646 matches
-
unor factori de creștere (PDGF, VEGF), care determină activarea leucocitară. Fibroblastele, monocitele și mastocitele sunt recrutate la nivelul zonelor tegumentare corespondente teritoriilor varicoase, reglând reparația și remodelarea tisulară (Pappas et al., 1997). La nivelul tegumentelor gambei și coapsei din teritoriile varicoase, datele publicate indică o populație celulară mastocitară de două până la patru ori mai mare la pacienții cu varice stadiul CEAP 4 și 5, comparativ cu subiecții control (Shields et al., 1994, Pappas et al, 1997). Fibroblastele acționează prin stimularea producerii
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
dermice, prin marcaj imunohistochimic, constituie o dovadă concretă a rolului acestui factor de creștere în cascada modificărilor moleculare, celulare și tisulare care conduc la instalarea leziunilor specifice insuficienței venoase cronice. Ulterior, cercetările au fost orientate asupra mastocitelor prezente în venele varicoase, în scopul de a stabili care sunt factorii care stimulează localizarea lor în peretele vascular, și care este mecanismul prin care sunt implicate în dezvoltarea leziunilor histologice. Deși întrebările asupra mecanismului patogen care determină insuficiența venoasă sunt încă fără răspuns
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
dezvoltarea leziunilor histologice. Deși întrebările asupra mecanismului patogen care determină insuficiența venoasă sunt încă fără răspuns, câteva studii calitative și cantitative au confirmat că trăsăturile histologice ale incompetenței valvulare sunt în mod clar asociate cu prezența mastocitelor în peretele venelor varicoase. Conform datelor din literatură (Prokopová et al., 1998, Haviarová et al., 2002, Sayer, Smith, 2004, Pascual et al., 2007), mastocitele sunt localizate predominant în adventice, frecvent în vecinătatea vasa vasorum, rar fiind prezente în partea externă a tunicii medii. Există
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
2004, Pascual et al., 2007), mastocitele sunt localizate predominant în adventice, frecvent în vecinătatea vasa vasorum, rar fiind prezente în partea externă a tunicii medii. Există diferențe (semnificative sau nu, din punct de vedere statistic) între numărul mastocitelor din venele varicoase și venele normale, identificate deopotrivă la persoane tinere și la vârstnici. Rezultatele relativ diferite în raport cu semnificația statistică a diferențelor numerice înregistrate pot fi explicate prin detaliile legate de eșantionare - trebuie menționat faptul că se recomandă ca numărul de eșantioane (fragmente
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
trebuie să fie mare (Haviarová et al., 2002), pentru a putea cuantifica numărul real al mastocitelor prezente și, consecutiv, a putea demonstra implicarea lor în patogenie. Pornind de la asocierea mastocite - chimaze - TGF beta 1 studiată la nivel dermic în boala varicoasă, un studiu recent (Pascual et al., 2007) a analizat expresia TGF-beta 1 în vene, în relație cu mastocitele. Mastocitele au fost detectate în arii localizate aproape de sau în jurul vasa vasorum ale adventicei, în corespondență cu ariile care au arătat nivele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
eliberarea de substanțe vasoactive. În mod concret, deși modalitatea de cuantificare a fost diferită, valorile obținute sunt relativ comparabile cu raportările din literatură (valoare medie 9 mastocite/5,5 mm2 în venele normale, 24 mastocite/5,5 mm2 în venele varicoase (Sayer, Smith, 2004), densitatea medie 0,86 mastocite/mm2 în venele varicoase, 1,23 mastocite/mm2 în venele normale (Haviarová et al., 2002)). Considerăm că demonstrarea diferențelor cantitative semnificative statistic, între stadiile evolutive ale bolii varicoase, constituie un element de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fost diferită, valorile obținute sunt relativ comparabile cu raportările din literatură (valoare medie 9 mastocite/5,5 mm2 în venele normale, 24 mastocite/5,5 mm2 în venele varicoase (Sayer, Smith, 2004), densitatea medie 0,86 mastocite/mm2 în venele varicoase, 1,23 mastocite/mm2 în venele normale (Haviarová et al., 2002)). Considerăm că demonstrarea diferențelor cantitative semnificative statistic, între stadiile evolutive ale bolii varicoase, constituie un element de originalitate al studiului doctoral, cu valoare la dezvoltarea stadiului actual al cunoașterii
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
5 mm2 în venele varicoase (Sayer, Smith, 2004), densitatea medie 0,86 mastocite/mm2 în venele varicoase, 1,23 mastocite/mm2 în venele normale (Haviarová et al., 2002)). Considerăm că demonstrarea diferențelor cantitative semnificative statistic, între stadiile evolutive ale bolii varicoase, constituie un element de originalitate al studiului doctoral, cu valoare la dezvoltarea stadiului actual al cunoașterii pentru insuficiența venoasă cronică. Identificarea populației mastocitare, extrem de bine reprezentată în venele varicoase, permite formularea unei ipoteze patogenice pentru boala varicoasă, în contextul proprietăților
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
că demonstrarea diferențelor cantitative semnificative statistic, între stadiile evolutive ale bolii varicoase, constituie un element de originalitate al studiului doctoral, cu valoare la dezvoltarea stadiului actual al cunoașterii pentru insuficiența venoasă cronică. Identificarea populației mastocitare, extrem de bine reprezentată în venele varicoase, permite formularea unei ipoteze patogenice pentru boala varicoasă, în contextul proprietăților funcționale ale acestor celule, datorate conținutului granular - care ar putea dezvolta capacitate autoimună, explicând astfel predispoziția individuală a unor subiecți pentru boala varicoasă. 7.8. EVALUAREA POPULAȚIEI LIMFOCITARE 7
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
evolutive ale bolii varicoase, constituie un element de originalitate al studiului doctoral, cu valoare la dezvoltarea stadiului actual al cunoașterii pentru insuficiența venoasă cronică. Identificarea populației mastocitare, extrem de bine reprezentată în venele varicoase, permite formularea unei ipoteze patogenice pentru boala varicoasă, în contextul proprietăților funcționale ale acestor celule, datorate conținutului granular - care ar putea dezvolta capacitate autoimună, explicând astfel predispoziția individuală a unor subiecți pentru boala varicoasă. 7.8. EVALUAREA POPULAȚIEI LIMFOCITARE 7.8.1. REPERE FUNDAMENTALE În fiziopatologia încă neelucidată
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
mastocitare, extrem de bine reprezentată în venele varicoase, permite formularea unei ipoteze patogenice pentru boala varicoasă, în contextul proprietăților funcționale ale acestor celule, datorate conținutului granular - care ar putea dezvolta capacitate autoimună, explicând astfel predispoziția individuală a unor subiecți pentru boala varicoasă. 7.8. EVALUAREA POPULAȚIEI LIMFOCITARE 7.8.1. REPERE FUNDAMENTALE În fiziopatologia încă neelucidată a bolii venoase cronice, prezența constantă a modificărilor inflamatorii a determinat concentrarea specialiștilor interesați de acest subiect asupra investigării procesului inflamator, ca și cauză patogenică majoră
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
a peretelui venos și a valvelor, cu rezultat în distrugerea peretelui și incompetență valvulară (Langer, Chavakis, 2009). Deși infiltratul inflamator conține și numeroase limfocite, despre evaluarea lor morfologică (ca și subtipuri celulare) și în relație cu funcționalitatea acestora, în boala varicoasă, există extrem de puține date în fluxul principal de publicații (Sayer, Smith, 2004). Recent, rezultatele unui studiu bazat pe determinarea subtipurilor limfocitare B și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
boala varicoasă, există extrem de puține date în fluxul principal de publicații (Sayer, Smith, 2004). Recent, rezultatele unui studiu bazat pe determinarea subtipurilor limfocitare B și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt expresia memoriei imunologice a limfocitelor (Ojdana et al., 2009). Pornind de la absența datelor din literatură referitoare la populațiile limfocitare prezente în venele varicoase, obicetivul urmărit a fost reprezentat de investigarea limfocitelor T4 helper și T8 supresor la nivelul venei
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt expresia memoriei imunologice a limfocitelor (Ojdana et al., 2009). Pornind de la absența datelor din literatură referitoare la populațiile limfocitare prezente în venele varicoase, obicetivul urmărit a fost reprezentat de investigarea limfocitelor T4 helper și T8 supresor la nivelul venei safene interne corespondente varicelor simple (stadiul CEAP 2-3) și, respectiv, complicate (stadiul CEAP 4-6), pentru a stabili un profil al expresiei subtipurilor limfocitare T
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
nivelul venei safene interne corespondente varicelor simple (stadiul CEAP 2-3) și, respectiv, complicate (stadiul CEAP 4-6), pentru a stabili un profil al expresiei subtipurilor limfocitare T și dacă există o corespondență între acestea și severitatea, respectiv progresia leziunilor specifice bolii varicoase. 7.8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
expresiei subtipurilor limfocitare T și dacă există o corespondență între acestea și severitatea, respectiv progresia leziunilor specifice bolii varicoase. 7.8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele venelor varicoase, preluând și adaptând o metodologie de cuantificare utilizată în analiza biomarkerilor prognostici specifici patologiei tumorale, inclusiv limfocitelor T asociate proliferărilor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele venelor varicoase, preluând și adaptând o metodologie de cuantificare utilizată în analiza biomarkerilor prognostici specifici patologiei tumorale, inclusiv limfocitelor T asociate proliferărilor tumorale (Zlobec et al., 2007a). Valoarea medie raportată pentru fiecare caz a rezultat ca urmare a cuantificării celulelor marcate imunohistochimic
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al., 2007a). Valoarea medie raportată pentru fiecare caz a rezultat ca urmare a cuantificării celulelor marcate imunohistochimic prezente în 5 câmpuri microscopice, la magnificație x 200. 7.8.3. REZULTATE 7.8.3.1. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE T ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2 3 Examenul calitativ a evidențiat prezența limfocitelor T4 și T8 la nivelul tunicii medii, cu localizare difuză în interiorul componentei colagenice care separă celulele musculare netede. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
colagenice care separă celulele musculare netede. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate, o valoare medie de 25,67 limfocite T4, și 10,60 limfocite T8 (tabel 55). 7.8.3.2. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Examenul calitativ a evidențiat aceeași distribuție a limfocitelor ca și varicele simple, și anume dispersate în interiorul cadrului colagenic prezent în tunica medie. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 5 cazuri analizate, o valoare medie
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
de 42,80 limfocite T4 și, respectiv, 18,56 limfocite T8 (tabelul 56). Analiza statistică a demonstrat diferențe semnificative statistice între limfocitele T4 și, respectiv, T8, în cadrul sublotului 2 (fig. 178). 7.8.3.3. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE VERSUS VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 2-3 VERSUS STADIUL CEAP 4-6 Analiza statistică a numărului mediu de limfocite T4, comparativ sublot 1 versus sublot 2, a relevat prezența de diferențe semnificative statistic (p = 0,0005) (fig. 179). Analiza statistică
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fig. 179). Analiza statistică a numărului mediu de limfocite T8, comparativ sublot 1 versus sublot 2, a relevat prezența de diferențe semnificative statistic (p = 0,03) (fig. 180). Imaginile următoare ilustrează prezența limfocitelor T4 și, respectiv, T8, la nivelul peretelui varicos (fig. 180-183). Fig. 180. Reacție imunohistochimică intens pozitivă evidențiind prezența limfocitelor T4 (IHC, Ac-CD4, x 20) Fig. 181. Reacție imunohistochimică intens pozitivă evidențiind prezența limfocitelor T8 (IHC, Ac CD8, x 20) 7.8.4. DISCUȚII Teoria inflamatorie câștigă teren în
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
cu memorie (Kalia et al., 2006). Trebuie însă subliniat faptul că numărul studiilor dedicate acestui subiect este foarte mic, iar metodologia de investigare se bazează în principal pe analiza populațiilor celulare în sângele periferic și în sângele recoltat din venele varicoase (Schmid Schonbein et al., 2001, Ojdana et al., 2009), existând, după cunoștința noastră, un singur raport care include date obținute printr-o analiză morfologică imunohistochimică (Sayer, Smith, 2004). Rezultatele pot fi interpretate în contextul răspunsului imun-inflamator existent la nivelul întregului
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în contextul răspunsului imun-inflamator existent la nivelul întregului organism, și care include și afectarea teritoriul venos. Astfel, un studiu foarte recent (Ojdana et al., 2009) demonstrează că în sângele periferic nu există o diferență semnificativă statistic între pacienții cu boală varicoasă și martor, în ceea ce privește numărul total de limfocite T CD4+ și CD8+, precum și subseturile particulare de limfocite T cu memorie. În timp, se constată o diferența semnificativă statistic între sângele periferic și sângele obținut de la nivelul venelor varicoase, pentru toate seturile
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
pacienții cu boală varicoasă și martor, în ceea ce privește numărul total de limfocite T CD4+ și CD8+, precum și subseturile particulare de limfocite T cu memorie. În timp, se constată o diferența semnificativă statistic între sângele periferic și sângele obținut de la nivelul venelor varicoase, pentru toate seturile și subseturile de celule T menționate anterior. Aceste rezultate au importante implicații în elucidarea statusului inflamator local și deschid perspectiva implicării celulelor T cu memorie imunologică în patogeneza bolii venoase cronice. Aceste date se corelează cu două
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
date se corelează cu două studii axate asupra morfologiei infiltratului inflamator (preponderent limfocitar) din valvulele venoase și din peretele venos (SchmidSchonbein et al., 2001, Sayer, Smith, 2004). Studiul nostru se individualizează în cadrul cercetărilor asupra infiltratului imun prezent în structura peretelui varicos prin două elemente: (i) evaluarea distinctă a limfocitelor T4 helper și T8 citotoxic; (ii) compararea rezultatelor cantitative (valoare medie limfocite T4, respectiv T8), corespondente venelor varicoase simple (stadiul CEAP 2-3) și venelor varicoase complicate (stadiul CEAP 4-6). Atragem atenția asupra
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]