, de temperatură, de debit etc.). Eluția normală (izocratică) utilizează un eluent a cărui compoziție și viteză sunt constante. În eluția izocratică, separarea poate fi descrisă cu ajutorul ecuațiilor date de unii parametrii, prezentați la aspectele teoretice ale procesului cromatografic
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
debit etc.). Eluția normală (izocratică) utilizează un eluent a cărui compoziție și viteză sunt constante. În eluția izocratică, separarea poate fi descrisă cu ajutorul ecuațiilor date de unii parametrii, prezentați la aspectele teoretice ale procesului cromatografic. Timp de reținere. Eluția cu gradient de solvent constă în modificarea continuă a compoziției eluantului în timpul separării, astfel încât puterea de eluție să fie gradat mărită. Este cunoscut faptul că, migrarea diferențiată a componentelor dintr-un amestec depinde de retenția preferențială în faza staționară. Deci rezoluția este
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
cazul coprezenței unor componenți cu valori K′ foarte diferite este dată de modificarea condițiilor de separare, astfel încât să se optimizeze K′ pentru fiecare component în parte, în timpul deplasării prin coloană. Cea mai recomandabilă tehnică în acest caz este eluția în gradient. Eluția în gradient prezintă și dezavantaje, în primul rând, prin aceea că, obligă la o creștere a complexității utilajelor și a tehnicii de lucru. În ceea ce privește dispozitivele pentru eluția în gradient, acestea se împart în două categorii. Din prima categorie fac
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
componenți cu valori K′ foarte diferite este dată de modificarea condițiilor de separare, astfel încât să se optimizeze K′ pentru fiecare component în parte, în timpul deplasării prin coloană. Cea mai recomandabilă tehnică în acest caz este eluția în gradient. Eluția în gradient prezintă și dezavantaje, în primul rând, prin aceea că, obligă la o creștere a complexității utilajelor și a tehnicii de lucru. În ceea ce privește dispozitivele pentru eluția în gradient, acestea se împart în două categorii. Din prima categorie fac parte dispozitive care
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
Cea mai recomandabilă tehnică în acest caz este eluția în gradient. Eluția în gradient prezintă și dezavantaje, în primul rând, prin aceea că, obligă la o creștere a complexității utilajelor și a tehnicii de lucru. În ceea ce privește dispozitivele pentru eluția în gradient, acestea se împart în două categorii. Din prima categorie fac parte dispozitive care modifică compoziția solventului introdus în pompă (pompă cu piston aspiratoare-respingătoare). Cele mai multe dispozitive utilizează un rezervor conținând un solvent inițial (slab) și un mixer. Când eluția progresează, se
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
eficiență moderată și pentru probe ce au puțini componenți. FAZE MOBILE Sunt alcătuite din unul din compușii înscriși în tabelul prezentat in capitolul I (Aspecte privind separarea substanțelor medicamentoase), dioxidul de carbon fiind cel mai utilizat. Se poate lucra în gradient simplu (temperatură) sau dublu (temperatură-presiune). Faza mobilă se introduce în stare lichidă (de exemplu CO2) la o temperatură joasă și presiune inferioară celei critice (PC). Se aplică apoi o încălzire la 40o C, temperatură superioară temperaturii critice (TC). Se menține
ANALIZA MEDICAMENTELOR VOLUMUL 1 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/84343_a_85668]
-
fiziologic. Membrana celulară devine încrețită și apar o serie de de vezicule (bule) mici într-o manieră mai accentuată decât în necroză. Ulterior celula se va fragmenta în corpi apoptotici și, important de menționat, aceștia sunt „sigilați” și își mențin gradientul osmotic, deci conținutul celular nu se va împrăștia și nu va apărea răspuns inflamator. Este posibil ca, odată intrată în apoptoză, celula să-și întărească membrana (pentru a preveni riscul de liză) prin activarea unor enzime (transglutaminaza) [160]. Se pare
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
fiziologic. Membrana celulară devine încrețită și apar o serie de de vezicule (bule) mici într-o manieră mai accentuată decât în necroză. Ulterior celula se va fragmenta în corpi apoptotici și, important de menționat, aceștia sunt „sigilați” și își mențin gradientul osmotic, deci conținutul celular nu se va împrăștia și nu va apărea răspuns inflamator. Este posibil ca, odată intrată în apoptoză, celula să-și întărească membrana (pentru a preveni riscul de liză) prin activarea unor enzime (transglutaminaza) [160]. Se pare
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
tamponul de extracție. Valorile se raportează la concentrația de proteină citosolică, determinată prin diverse metode colorimetrice (Lowry) sau prin determinări directe, în ultraviolet. Există mai multe metode curente de determinare, unele dintre acestea fiind prezentate în paragrafele următoare. Ultracentrifugarea în gradient de densitate de sucroză (SGC Sucrose density-gradient ultracentrifugation - ultracentrifugare în gradient de sucroză) Ultracentrifugarea în gradient de sucroză furnizează informații despre formele moleculare ale receptorilor, din date de viteza de sedimentare ale proteinelor, în funcție de densitatea și masa moleculară. În mod
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
determinată prin diverse metode colorimetrice (Lowry) sau prin determinări directe, în ultraviolet. Există mai multe metode curente de determinare, unele dintre acestea fiind prezentate în paragrafele următoare. Ultracentrifugarea în gradient de densitate de sucroză (SGC Sucrose density-gradient ultracentrifugation - ultracentrifugare în gradient de sucroză) Ultracentrifugarea în gradient de sucroză furnizează informații despre formele moleculare ale receptorilor, din date de viteza de sedimentare ale proteinelor, în funcție de densitatea și masa moleculară. În mod uzual, întâi, citosolul este incubat cu ligand radiomarcat (steroid, de concentrație
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
Lowry) sau prin determinări directe, în ultraviolet. Există mai multe metode curente de determinare, unele dintre acestea fiind prezentate în paragrafele următoare. Ultracentrifugarea în gradient de densitate de sucroză (SGC Sucrose density-gradient ultracentrifugation - ultracentrifugare în gradient de sucroză) Ultracentrifugarea în gradient de sucroză furnizează informații despre formele moleculare ale receptorilor, din date de viteza de sedimentare ale proteinelor, în funcție de densitatea și masa moleculară. În mod uzual, întâi, citosolul este incubat cu ligand radiomarcat (steroid, de concentrație standard) cu și fără competitor
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
viteza de sedimentare ale proteinelor, în funcție de densitatea și masa moleculară. În mod uzual, întâi, citosolul este incubat cu ligand radiomarcat (steroid, de concentrație standard) cu și fără competitor, apoi este supus centrifugării în eprubete de centrifugă în care se realizează gradienți de soluție de sucroză (soluțiile de sucroză sunt medii de suspendare care nu influențează structura organitelor celulare și nu interferă cu funcțiile pe care acestea le au in vivo, cu proprietățile de vâscozitate și densitate adecvate aplicării centrifugării). După centrifugare
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]