614 matches
-
au fost identificate la nivelul endoteliului și țesutului subendotelial, în jurul celulelor musculare din tunica medie și adventiceal, în vasa vasorum și celulele conjunctive adiacente. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. 7.5.3.2. EXPRESIA MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ÎN BOALA VARICOASĂ - VARICE COMPLICATE -STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile pentru MMP-2 au fost negative în 3 din cele 5 cazuri investigate, la nivelul tuturor segmentelor recoltate (tabel 51
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și adventiceal, în vasa vasorum și celulele conjunctive adiacente. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. 7.5.3.2. EXPRESIA MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ÎN BOALA VARICOASĂ - VARICE COMPLICATE -STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile pentru MMP-2 au fost negative în 3 din cele 5 cazuri investigate, la nivelul tuturor segmentelor recoltate (tabel 51). Pozitivitate de intensitate scăzută și medie a fost prezentă în celelalte două cazuri, în capilarele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fiind medie. TIMP-1 a fost absent la nivel endotelial și prezent, cu intensitate crescută, în capilarele de neoformație intramurale, vasa vasorum și celulele adventiceale. Nu au fost observate diferențe majore de intensitate și localizare între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. Imaginile din figurile 160-167 ilustrează profilul MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 pentru sublotul 2. 7.5.4. DISCUȚII Perturbarea echilibrului între activitatea MMPs și TIMPs a fost propusă ca mecanism pentru acumularea matricei extracelulare, în venele varicoase
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
varicos gambier și venele perforante. Imaginile din figurile 160-167 ilustrează profilul MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 pentru sublotul 2. 7.5.4. DISCUȚII Perturbarea echilibrului între activitatea MMPs și TIMPs a fost propusă ca mecanism pentru acumularea matricei extracelulare, în venele varicoase (Woodside et al., 2003). Familia MMPs include până în prezent 26 de enzime, fiind identificate 24 din genele lor codificante (Li et al., 2000, Visse, Nagase, 2003). Pe baza specificității substratului, a similarității de secvențe și a organizării domeniilor, MMP sunt
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
TIMP-2 inhibă activitatea MMP, cu excepția MMP-9 (Folgueras et al., 2004) și a pro-MMP-2. TIMP-2 este co-exprimat constitutiv cu MMP-2 (Richards, Agro, 1994, Borden, Heller, 1997). Trecerea în revistă a literaturii de specialitate, axată pe studiul MMPs și TIMPs în boala varicoasă, a permis o evaluare a rezultatelor obținute de grupuri de cercetători interesați de acest subiect. Trebuie menționat faptul că există foarte puține studii axate pe investigații imunohistochimice, iar rezultatele sunt controversate. Sunt raportate nivele MMP-1 și TIMP-1 crescute, precum și nivele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
MMP-1 și TIMP-1 crescute, precum și nivele MMP-2 scăzute la nivelul joncțiunii safeno-femurale în comparație cu venele control (Parra et al, 1998). Sunt demonstrate diferențe regionale în componentele matricei extracelulare și în activitatea MMP1 și MMP-13, între segmentele proximale și distale ale venelor varicoase (Shireman et al., 1996, Gillespie et al., 2002). Alte diferențe au fost obținute între distribuția MMP-1 și MMP-9 (Woodside et al, 2003), venele normale și cele varicoase exprimând ambele MMPs la nivelul celulelor endoteliale, celulelor musculare netede și fibroblastelor, dar
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și în activitatea MMP1 și MMP-13, între segmentele proximale și distale ale venelor varicoase (Shireman et al., 1996, Gillespie et al., 2002). Alte diferențe au fost obținute între distribuția MMP-1 și MMP-9 (Woodside et al, 2003), venele normale și cele varicoase exprimând ambele MMPs la nivelul celulelor endoteliale, celulelor musculare netede și fibroblastelor, dar reacția endotelială la nivelul microvaselor adventiceale, în venele normale, fiind mai puternică, sub raport calitativ și cantitativ. Activatorii plasminogenului par a juca un rol important în activarea
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
dar reacția endotelială la nivelul microvaselor adventiceale, în venele normale, fiind mai puternică, sub raport calitativ și cantitativ. Activatorii plasminogenului par a juca un rol important în activarea MMPs, ceea ce duce la fibroză la nivelul peretelui venos și formarea dilataților varicoase; aceste date necesită însă studii suplimentare pentru confirmare (Shireman et al., 1996, Badier Commander et al., 2000, Kosugi et al., 2003). Studii asupra stadiilor avansate ale bolii varicoase, complicate cu ulcer, relevă că MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 au avut nivele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
MMPs, ceea ce duce la fibroză la nivelul peretelui venos și formarea dilataților varicoase; aceste date necesită însă studii suplimentare pentru confirmare (Shireman et al., 1996, Badier Commander et al., 2000, Kosugi et al., 2003). Studii asupra stadiilor avansate ale bolii varicoase, complicate cu ulcer, relevă că MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 au avut nivele crescute în exudatul pacienților cu ulcer venos activ față de cei cu plăgi traumatice (Wysocki et al, 1993, Bullen et al 1995, Weckroth et al, 1996). Analiza biopsiilor de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
et al., 1996), cu rezultate care raportează nivele scăzute ale MMPs în regiunea inferioară (proximală), față de regiunea superioară (distală). Spre deosebire de aceste rezultate, datele noastre susțin absența unor diferențe majore în profilului MMPs și TIMPs între crosă, vena safenă internă, pachetul varicos gambier și venele perforante. Modificările similare în profilul MMPs și TIMPs, în diferite segmente, indică afectarea completă a sistemului venos, care poate fi corelată cu predispoziția genetică. În pofida diferențelor existente între diferitele studii, este cert că alterările în producția MMPs
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
2000, Bennett, 1999, Intengan, Schiffrin, 2001), dar și patologice - fiind o trăsătură a remodelării peretelui vascular în ateroscleroză, boli inflamatorii sau anevrisme (Lopez-Candel et al., 1997, Walsh et al., 2000, Bennett, 1999). Dovezi recente sugerează că defectele peretelui în venele varicoase, prin înlocuirea treptată a componentelor normale, este asociată cu dezechibrul procesului apoptotic (Ascher et al., 2000, Ascher et al., 2001, Bujan et al., 2000, Urbanek et al., 2004, Ducasse et al., 2005). Apoptoza a fost analizată la nivelul populațiilor celulare
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
indicând că modificările celulelor musculare netede, în context apoptotic, sunt importante pentru arhitectura și tonusul venos. Trecerea în revistă a literaturii dedicate acestui subiect relevă însă faptul că sunt puține date despre rolul morții celulare programate în leziunile peretelui venei varicoase. Pornind de la datele existente în literatură, obiectivul urmărit a fost reprezentat de investigarea activității apoptotice la nivelul celulelor musculare netede din tunica medie a peretelui venos. Trebuie menționat faptul că am considerat relevantă exclusiv analiza profilului pro apoptotic, în condițiile
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
musculare netede din tunica medie a peretelui venos. Trebuie menționat faptul că am considerat relevantă exclusiv analiza profilului pro apoptotic, în condițiile în care fluxul principal de publicații nu raportează diferențe între profilul anti-apoptotic al venelor normale și al celor varicoase. 7.6.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Pentru evaluarea expresiei Bax am utilizat un scor semicantitativ, adaptat după scoruri operaționale în literatura dedicată patologiei tumorale, pentru analiza valorii prognostice a unor biomarkeri (Zlobec et al., 2007b). În raport de intensitatea de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în 3 clase: intensitate slabă (+), intensitate moderată (++) și intensitate puternică (+++). Cazurile pentru care reacția imunohistochimică a fost absentă (în condițiile existenței unui control pozitiv) au fost considerate negative. 7.6.3. REZULTATE 7.6.3.1. EXPRESIA BAX ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2-3 Reacțiile imunohistochimice pentru Bax (tabelul 52) au fost pozitive, la nivelul tuturor segmentelor recoltate, în 7 din cele 8 cazuri investigate. Un caz a prezentat reacție imunohistochimice Bax negativă. Intensitatea reacției, apreciată pentru celulele musculare
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
cele 8 cazuri investigate. Un caz a prezentat reacție imunohistochimice Bax negativă. Intensitatea reacției, apreciată pentru celulele musculare din tunica medie, a fost crescută în 3 cazuri, și moderată în 4 cazuri. 7.6.3.2. EXPRESIA BAX ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Reacțiile imunohistochimice pentru Bax (tabelul 53) au fost negative, la nivelul tuturor segmentelor recoltate, în 4 din cele 5 cazuri investigate. Un singur caz a prezentat reacție imunohistochimică pozitivă, de intensitate scăzută, la nivelul celulelor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
Mayr et al., 2002). Investigațiile asupra activității apoptozice în leziunile aterosclerotice avansate, în fragmente ale arterelor carotidiene, coronariene și renale, relevă apoptoză crescută, pe calea intrinsecă, incluzând Bax (Saxena et al. 2002). Rezultatele raportate în literatură, vizând relația apoptoză - boală varicoasă, sunt puține și controversate. Prezența expresiei Bax scăzute, în paralel cu expresia Bcl 2/Bcl-x crescută și, consecutiv, numărul mai mic de celule apoptotice în tunica medie a venelor varicoase, comparativ cu venele normale, pledează pentru ipoteza conform căreia procesul
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al. 2002). Rezultatele raportate în literatură, vizând relația apoptoză - boală varicoasă, sunt puține și controversate. Prezența expresiei Bax scăzute, în paralel cu expresia Bcl 2/Bcl-x crescută și, consecutiv, numărul mai mic de celule apoptotice în tunica medie a venelor varicoase, comparativ cu venele normale, pledează pentru ipoteza conform căreia procesul morții programate a celulelor este inhibat în venele varicoase (Ascher et al., 2000). Alte date relevă fie o activitate apoptotică intensă în media venelor varicoase (Bujan et al., 2000), posibil
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în paralel cu expresia Bcl 2/Bcl-x crescută și, consecutiv, numărul mai mic de celule apoptotice în tunica medie a venelor varicoase, comparativ cu venele normale, pledează pentru ipoteza conform căreia procesul morții programate a celulelor este inhibat în venele varicoase (Ascher et al., 2000). Alte date relevă fie o activitate apoptotică intensă în media venelor varicoase (Bujan et al., 2000), posibil limitată la segmentele distale, fără afectarea segmentelor proximale (Urbanek et al., 2004), fie o scădere statistic semnificativă a indexului
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în tunica medie a venelor varicoase, comparativ cu venele normale, pledează pentru ipoteza conform căreia procesul morții programate a celulelor este inhibat în venele varicoase (Ascher et al., 2000). Alte date relevă fie o activitate apoptotică intensă în media venelor varicoase (Bujan et al., 2000), posibil limitată la segmentele distale, fără afectarea segmentelor proximale (Urbanek et al., 2004), fie o scădere statistic semnificativă a indexului apoptotic cuantificat în stratul adventiceal al venelor varicoase, comparativ cu venele de control, și absența diferențelor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fie o activitate apoptotică intensă în media venelor varicoase (Bujan et al., 2000), posibil limitată la segmentele distale, fără afectarea segmentelor proximale (Urbanek et al., 2004), fie o scădere statistic semnificativă a indexului apoptotic cuantificat în stratul adventiceal al venelor varicoase, comparativ cu venele de control, și absența diferențelor la nivelul mediei (Ascher et al., 2001). Neconcordanțele ar putea fi datorate sensibilității anticorpilor folosiți pentru investigația imunohistochimică. Rezultatele personale se individualizează, în contextul datelor din literatură, prin două elemente distincte, legate
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
încadrate în categorii diferite de diagnostic, în conformitate cu clasificarea CEAP (varice simple versus varice complicate). Atrage atenția faptul că activitatea pro-apoptotică, în condițiile în care a fost identificată, a avut un caracter constant la nivelul crosei, al venei safene, al pachetului varicos și al venelor perforante. Uniformitatea reacției imunohistochimice pentru Bax sugerează că modificările tisulare, celulare și moleculare apar și se dezvoltă concomitent de-a lungul unui traiect venos, fără a fi influențate - în mod pozitiv sau negativ, cu reflectare în gradul
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
concomitent de-a lungul unui traiect venos, fără a fi influențate - în mod pozitiv sau negativ, cu reflectare în gradul lor de severitate - de factorul anatomic și, implicit, de încărcarea hemodinamică. Această observație susține implicarea factorului genetic în patogenia bolii varicoase. Mai mult, sub raport clinic, constatările noastre impun ca abordarea terapeutică să aibă în vedere întotdeauna sistemul venos ca ansamblu, o leziune decelabilă clinic/ecografic într-un anumit teritoriu semnalând că procesul patogenic, odată declanșat, acționează și în teritorii care
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
prezent, cu intensitate crescută și medie) și, respectiv, complicate (în ansamblu absent) a evidențiat faptul că activitatea pro-apoptotică scade odată cu progresia bolii, echilibrul balanței apoptozei fiind perturbat. Consecutiv, aceste rezultate susțin ipoteza inhibării procesului de moarte celulară programată în boala varicoasă, ca verigă de legătură spre transformarea de tip fibros. Culturile celulare din venele varicoase au demonstrat că principalele componente ale peretelui venos, și anume celulele musculare netede localizate în medie, își modifică, prin schimbări ale ciclului celular, fenotipul contractil normal
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
faptul că activitatea pro-apoptotică scade odată cu progresia bolii, echilibrul balanței apoptozei fiind perturbat. Consecutiv, aceste rezultate susțin ipoteza inhibării procesului de moarte celulară programată în boala varicoasă, ca verigă de legătură spre transformarea de tip fibros. Culturile celulare din venele varicoase au demonstrat că principalele componente ale peretelui venos, și anume celulele musculare netede localizate în medie, își modifică, prin schimbări ale ciclului celular, fenotipul contractil normal în fenotip secretor (Jurokova et al., 1982). Acest fapt conduce la o degenerare de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
1982). Acest fapt conduce la o degenerare de tip fibros, caracterizată prin dezorganizarea arhitecturii și distribuției fibrelor de colagen (mai numeroase în medie și adventice) și elastice (mai puțin numeroase, ca rezultat al degradării) și pierderii proprietăților elastice ale venelor varicoase (Kockx et al., 1998, Ascher et al., 2001). Modificările morfologice sunt asociate cu dereglarea apoptozei în tunica medie (Ducasse et al., 2005). Deși nu au fost identificate diferențe semnificative pentru Bcl-x și Bcl-2, la nivelul venelor varicoase și, respectiv, normale
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]