54,545 matches
-
testare, se recomandă ca apa de cultură să aibă aceeași calitate (pH, duritate) ca apa de test. 1.6.2. Aparatură Se folosesc aparatură și echipamente normale de laborator. În mod ideal, echipamentele care vin în contact cu soluțiile de testare sunt confecționate în întregime din sticlă: - oxigenometru (cu microelectrod sau alt echipament adecvat pentru măsurarea oxigenului dizolvat în probele cu volum mic), - aparatură adecvată pentru controlul temperaturii, - pH metru, - echipament pentru determinarea durității apei. 1.6.3. Organisme de experiență
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Mod de operare Testul principal poate fi precedat de un test de stabilire a intervalului, pentru a obține informații legate de intervalul de concentrații ce urmează să fie folosite. Pe lângă testele experimentale, se efectuează un test martor fără substanță de testare și, dacă are semnificație, se efectuează și un test martor care să conțină substanța auxiliară. Daphnia se tratează cu substanța conform modului de operare descris mai jos: - durata: de preferință 48 de ore; - numărul de organisme: cel puțin 20 pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
cel puțin 20 pentru fiecare concentrație testată, de preferință împărțit în patru loturi a câte 5 exemplare fiecare sau două loturi de 10 exemplare; - încărcătură biologică: volumul de apă se prevede astfel încât să asigure cel puțin 2 ml soluție de testare pentru fiecare organism; - concentrația testată: soluția de testare se prepară înainte de introducerea Daphniei, de preferință fără a folosi vreun solvent altul decât apa. Concentrațiile se aleg în progresie geometrică, cu o rație care să nu depășească 2,2. Concentrațiile care
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
preferință împărțit în patru loturi a câte 5 exemplare fiecare sau două loturi de 10 exemplare; - încărcătură biologică: volumul de apă se prevede astfel încât să asigure cel puțin 2 ml soluție de testare pentru fiecare organism; - concentrația testată: soluția de testare se prepară înainte de introducerea Daphniei, de preferință fără a folosi vreun solvent altul decât apa. Concentrațiile se aleg în progresie geometrică, cu o rație care să nu depășească 2,2. Concentrațiile care determină o imobilizare de 0 și 100% după
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
și gama concentraților care provoacă grade intermediare de imobilizare ce permit calcularea lui CE50 la 48 de ore sunt testate în același timp cu martorii; - apă: vezi punctul 1.6.1.2; - lumină: ciclul lumină-întuneric este opțional; - temperatură: temperatura de testare este între 18-22șC, iar pentru fiecare test este constantă, în limita a ± 1șC; - aerare: soluțiile de testare nu se aerează prin barbotare; - hrănire: nu se administrează hrană. La sfârșitul testării se măsoară pH-ul și concentrația oxigenului în soluțiile martor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
ore sunt testate în același timp cu martorii; - apă: vezi punctul 1.6.1.2; - lumină: ciclul lumină-întuneric este opțional; - temperatură: temperatura de testare este între 18-22șC, iar pentru fiecare test este constantă, în limita a ± 1șC; - aerare: soluțiile de testare nu se aerează prin barbotare; - hrănire: nu se administrează hrană. La sfârșitul testării se măsoară pH-ul și concentrația oxigenului în soluțiile martor și în toate soluțiile de testare; pH-ul soluțiilor testate nu trebuie să se modifice. Compușii volatili
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1.2; - lumină: ciclul lumină-întuneric este opțional; - temperatură: temperatura de testare este între 18-22șC, iar pentru fiecare test este constantă, în limita a ± 1șC; - aerare: soluțiile de testare nu se aerează prin barbotare; - hrănire: nu se administrează hrană. La sfârșitul testării se măsoară pH-ul și concentrația oxigenului în soluțiile martor și în toate soluțiile de testare; pH-ul soluțiilor testate nu trebuie să se modifice. Compușii volatili sunt testați în vase umplute complet, închise și suficient de mari pentru a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
fiecare test este constantă, în limita a ± 1șC; - aerare: soluțiile de testare nu se aerează prin barbotare; - hrănire: nu se administrează hrană. La sfârșitul testării se măsoară pH-ul și concentrația oxigenului în soluțiile martor și în toate soluțiile de testare; pH-ul soluțiilor testate nu trebuie să se modifice. Compușii volatili sunt testați în vase umplute complet, închise și suficient de mari pentru a evita lipsa de oxigen. Daphnia se verifică cel puțin după 24 de ore de expunere și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
valori. Când două concentrații consecutive aflate în raport de 2,2 dau numai 0 și 100% imobilizare, aceste două valori sunt suficiente pentru a indica intervalul în care se situează CE50. Dacă se observă că stabilitatea sau omogenitatea substanței de testare nu poate fi menținută, acest lucru se consemnează, iar rezultatele trebuie interpretate cu atenție. 3. RAPORT Protocolul de test cuprinde, dacă este posibil, următoarele informații: - informații despre organismele de experiență (denumirea științifică, specia, furnizorul, orice tratament preliminar, dimensiunea și numărul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
duritate, temperatură), - în cazul substanțelor puțin solubile în apă, metoda de preparare a soluției mamă și a soluțiilor testate, - concentrația eventualelor substanțe auxiliare, - lista concentrațiilor folosite și orice informații disponibile legate de stabilitatea substanțelor chimice la concentrațiile din soluția de testare, - dacă se efectuează analize chimice, metodele folosite și rezultatele obținute, - rezultatele testului de limită, după caz, - descrierea echipamentului de testare, - regimul de iluminare, - concentrațiile de oxigen dizolvat, valorile pH-ului și temperaturilor soluțiilor testate la fiecare 24 de ore, - dovada
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
eventualelor substanțe auxiliare, - lista concentrațiilor folosite și orice informații disponibile legate de stabilitatea substanțelor chimice la concentrațiile din soluția de testare, - dacă se efectuează analize chimice, metodele folosite și rezultatele obținute, - rezultatele testului de limită, după caz, - descrierea echipamentului de testare, - regimul de iluminare, - concentrațiile de oxigen dizolvat, valorile pH-ului și temperaturilor soluțiilor testate la fiecare 24 de ore, - dovada îndeplinirii criteriilor de calitate, - tabelul care prezintă imobilizarea cumulată pentru fiecare concentrație testată și înregistrările aferente controlului (inclusiv pentru testul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
care prezintă imobilizarea cumulată pentru fiecare concentrație testată și înregistrările aferente controlului (inclusiv pentru testul martor cu substanță auxiliară, după caz) la fiecare perioadă de observație recomandată (24 și 48 de ore), - graficul curbei de răspuns concentrație/procentaj la sfârșitul testării, - dacă e posibil, valorile CE50 la fiecare perioadă de observație recomandată (cu limite de încredere de 95%), - metodele statistice folosite pentru determinarea valorilor CE50, - rezultatele obținute, dacă s-a folosit o substanță de referință, - concentrația maximă testată care nu provoacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
folosită în cazul câtorva specii de alge unicelulare, caz în care este furnizată o descriere a metodei împreună cu protocolul de test. Această metodă este cel mai ușor de aplicat în cazul substanțelor solubile în apă, pentru care în condițiile de testare există probabilitatea de a rămâne în apă. Metoda poate fi folosită pentru substanțele care nu interferează direct cu măsurătorile de creștere a algelor. Este de dorit să se colecteze, pe cât este posibil, informații legate de solubilitatea în apă, presiunea de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
structurală, gradul de puritate, natura și procentul de impurități semnificative, prezența și cantitatea aditivilor și coeficientul de partiție n-octanol/apă). 1.2. DEFINIȚII ȘI UNITĂȚI DE MĂSURĂ Densitatea celulară: numărul de celule/mililitru; Creștere: creșterea densității celulare în perioada de testare; Viteza de creștere: creșterea densității celulare în unitatea de timp; CE50: în această metodă, acea concentrație a substanței de testare care determină o reducere cu 50% fie a creșterii (CEb 50), fie a vitezei de creștere (CEr 50) în comparație cu testul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1.2. DEFINIȚII ȘI UNITĂȚI DE MĂSURĂ Densitatea celulară: numărul de celule/mililitru; Creștere: creșterea densității celulare în perioada de testare; Viteza de creștere: creșterea densității celulare în unitatea de timp; CE50: în această metodă, acea concentrație a substanței de testare care determină o reducere cu 50% fie a creșterii (CEb 50), fie a vitezei de creștere (CEr 50) în comparație cu testul martor; NOEC: (concentrația pentru care nu se observă nici un efect advers): în această metodă, cea mai mare concentrație testată pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
în comparație cu testul martor; NOEC: (concentrația pentru care nu se observă nici un efect advers): în această metodă, cea mai mare concentrație testată pentru care nu se observă nici un efect semnificativ de inhibare a creșterii în comparație cu testul martor; Toate concentrațiile substanței de testare se exprimă în greutate pe volum (mg/l). Ele pot fi exprimate de asemenea ca greutate pe greutate (mg.kg-1). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Se poate testa o substanță de referință pentru a demonstra că în condițiile de testare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
testare se exprimă în greutate pe volum (mg/l). Ele pot fi exprimate de asemenea ca greutate pe greutate (mg.kg-1). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Se poate testa o substanță de referință pentru a demonstra că în condițiile de testare din laborator răspunsul speciilor testate nu s-a schimbat semnificativ. Dacă se utilizează o substanță de referință, rezultatele sunt prezentate în protocolul de test. Dicromatul de potasiu poate fi folosit ca substanță de referință, însă culoarea acestuia poate afecta calitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
însă culoarea acestuia poate afecta calitatea și intensitatea luminii accesibile celulelor, precum și determinările spectrofotometrice, dacă se fac. Dicromatul de potasiu s-a folosit într-un test internațional inter-laboratoare [vezi referința bibliografică (3) și apendicele (2)]. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Se poate efectua un test de limită la 100 mg/l, pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Culturile cu creștere exponențială de alge verzi selecționate sunt expuse acțiunii diverselor concentrații de substanță de testare, pe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
DE TESTARE Se poate efectua un test de limită la 100 mg/l, pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Culturile cu creștere exponențială de alge verzi selecționate sunt expuse acțiunii diverselor concentrații de substanță de testare, pe câteva generații, în condiții definite. Soluțiile de testare se incubează timp de 72 de ore, pe durata cărora densitatea celulară din fiecare soluție se măsoară cel puțin din 24 în 24 de ore. Inhibarea creșterii se determină prin comparație
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
la 100 mg/l, pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Culturile cu creștere exponențială de alge verzi selecționate sunt expuse acțiunii diverselor concentrații de substanță de testare, pe câteva generații, în condiții definite. Soluțiile de testare se incubează timp de 72 de ore, pe durata cărora densitatea celulară din fiecare soluție se măsoară cel puțin din 24 în 24 de ore. Inhibarea creșterii se determină prin comparație cu o cultură martor. 1.5. CRITERII DE CALITATE
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
5. CRITERII DE CALITATE Criteriile de calitate se aplică atât testului de limită, cât și testului complet. Densitatea celulară din culturile martor trebuie să crească cu un factor de cel puțin 16 în decurs de 3 zile. Concentrațiile substanței de testare se mențin în limita a 80% din concentrațiile inițiale pe toată perioada testului. Pentru substanțele care se dizolvă ușor în mediul de testare, rezultând soluții stabile, adică acelea care nu se volatilizează, degradează, hidrolizează sau adsorb într-o măsură considerabilă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
să crească cu un factor de cel puțin 16 în decurs de 3 zile. Concentrațiile substanței de testare se mențin în limita a 80% din concentrațiile inițiale pe toată perioada testului. Pentru substanțele care se dizolvă ușor în mediul de testare, rezultând soluții stabile, adică acelea care nu se volatilizează, degradează, hidrolizează sau adsorb într-o măsură considerabilă, concentrația inițială poate fi considerată echivalentă cu concentrația nominală. Trebuie demonstrat că pe toată durata testului au fost menținute aceleași concentrații, iar criteriile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
începutul testului. Concentrația se determină după o perioadă de echilibrare. În oricare din aceste cazuri, trebuie să se efectueze determinări suplimentare pe parcursul testului pentru a confirma concentrațiile reale de expunere sau respectarea criteriilor de calitate. Cantități semnificative de substanță de testare pot fi incorporate în biomasa de alge pe durata testului. De aceea, pentru a demonstra respectarea criteriilor de calitate de mai sus, trebuie luate în considerație atât cantitatea de substanță încorporată în biomasa de alge, cât și substanța din soluție
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
sau, dacă nu este posibil din punct de vedere tehnic, măsurată în coloana de apă). Totuși, întrucât determinarea concentrației substanței în biomasa de alge poate pune probleme tehnice serioase, respectarea criteriilor de calitate poate fi demonstrată folosind un vas de testare cu cea mai mare concentrație a substanței, dar fără alge și măsurând concentrațiile în soluție (sau, dacă nu este posibil din punct de vedere tehnic, în coloana de apă) la începutul și la sfârșitul perioadei de testare. 1.6. DESCRIEREA
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
un vas de testare cu cea mai mare concentrație a substanței, dar fără alge și măsurând concentrațiile în soluție (sau, dacă nu este posibil din punct de vedere tehnic, în coloana de apă) la începutul și la sfârșitul perioadei de testare. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Reactivi 1.6.1.1. Soluțiile substanțelor de testare Soluțiile mamă de concentrația necesară sunt preparate prin dizolvarea substanței în apă deionizată sau în apă conform punctului 1.6.1.2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]