KorAP: Find »[drukola/base=prepara & drukola/pos=verb]« with Poliqarp

<1 ...203 204 205 ...507 >

12,664 matches

Corola-website/Law/151504_a_152833

de Sudan B. Se prepară un frotiu din exudatul bacterian sau din țesutul în suspensie pe o lamă de microscop sau se prepară un frotiu dintr-o cultură de 48 de ore pe mediu YPGA sau SPA. (apendicele 1). Se prepară și frotiuri cu martori pozitivi din tulpina biovar 2/rasă 3 și, dacă se consideră necesar, un frotiu cu martor negativ dintr-o tulpina eterogena. Se lasă la uscat. Se trece rapid partea inferioară a lamei de câteva ori prin

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
tuberculului de cartof sau din vasele conducătoare ale tulpinii plantei de cartof sau tomata. Se efectuează o suspensie într-un volum mic de apă distilata sterilă sau un tampon fosfat de 500 mM. Se lasă 5-10 minute. 3.2. Se prepară o serie de diluții zecimale ale suspensiei, de exemplu, 1/10 și 1/100 sau mai multe dacă se consideră necesar. 3.3. Se transferă un volum standard de suspensie și de diluții pe un mediu nutritiv comun (NA, YPGA

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
Kovacs + Reducerea nitraților + ───────────��─────────────────────────────────── Utilizarea citratului + Creștere la 40°C - Creștere în 1% NaCl + Creștere în 2% NaCl - Arginina dihidrolaza - Lichefierea gelatinei - Hidroliza amidonului - Hidroliza esculinei - Producție de levan - Mediile și metodele se găsesc în Lelliott Stead (1987) Testul IF Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile-martor. Se prepară o serie de diluții duble de antiser. Se aplică procedura IF (secțiunea III pct. 2). Titrul IF al culturii trebuie să fie echivalent cu

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
NaCl - Arginina dihidrolaza - Lichefierea gelatinei - Hidroliza amidonului - Hidroliza esculinei - Producție de levan - Mediile și metodele se găsesc în Lelliott Stead (1987) Testul IF Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile-martor. Se prepară o serie de diluții duble de antiser. Se aplică procedura IF (secțiunea III pct. 2). Titrul IF al culturii trebuie să fie echivalent cu cel al controlului pozitiv. Testul ELISA Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
din cultura și din tulpina sau tulpinile-martor. Se prepară o serie de diluții duble de antiser. Se aplică procedura IF (secțiunea III pct. 2). Titrul IF al culturii trebuie să fie echivalent cu cel al controlului pozitiv. Testul ELISA Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile martor. Se aplică procedura ELISA (secțiunea III pct. 3). Valoarea ELISA a culturii trebuie să fie echivalentă cu cea a controlului pozitiv. Testul PCR Se prepară

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile martor. Se aplică procedura ELISA (secțiunea III pct. 3). Valoarea ELISA a culturii trebuie să fie echivalentă cu cea a controlului pozitiv. Testul PCR Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile martor. Se aplică procedura PCR (secțiunea III pct. 4). Produsul PCR al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
din tulpina sau tulpinile martor. Se aplică procedura PCR (secțiunea III pct. 4). Produsul PCR al culturii trebuie să aibă aceeași dimensiune și același profil al analizei enzimatice restrictive (REA) cu cel al controlului pozitiv. Hibridizare fluorescenta insitu (FISH) Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina sau tulpinile-martor. Se aplică procedura FISH (van Beuningen et al, 1995) cu primerii OLI-1 PCR (Seal et al, 1993). Cultură trebuie să prezinte aceeași reacție că și controlul

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
1989) Repetarea secvențelor PCR [REP-, ERIC- BOX-PCR (Louws et al, 1995; Smith et al, 1995)] 4.3. Testul de patogenitate Acesta este un test pentru confirmarea diagnosticului de Ralstonia solanacearum și pentru stabilirea virulentei culturilor identificate de Ralstonia solanacearum. Se prepară un inocul de 10^6 celule/ml din cultura și din tulpina martor pozitiv. Se inoculează 5-10 plante de tomate sau vinete, preferabil la nivelul celei de a treia frunze adevărate sau mai bătrâne (secțiunea III pct. 6.). Se incubează

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
godeuri de minim 6 mm diametru. Pe fiecare lama de testare se include câte un control cu FITC conjugat. Testul ar trebui repetat cu includerea unui control cu PBS, daca este observată o celulă pozitivă în controlul cu FITC. Se prepară separat lame cu control pozitiv cu o suspensie de 10^6 celule/ml dintr-o tulpina corespunzătoare de rasă/biovar de Ralstonia solanacearum. Se utilizează câte o lamă la fiecare set de teste. 2.1. Lamele de testare se prepară

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
prepară separat lame cu control pozitiv cu o suspensie de 10^6 celule/ml dintr-o tulpina corespunzătoare de rasă/biovar de Ralstonia solanacearum. Se utilizează câte o lamă la fiecare set de teste. 2.1. Lamele de testare se prepară prin una dintre următoarele proceduri: (i) pentru depozitele cu amidon relativ puțin: Se pipeteaza un volum standard (15 мl este adecvat unui godeu de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru godeuri mai mari) din depozitul resuspendat într-un șir

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
2. 2.2. Se lasă picăturile să se usuce. Celulele bacteriene se fixează pe lama prin încălzire, flambare prin flacăra sau cu 95% etanol. 2.3. Procedura IF (i) În conformitate cu pregătirea lamei de testare de la pct. 2.1 (i): se prepară un set de diluții duble ale antiserului în tampon IF (apendicele 3): 1/4 din titru (Ț/4), 1/2 din titru (Ț/2), titru (Ț) și de două ori titrul (2T). (îi) În conformitate cu pregătirea lamei de testare de la pct.

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
duble ale antiserului în tampon IF (apendicele 3): 1/4 din titru (Ț/4), 1/2 din titru (Ț/2), titru (Ț) și de două ori titrul (2T). (îi) În conformitate cu pregătirea lamei de testare de la pct. 2.1 (îi): se prepară diluția de lucru (working dilution) a antiserului în tampon IF. Diluția de lucru este diluția cu antiser cu specificitate optimă și are de obicei jumătate din titru. Figură 1 Notă C.T.C.E. PIATRA-NEAMȚ -------------------------- Figură se găsește în Monitorul Oficial al României

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
C sau peste noapte la 4°C. 3.4. Se îndepărtează extractele din godeuri. Se spală godeurile de trei ori cu PBS - Tween (apendicele 5), lăsându-se ultima soluție de spălare cel putin 5 minute în godeuri 3.5. Se prepară diluția corespunzătoare a antiserului de Ralstonia solanacearum în tampon de blocare (apendicele 5). Se pipeteaza 100 мl diluție de antiser în godeuri. Se incubează timp de o oră la 37°C. 3.6. Se îndepărtează antiserul din godeuri. Se spală

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
în tampon de blocare (apendicele 5). Se pipeteaza 100 мl diluție de antiser în godeuri. Se incubează timp de o oră la 37°C. 3.6. Se îndepărtează antiserul din godeuri. Se spală conform pct. 3.4. 3.7. Se prepară diluția corespunzătoare de conjugat ce conține fosfataza alcalina în tampon de blocare. Se aplică 100 мl de diluție conjugata în godeuri. Se incubează timp de o oră la 37°C. 3.8. Se îndepărtează conjugatul din godeuri. Godeurile se spală

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
de blocare. Se aplică 100 мl de diluție conjugata în godeuri. Se incubează timp de o oră la 37°C. 3.8. Se îndepărtează conjugatul din godeuri. Godeurile se spală conform pct. 3.4 și 3.6. 3.9. Se prepară soluția de substrat ce conține fosfataza alcalina (apendicele 5). Se pipeteaza 100 мl în godeuri. Se incubează timp de 30 de minute până la o oră, în întuneric, la temperatura camerei. 3.10. Se citește absorbanta la 409 nm. Interpretarea testului

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
optică (DO) a probei este 2 x DO a controlului negativ. 4. Testul PCR Bazat Seal et al., 1993 Notă: În timpul tuturor etapelor de pregătire a probelor și a altor manipulări ce implică PCR trebuie folosite pipete cu filtru. Se prepară o suspensie de 10^6 celule/ml dintr-o tulpina din rasa 3/biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează în mod identic cu proba sau probele. 4.1. Se pipeteaza 100 мl din depozitul resuspendat într-

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
într-o microfiola conținând 10 мl de 0,5 M de NaOH. Se amestecă întorcându-se în mod repetat microfiola. 4.2. Se încălzește timp de 4 minute la 100°C. Se pune imediat microfiola la gheață. 4.3. Se prepară cel puțin două diluții decimale, de exemplu, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, în apă distilata sterilă sau ultrapura (AUP) 4.4. Se prepară amestecul de reacție PCR (apendicele 6) într-o fiola sterilă

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
C. Se pune imediat microfiola la gheață. 4.3. Se prepară cel puțin două diluții decimale, de exemplu, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, în apă distilata sterilă sau ultrapura (AUP) 4.4. Se prepară amestecul de reacție PCR (apendicele 6) într-o fiola sterilă, prin adăugarea următoarelor componente în ordinea următoare: Pentru mai multe reacții: Se calculează cantitatea fiecărui component pentru numărul de reatii necesare. Se amestecă aceste componente și se transferă 45 мl

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
se efectuează după o perioadă mai mare de timp, ele se stochează la -18°C. 4.6. Analiza produsului PCR Fragmentele PCR se detectează prin electroforeza în gel de agaroza și colorare cu bromura de etidiu. 4.6.1. Se prepară un gel corespunzător de agaroza aducându-se încet agaroza la fierbere, în tampon de triacetat-electroforeza (TAE). 4.6.2. Se răcește agaroza topită la 50-60°C, se toarnă în cuva electroforezei și se introduce pieptenul. Soluția se lasă să se

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
amplificat este identică cu tulpina de control pozitiv de Ralstonia solanacearum. 5. Testul de însămânțare pe medii selective În baza Elphinstone et al., 1996 5.1. Testul se efectuează printr-o tehnică corespunzătoare de însămânțare a diluțiilor, astfel: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale, 1/10 мl 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din depozitul resuspendat în tamponul de depozitare. Se pipeteaza un volum standard măsurat (50-100 мl) din depozitul resuspendat din fiecare diluție pe un

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
prevăzut la pct. 4. 8. Testul de patogenitate A se vedea secțiunea ÎI pct. 4.3. Apendice 1 Medii nutritive pentru izolarea și cultură de Ralstonia solanacearum Agar nutritiv (AN) Agar nutritiv (Difco) 23 g Apă distilata 1 l Se prepară câte 1/2 l de mediu în flacoane de 1 l. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavare la 121°C, timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu drojdie - peptona - glucoză - agar (YPGA

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu drojdie - peptona - glucoză - agar (YPGA) Extract de levura (Difco) 5 g Bacto-peptona (Difco) 5 g D(+) glucoză (monohidrat) 10 g Bacto-geloza (Difco) 15 g Apă distilata 1 l Se prepară câte 1/2 l de mediu în flacoane de 1 l. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavare la 121°C, timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediu zaharoza - peptona - agar (SPA) Zaharoza

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
C. Se toarnă pe plăci. Mediu zaharoza - peptona - agar (SPA) Zaharoza 20 g Peptona 5 g K(2)HPO(4) 0,5 g MgSO(4) 7H(2)O 0,25 g Bacto-geloza (Difco) 15 g Apă distilata 1 l �� Se prepară câte 1/2 l de mediu în flacoane de 1 l. Se dizolvă ingredientele. Se ajustează la pH 7,2-7,4, daca este necesar. Se sterilizează prin autoclavare la 121°C, timp de 15 minute. Se răcește la 50°C.

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
121°C, timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se toarnă pe plăci. Mediul de tetrazoliu Kelman Acizi casaminici (Difco) 1 g Bacto-peptona (Difco) 10 g Dextroza 5 g Bacto-geloza (Difco) 15 g Apă distilata 1 l Se prepară câte 1/2 l de mediu în flacoane de 1 l. Se dizolvă ingredientele. Se sterilizează prin autoclavare la 121°C, timp de 15 minute. Se răcește la 50°C. Se adaugă o soluție apoasa sterilizata prin filtrare de clorura

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]
Engelbrecht, 1994 modificat de Elphinstone et al., 1996) dar se elimină geloza și sărurile de tetrazoliu. Mediu de bază Acizi casaminici (Difco) - 1 g Bacto-peptona (Difco) - 10 g Glicerol - 5 ml Geloza (Difco) - 15 g �� Apă distilata - 1 l Se prepară 1/2 l de medru în flacoane de 1 l. Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se ajustează pH-ul, daca este necesar, la 6,5 înainte de autoclavare. Ralstonia solanacearum nu se dezvoltă bine într-un mediu cu

ANEXE din 19 decembrie 2002 privind controlul bacteriei Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.*). In: EUR-Lex (2002) [Corola-website/Law/151504_a_152833]