3,282 matches
-
atunci va trebui aleasă o diluție mai mică a serului. ... d) Concentrația finală a agarului trebuie să fie de 0,8%, iar cea a serurilor de 5% și, respectiv, 10%. ... e) Se notează diametrele măsurate în următorul sistem de coordonate. Diluția de lucru este cea la care s-a înregistrat același diametru pentru antigenul de testat și antigenul de referință. ... D. Bluetongue (febră catarala) 1. Testul ELISA de blocare sau competitiv se va efectua conform următorului protocol: a) Testul ELISA competitiv
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Testul ELISA competitiv care utilizează anticorpul monoclonal 3-17-A3 este capabil să detecteze anticorpii tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului bluetongue (BTV). ... b) Principiul testului constă în întreruperea reacției dintre antigenul BTV și un anticorp monoclonal specific de grup (3-17-A3) prin adăugarea diluțiilor de ser de testare. Anticorpii de BTV prezenți în serul de testare blochează reactivitatea anticorpului monoclonal (ACM) și determină reducerea dezvoltării culorii scontate la adăugarea substratului enzimatic. ... 1.1. Materiale și reactivi: 1. plăci de microtitru cu suprafața plata; 2
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
și cuprinde antigen BTV, anticorp monoclonal și conjugat. Acesta reprezintă un control negativ. Media valorilor densității optice ale acestei linii de control reprezintă valoarea de inhibiție 0%. 1.4. Control pozitiv: linia 3A-H este controlul pozitiv. Acesta cuprinde antigen BTV, diluții de antiser pozitiv BTV, ACM și conjugat și este inclus pentru a indica faptul că testul este efectuat corespunzător și că trebuie să se obțină niveluri similare de inhibiție de la un test la altul. 1.5. Serurile de testare: în
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
a indica faptul că testul este efectuat corespunzător și că trebuie să se obțină niveluri similare de inhibiție de la un test la altul. 1.5. Serurile de testare: în schema testului prezentată mai sus 18 seruri pot fi testate în diluții de 1/2, 1/4, 1/8 și 1/16. Acest lucru oferă informații asupra titrului de anticorpi din serurile de testare. Gamă de diluții poate fi lărgita pentru a obtine titruri finale de diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Serurile de testare: în schema testului prezentată mai sus 18 seruri pot fi testate în diluții de 1/2, 1/4, 1/8 și 1/16. Acest lucru oferă informații asupra titrului de anticorpi din serurile de testare. Gamă de diluții poate fi lărgita pentru a obtine titruri finale de diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere serologica la scară largă, serurile pot fi testate într-o singură diluție (1/4) sau în două diluții 1/2 și 1/4 că test
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
seruri pot fi testate în diluții de 1/2, 1/4, 1/8 și 1/16. Acest lucru oferă informații asupra titrului de anticorpi din serurile de testare. Gamă de diluții poate fi lărgita pentru a obtine titruri finale de diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere serologica la scară largă, serurile pot fi testate într-o singură diluție (1/4) sau în două diluții 1/2 și 1/4 că test de control rapid. 1.6. Procedura: 1. Se diluează antigen
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
lucru oferă informații asupra titrului de anticorpi din serurile de testare. Gamă de diluții poate fi lărgita pentru a obtine titruri finale de diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere serologica la scară largă, serurile pot fi testate într-o singură diluție (1/4) sau în două diluții 1/2 și 1/4 că test de control rapid. 1.6. Procedura: 1. Se diluează antigen BTV la concentrație pretitrata în PBS, se agită ușor pentru a dispersa virusul agregat (dacă agitatorul nu
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
anticorpi din serurile de testare. Gamă de diluții poate fi lărgita pentru a obtine titruri finale de diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere serologica la scară largă, serurile pot fi testate într-o singură diluție (1/4) sau în două diluții 1/2 și 1/4 că test de control rapid. 1.6. Procedura: 1. Se diluează antigen BTV la concentrație pretitrata în PBS, se agită ușor pentru a dispersa virusul agregat (dacă agitatorul nu este disponibil, se pipeteaza puternic) și
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
în godeurile corespunzătoare și se diluează pe suprafața plăcii cu ajutorul unei pipete cu multiple canale. Nu se adaugă ser la controlul orb sau controlul acm. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testare se adaugă acm în tamponul de blocare la diluție pretitrata și se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii, cu excepția controlului orb. 5. Se incubează la temperatura de 37°C timp de 60 de minute într-un agitator orbital. Se spală de 3 ori și cu PBS și se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de testare sunt exprimate că valori inhibitoare procentuale, folosindu-se următoarea formulă: ... OD în prezența serului de testare Valoarea de inhibiție procentuala = 100 x ──────────────────────────────────── OD în absență serului de testare b) Valorile de inhibiție mai mari de 40% la o diluție de ser de 1/4 sunt considerate pozitive. Citirea vizuală este posibilă având în vedere că inhibiția de 40% este cea mai mica valoare vizibilă. ... 1.8. Prepararea antigenului BTV ELISA: 1. Se spală de trei ori 10 roux de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
Se înlătura supernatantul, se drenează tuburile și se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de microtitru într-o serie de două diluții 50 æl
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de microtitru într-o serie de două diluții 50 æl/godeu cu ajutorul unei pipete cu multiple canale
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de microtitru într-o serie de două diluții 50 æl/godeu cu ajutorul unei pipete cu multiple canale. 2. Se incubează timp de o oră la temperatura de 37°C într-un agitator orbital. 3. Se spală plăcile de 3 ori cu PBS. 4. Se adaugă 50 æl de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
37°C timp de 1-1 1/2 h. Testul este citit într-o lumină slabă, pe fond întunecat, folosind o magnitudine între 60x și 100x. 1.4. Interpretare: rezultatul este negativ dacă aglutinarea este mai mică de 50% la o diluție de 1/50. G. Rinotraheita bovina infecțioasă/vulvovaginita pustulara infecțioasă 1. Testul de neutralizare a serului se va efectua conform următorului protocol: 1.1. Ser: toate serurile sunt inactivate la temperatura de 56°C timp de 30 de minute înainte de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
antiseruri de referință. ... 1.4. Interpretare: rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului folosit la testare sunt înregistrate după 3-6 zile de incubare la temperatura de 37°C. Titrurile serului sunt considerate negative dacă nu există nici o neutralizare la o diluție de 1/2 (ser nediluat). H. Diaree virală bovina (BVD) 1. Testul de izolare a virusului va fi efectuat conform următorului protocol: a) Materialul de testare și metodele de detectare: se folosesc suspensii de ser, porțiuni retractile de coagul sau
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de vițel sau testicul de vițel fără virus BVD endogen. Probe de ser: serul de testare și celulele de cultură tisulara sunt plasate în culturi în tuburi acoperite cu dop, în godeuri de plăci de microtitru sau alte containere, astfel încât diluția finală să fie 10%. ... d) Învelișul inflamator și cheagurile de sânge: probele sunt adăugate la culturi celulare monostratificate, confluente și lăsate timp de o oră la temperatura de 37°C, apoi culturile sunt spălate și acoperite de mediu de cultură
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
virusul BVD/MD necitopatic, accidental contaminante. ... d) Virusul de testare, care poate fi orice tulpina corespunzătoare de referință citopatica (de exemplu: tulpina NADL), este folosit la o concentrație de 100 doze infecțioase de cultură celulară medie la 0,025 ml. Diluții de seruri inactivate sunt amestecate cu volume egale de suspensie virală (0,025 ml) și amestecurile de ser-virus sunt incubate timp de o oră la temperatura de 37° înainte de a fi ad��ugate volume similare de suspensie celulară. Celulele sunt
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
cunoscut, controlul celulelor, controlul toxicității serului, controlul mediului și titrul virusului de la care se calculează cantitatea reală a virusului conținuta în test. ... d) Interpretare: godeurile care prezintă CPE sunt considerate infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate ca reprezentând reciprocă diluției finale de ser prezent în amestecurile de ser-virus la punctul final de 50% estimat după metodă Spearman-Karber. e) Testele sunt considerate valide dacă cantitatea reală de virus folosită la godeu este cuprinsă între 101,5 și 102,5 TCID50 și
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
concentrație optimă predeterminata într-un tampon de carbonat/bicarbonat cu pH 9,6. Se prepară antigeni din tulpinile de virus selectate, cultivate pe celule monocelulare BHK-21. Se utilizează supernatanți nepurificați, pretitrati conform protocolului, dar fără ser pentru a da o diluție, care după adăugarea unui volum egal de PBST (lichid fiziologic tamponat cu fosfat, conținând 0,05% Tween-20 și indicator roșu fenol) ar da o intensitate optică între 1,2 și 1,5. Virusurile pot fi folosite inactivate. PBST este folosit
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
plăci cu multe godeuri și cu fundul în formă de U (plăci purtătoare). Se adaugă în fiecare godeu 50 æl dintr-o doză constantă de antigen și se lasă amestecurile peste noapte la temperatura de 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția serica inițială la 1/8. 3. Se spală plăcile ELISA cu PBST de 5 ori. 4. Se transferă apoi 50 æl din amestecurile ser-antigen din plăcile purtătoare în plăcile ELISA acoperite cu ser de iepure și se incubează la temperatura
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
efectuează citirea spectrofotometrica a plăcilor la 492 nm cu ajutorul unui cititor ELISA, cuplat la un microordinator. c) Controale: pentru fiecare antigen utilizat 40 de godeuri nu conțin ser, ci antigen diluat într-un PBST: ... 1. o serie dublă de două diluții de antiser bovin omolog de referință; 2. o serie dublă de două diluții de ser bovin negativ. d) Interpretare: titrurile anticorpilor sunt exprimate ca reprezentând diluția finală a serurilor de testat, dând 50% din valoarea medie OD înregistrată în godeurile
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
la un microordinator. c) Controale: pentru fiecare antigen utilizat 40 de godeuri nu conțin ser, ci antigen diluat într-un PBST: ... 1. o serie dublă de două diluții de antiser bovin omolog de referință; 2. o serie dublă de două diluții de ser bovin negativ. d) Interpretare: titrurile anticorpilor sunt exprimate ca reprezentând diluția finală a serurilor de testat, dând 50% din valoarea medie OD înregistrată în godeurile de control al virusului în absență serului de testat. Titrurile superioare valorii de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
conțin ser, ci antigen diluat într-un PBST: ... 1. o serie dublă de două diluții de antiser bovin omolog de referință; 2. o serie dublă de două diluții de ser bovin negativ. d) Interpretare: titrurile anticorpilor sunt exprimate ca reprezentând diluția finală a serurilor de testat, dând 50% din valoarea medie OD înregistrată în godeurile de control al virusului în absență serului de testat. Titrurile superioare valorii de 1/40 sunt considerate pozitive. Capitolul 3 Porcine A. Tuberculoză Testul tuberculinic intradermic
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
3. controlul celulelor neinoculate; 4. referințe antiser. d) Interpretare: rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în test sunt înregistrate după o incubare de 3-5 zile la temperatura de 37°C. Dacă titrul serului este mai puțin de jumătate (diluție finală), testul este considerat negativ. Dacă probele de ser nediluat sunt toxice pentru țesuturile de cultură, aceste seruri pot fi diluate 1/2 înainte de a fi utilizate în test. Acesta corespunde unei diluții finale a serului de 1/4. La
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
titrul serului este mai puțin de jumătate (diluție finală), testul este considerat negativ. Dacă probele de ser nediluat sunt toxice pentru țesuturile de cultură, aceste seruri pot fi diluate 1/2 înainte de a fi utilizate în test. Acesta corespunde unei diluții finale a serului de 1/4. La titrul serului mai puțin de 1/4 (diluție finală) testul este considerat negativ. ... E. Influență suina Testul de inhibare a hemaglutinării se va efectua conform următorului protocol: a) Procedura: testul se realizează prin
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]